Sonic hedgehog信号通路在脂多糖所致小鼠急性肺损伤中的表达变化及意义

发布时间：2017-06-05 02:14

  本文关键词：Sonic hedgehog信号通路在脂多糖所致小鼠急性肺损伤中的表达变化及意义，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：探讨Sonic hedgehog (SHH)信号通路中的相关分子SHH、PTC、GLI1在脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)所致的小鼠急性肺损伤(acute lung jinjury, ALI)中的表达变化及意义,为临床上急性肺损伤的治疗提供新的思路。方法：选择5-7周龄、体质量20-25g的雄性BALB/c小鼠作为实验动物,并随机分为对照组(腹腔注射等量生理盐水)、LPS处理组(5mg/kg LPS腹腔注射)、环巴胺处理组(5mg/kg LPS腹腔注射后30min腹腔注射环巴胺50mg/kg)。分别于给药后6h、12h、24h,戊巴比妥钠腹腔注射麻醉后留取标本,肉眼观察肺组织大体改变,4%多聚甲醛固定后切片并HE染色观察肺组织病理学改变,并做出病理损伤评分；取一肺叶60℃48h烘干后,测定肺组织湿干质量比值(wet mass/dry mass, W/D);荧光实时定量PCR检测不同处理组肺组织肿瘤坏死因子-α (turner necrosis factor-alpha, TNF-α)、SHH、PTC及下游转录因子GLI1的mRNA表达；Western blot检测各处理组肺组织核因子-κB (nuclear factor-κB, NF-κB)、SHH和GLIl的蛋白表达情况。结果：对照组肺组织光镜下可见肺泡腔清晰、无明显炎性细胞浸润,病理损伤评分很低；LPS处理组肺组织肺泡充血水肿、肺泡隔明显增厚,肺间质广泛炎性细胞浸润,肺组织病理损伤评分明显高于对照组(P0.01)；环巴胺处理组肺泡腔大范围消失、肺组织大片实变、弥漫炎性细胞浸润,各时间点肺组织病理损伤评分均较LPS处理组高(P0.05)。对照组在各时间点的W/D均较低,LPS处理组各时间点的W/D均较对照组高(6h、12h时P0.01,24h时P0.05),而环巴胺处理组的W/D在各时间点均高于LPS处理组(P0.05)。对照组TNF-α mRNA的表达在各时间点均较低,LPS处理组TNF-α mRNA的表达在各时间点均明显高于对照组(P0.01),环巴胺处理组在12h、24h时TNF-αmRNA的表达较LPS处理组高(P0.05)。对照组NF-κB蛋白的表达很低,LPS处理组NF-κB的蛋白表达明显高于对照组(6h、12h,P0.01；24h,P0.05),而环巴胺处理组NF-κB的蛋白表达较LPS处理组更高(P0.01)。对照组SHH.PTC.GLI1的mRNA表达水平均较低。LPS处理组在6h时SHH、PTC、GLI1的mRNA表达水平与对照组无明显差异(P0.05),而在12h、24h时SHH、PTC、GLI1的mRNA表达均明显高于对照组(P0.01),且与时间呈正相关(P0.01)。环巴胺处理组在6h时SHH、PTC、GLI1的mRNA表达与LPS处理组相比无明显差异(P0.05),12h时SHH、PTC、GLI1的InRNA表达均较LPS处理组降低(P0.05),24h时其表达较LPS处理组明显下降(SHH P0.01,PTC P0.05, GLI1P0.01)。对照组各时间点的SHH、GLI1蛋白表达均较低。与对照组相比,LPS处理组在6h、12h、24 h的SHH、GLI1蛋白表达水平均明显升高(SHH 6h P0.05,12h.24h P0.01；GLIl各时间点P0.01),且与时间呈正相关(P0.01)。环巴胺处理组SHH. GLI1的蛋白表达水平均较LPS处理组降低(SHH P0.01, GLI1 P0.05)。结论：1.对照组SHH、PTC、GLI1的mRNA表达及SHH、GLI1的蛋白表达量均很低,SHH信号通路处于抑制状态,而LPS处理后12h、24h时SHH、PTC、GLI1的mRNA表达量及6h、12h、24h时SHH、GLI1的蛋白表达量均明显高于对照组,提示在LPS所致的急性肺损伤中存在SHH信号通路的激活,表达量明显增加。2.给予SHH信号通路的抑制剂环巴胺干预后,12h、24h时SHH、PTC、GLI1的mRNA表达量及SHH、GLI1的蛋白表达量均较单独LPS处理组下降,提示SHH信号通路的表达受到抑制,而此时,环巴胺处理组的肺组织病理损伤评分、W/D、TNF-α mRNA和NF-κB蛋白的表达却较单独LPS处理SHH信号通路激活时更高,即SHH信号通路受抑制时的肺组织损伤程度较SHH信号通路激活时重,说明SHH信号通路受抑制可加重肺组织的损伤程度,提示SHH信号通路的激活可减轻肺组织损伤、参与肺组织损伤后修复过程。
【关键词】：Sonic hedgehog信号通路 急性肺损伤 脂多糖 环巴胺
【学位授予单位】：山东大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R563
【目录】：

• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-11
• 符号说明11-13
• 前言13-14
• 材料与方法14-23
• 结果23-31
• 讨论31-34
• 结论34-35
• 创新点35-36
• 参考文献36-41
• 文献综述41-55
• 参考文献47-55
• 致谢55-56
• 发表学术论文目录56-57
• 附件57

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 涂自智,肖卫民,刘梅冬,尢家

本文编号：422699