补肾化痰方对PCOS大鼠激素水平的影响和降糖作用的研究
本文关键词:补肾化痰方对PCOS大鼠激素水平的影响和降糖作用的研究,由笔耕文化传播整理发布。
【摘要】:目的:在建立多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)大鼠模型的基础上,研究补肾化痰方对模型大鼠内分泌水平和糖代谢功能的影响,通过对模型大鼠动情周期测定及糖耐量试验(OGTT)等评估模型大鼠的生殖表型和代谢表型,探讨中药补肾化痰方治疗多囊卵巢综合征的作用机制,从而为补肾化痰方治疗多囊卵巢综合征提供实验依据。方法:选用SD清洁级21日龄雌性大鼠95只,随机分为正常组和病理模型组,其中正常组25只,病理模型组70只。23日龄开始,正常组25只大鼠每日颈背部皮下注射大豆油0.2ml,病理模型组70只大鼠每日颈背部皮下注射脱氢表雄酮(DHEA)6mg/100g体重+0.2ml大豆油混合剂,均连续注射20天,建立DHEA诱导的PCOS大鼠模型。造模结束后,分别从正常组和病理模型组各随机选取10只大鼠进行模型评估,其余大鼠进行药物干预实验。将其余75只大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、二甲双胍组、中药低剂量组、中药高剂量组。正常对照组、模型对照组灌服等体积0.5%羧甲基纤维素钠溶液;二甲双胍组灌服予二甲双胍200mg/kg;中药低剂量组灌服20ml/kg(16.6g生药/kg);中药高剂量组灌服20ml/kg(33.2g生药/kg)。各组大鼠连续给药28天。灌胃结束后监测各组大鼠动情周期及OGTT,大鼠处于同一动情周期时以10%的水合氯醛麻醉后,腹主动脉取血5ml,分离血清,置于 80℃冰箱中保存;取大鼠卵巢测量长、宽、厚并称重后,置于4%的多聚甲醛溶液中备用待测。结果:1.大鼠状态观察:正常组大鼠体重逐渐增长,生命体征、活动反应如常。模型组大鼠于连续皮下注射DHEA20天后出现活动减少,饮食、饮水增加,尿量增加等情况,但体重增加不明显。灌胃后,二甲双胍组大鼠、中药低剂量组大鼠、中药高剂量组大鼠体重下降,饮食、饮水较前减少,精神状态较灌胃前好转。2.模型评估:①各组大鼠经过2个周期的阴道涂片后,发现正常组大鼠以阴道开口日为动情期,24小时后进入动情后期,其动情周期规律(4-5天);模型组动情周期变化不规律,可延长至8-9天,或者无明显的动情周期,提示无排卵。②模型组大鼠LH、LH/FSH水平与正常组相比具有显著差异(P0.01);正常组FSH与模型组相比无显著差异(P0.05)。③模型组大鼠卵巢体积较正常组明显增加,P0.01,具有显著差异;模型组卵巢重量与正常组相比,P0.05,具有统计学意义。④各组大鼠体重无显著差异(P0.05)。⑤与正常组比较,模型组GLU和HOMA-IR明显升高(P0.01),AUC水平升高(P0.05)。3.给药后评估:①通过对大鼠阴道涂片的监测,正常组大鼠排卵规律;而模型组的大鼠动情周期紊乱,排卵不规律。通过药物干预后,二甲双胍组、中药低剂量组和中药高剂量组大鼠的动情周期恢复规律。②与模型组相比,其他各组大鼠LH、LH/FSH水平明显降低,具有显著差异(P0.01)。中药低剂量组LH高于二甲双胍组(P0.05),中药高剂量组LH、LH/FSH水平明显低于二甲双胍组(P0.01)。中药高剂量组大鼠血清FSH水平与模型组相比具有显著统计学意义(P0.01),其余各组较模型组无明显变化。③正常组大鼠卵巢体积与模型组相比P0.05,具有统计学意义;其余各组与模型组相比具有显著统计学意义(P0.01);中药低剂量组大鼠与二甲双胍组相比,具有统计学意义(P0.05),而中药高剂量组则明显降低,具有显著统计学意义(P0.01)。正常组、中药低剂量组大鼠卵巢重量与模型组相比具有统计学意义(P0.05),二甲双胍组无统计学意义(P0.05),中药高剂量组具有明显统计学意义(P0.01)。与二甲双胍组比,中药低剂量组无统计学意义(P0.05),中药高剂量组具有统计学意义(P0.05)。④中药高剂量组与模型组相比,体重具有显著意义(P0.01),与二甲双胍组相比,P0.05,具有统计学意义,其余各组则无统计学意义(P0.05)。⑤与模型组相比,各组大鼠GLU、AUC和HOMA-IR水平均明显降低,P0.01,具有显著统计学意义;中药低剂量组、中药高剂量组大鼠的GLU和AUC与模型组相比,无统计学意义。中药低剂量组、中药高剂量组大鼠HOMA-IR与二甲双胍组相比具有显著统计学意义(P0.01)。结论:1.本实验成功建立了由DHEA诱导的PCOS大鼠模型,发现其内分泌变化及糖代谢与PCOS非常相似,存在高胰岛素血症。因此,本模型是一种比较成熟和理想的PCOS动物模型。2.补肾化痰方能够降低PCOS大鼠LH、LH/FSH水平,改善PCOS模型大鼠内分泌情况,从而恢复卵巢功能,促进正常排卵。3.补肾化痰方能够改善多囊卵巢综合征胰岛素抵抗的情况,预防代谢综合征。
【关键词】:多囊卵巢综合征 补肾化痰方 PCOS模型 激素水平 糖代谢
【学位授予单位】:河南中医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R285.5
【目录】:
- 缩略语表6-7
- 摘要7-9
- Abstract9-13
- 前言13-15
- 材料与方法15-19
- 1.实验材料15-16
- 1.1 实验动物15
- 1.2 饲料15
- 1.3 实验药物15
- 1.4 主要试剂15
- 1.5 主要仪器15-16
- 2 实验方法16-18
- 2.1 实验条件16
- 2.2 造模方法16
- 2.3 模型动物临床表型的评估16-17
- 2.4 分组及给药方法17
- 2.5 标本采集与指标检测17-18
- 3 图像分析和统计学处理18-19
- 实验结果19-23
- 1 实验过程中一般状态观察19
- 2. 模型动物临床表型的评估19-20
- 2.1 生殖表型评估19-20
- 2.2 代谢表型评估20
- 3. PCOS大鼠给药后评估20-23
- 3.1 生殖表型评估20-22
- 3.2 代谢表型评估22-23
- 理论讨论23-32
- 1.PCOS大鼠模型的建立23
- 1.1 DHEA致PCOS大鼠模型的理论基础23
- 1.2 DHEA致PCOS大鼠模型是成熟的模型23
- 2.中医对多囊卵巢综合征的认识23-24
- 2.1 古代医家对多囊卵巢综合征的认识23-24
- 2.2 现代医家对多囊卵巢综合征的认识24
- 3.补肾化痰方治疗PCOS的理论依据24-26
- 3.1 肾虚痰湿是多囊卵巢综合征的病因24-25
- 3.2 补肾化痰为治疗多囊卵巢综合征之法25
- 3.3 补肾化痰方的药物组成与方药分析25-26
- 4. 古代医家对单味药的认识及药理研究26-30
- 5.补肾化痰方对PCOS大鼠模型激素水平的影响和降糖作用的研究30-31
- 5.1 补肾化痰方对PCOS大鼠模型激素水平的影响30
- 5.2 补肾化痰方对PCOS模型大鼠降糖作用的影响30-31
- 6. 本研究的创新和不足之处31-32
- 6.1 创新之处31
- 6.2 不足之处31-32
- 结论32-33
- 致谢33-34
- 参考文献34-37
- 附录1 阴道脱落细胞涂片37-38
- 附录2 文献研究38-47
- 参考文献45-47
- 附录3 在校期间论文论著和科研情况47
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