益气养阴活血方对糖尿病大鼠大血管NF-κB表达的影响

发布时间：2017-10-09 08:29

  本文关键词：益气养阴活血方对糖尿病大鼠大血管NF-κB表达的影响

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【摘要】：目的:糖尿病大血管病变是糖尿病血管并发症之一,也是导致糖尿病死亡的重要原因之一。从而,积极防治糖尿病大血管的早期病变具有重大的意义。益气养阴活血方是治疗糖尿病大血管病变的通用方剂。该实验腹腔注射链脲佐菌素复制糖尿病大鼠模型,成模后施予药物干预,观察益气养阴活血方在大鼠体重、一般行为、血糖、血脂、大血管NF-κB以及胸主动脉内皮组织病理形态学的变化,探讨本方对糖尿病大鼠并发大血管病变的防治效果与作用机制。方法:筛选清洁级健康的雄性wistar大鼠50只,体重约在230g~250g,普通饲料适应性的喂养4天后,随机的选出6只大鼠作为正常对照组(NG),余44只大鼠制造成糖尿病模型。将44只大鼠施予浓度为1%链脲佐菌素(STZ)柠檬酸缓冲液(柠檬酸缓冲液的浓度为0.1mmol/L,p H4.5)按60mg/kg体重单次腹腔注射,NG给予相应体积的1%柠檬酸-柠檬酸钠溶液进行腹腔注射。72小时后大鼠尾静脉采血,如果大鼠血糖超过或等于16.7mmol/L,且饮水量、尿量明显增多,则造模成功。成模后,随机将大鼠分为模型组(MG)、中药组(益气养阴活血方组,ZG)、西药组(辛伐他汀组,XG)、中药+西药组(益气养阴活血方+辛伐他汀组,ZXG),每组各有11只。造模成功一周后,ZG给予益气养阴活血方按照10ml/kg体重水煎浓缩液灌胃,XG予辛伐他汀混悬液0.33mg/kg灌胃,ZXG上午施予与中药组等量益气养阴活血中药,下午施予与西药组等量的西药辛伐他汀,N G与MG施予相应中药体积的生理盐水灌胃,每日一次。给药12周末,禁水、禁食12h,2%戊巴比妥钠按照20mg/kg体重腹腔注射麻醉大鼠,断头取血,检测血浆胆固醇、葡萄糖、低密度脂蛋白及高密度脂蛋白。在无菌操作下取大鼠胸主动脉作为标本,放置于4%的多聚甲醛溶液中,制作切片行HE染色,观察主动脉血管内皮组织变化的情况,免疫组化检测主动脉NF-κB表达的情况。结果:1大鼠一般情况的观察NG中的大鼠精神状态良好,毛色鲜亮有光泽,活动灵活自如,体重明显增加,饮水正常,饮食正常,尿量正常。MG中的大鼠精神萎靡不振,表现出了明显的“三多一少”症状,即多食、多饮、多尿和消瘦,且毛色枯黄,无光泽,反应迟钝,活动量明显少于NG中的大鼠。其中,一部分大鼠随着实验的进行,出现了糖尿病并发症,如肢体水肿,躯体感染等等。其他各治疗组中的大鼠的临床表现,较NG中的表现严重,但较MG中的表现有明显的减轻。MG和XG各死亡2只,死亡原因主要是大鼠皮肤感染和互相撕咬。ZG死亡1只,原因为灌胃不当。2大鼠血糖(BG)水平的观察MG、ZG、XG、ZXG中的大鼠血糖均增高,与NG比较,差别有统计学意义(P0.05);XG与MG之间血糖比较差别不明显,无统计学意义(P0.05);ZG和ZXG与MG之间比较血糖降低,差别有统计学意义(P0.05);ZG与ZXG之间血糖比较变化不明显,差别无统计学意义(P0.05)。3大鼠血脂(总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL))水平的观察MG、ZG、XG、ZXG中的大鼠TC均增高,与NG比较,差别有统计学意义(P0.05);ZG与MG比较TC变化不明显,差别无统计学意义(P0.05);XG与ZXG和MG比较,TC较MG降低,差别有统计学意义(P0.05);XG与ZXG比较,TC变化不明显,差别没有统计学意义(P0.05)。MG、ZG、XG、ZXG中的大鼠LDL均增高,与NG比较,差别有统计学意义(P0.05);ZG与MG比较LDL变化不明显,差别无统计学意义(P0.05);XG与ZXG和MG比较,LDL较MG减少,差别有统计学意义(P0.05);ZXG与XG比较,LDL有所减少,差别有统计学意义(P0.05)。MG、ZG、XG、ZXG中的大鼠HDL均降低,与NG比较,差别是有统计学意义(P0.05);ZG、XG、ZXG三组与MG相比较,HDL增高,差别有统计学意义(P0.05);治疗组之间进行比较,HDL有变化,差别有统计学意义(P0.05)。HE染色后,NG内皮细胞形态与排列正常,轮廓清晰,细胞中的胞浆着色较为均匀,动脉内皮上的细胞呈现扁平壮,内膜平坦、光滑,中膜为弹力板和平滑肌细胞,且两者形态与排列正常。MG大鼠主动脉内膜局限性增厚且局部隆起,中膜的平滑肌细胞可见增生及排列紊乱,增生平滑肌细胞处的弹力板排列絮乱,呈波浪状,甚至可以见到弹力板出现断裂与分离现象。各个治疗组大鼠主动脉内皮细胞的组织形态变化较MG明显减轻。5大鼠血管NF-κB的表达MG、ZG、XG、ZXG中的大鼠NF-κB均增高,与NG比较,差别有统计学意义(P0.05);各治疗组与MG之间比较NF-κB明显降低,差别有着统计学意义(P0.05);三个治疗组之间进行比较,NF-κB有变化,差别有统计学意义(P0.05)。4动脉内皮组织的观察结论:1益气养阴活血方能够使糖尿病大鼠的一般表现好转,这可能是与调节脂质代谢、降低血糖及改善主动脉内皮组织病理形态有关。2益气养阴活血方防治糖尿病大鼠并发大血管病变的机制可能是其能够改善脂质代谢,降低血糖,抑制内皮NF-κB表达有关。
【关键词】：糖尿病大血管病变 益气养阴活血方 核因子κB 链脲佐菌素(STZ) 糖尿病动物模型
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R285.5
【目录】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 英文缩写11-12
• 前言12-13
• 材料与方法13-16
• 结果16-19
• 附图19-27
• 附表27-29
• 讨论29-36
• 结论36
• 参考文献36-39
• 综述 中医药防治糖尿病及其大血管并发症的研究进展39-45
• 参考文献43-45
• 致谢45-46
• 个人简历46

【参考文献】

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