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输尿管损伤后瘢痕狭窄形成机制及干预的实验研究

发布时间:2018-11-08 18:02
【摘要】:【目的】构建兔输尿管腔内损伤模型,观察输尿管损伤前后病理变化及致纤维化因子指标高低,研究依那普利对输尿管损伤后修复的意义。 【方法】以新西兰长耳兔为研究对象构建兔输尿管腔内损伤模型,A组实验取新西兰长耳兔40只,随机平均分为腔内机械损伤组和热损伤组,机械损伤组分为a组和b组,热损伤组分为c组,d组,机械损伤组两周(a组)和四周(b组)以及热损伤组两周(c组)和四周(d组)后分别取损伤段输尿管与对侧正常输尿管2cm,行病理切片和实时定量聚合酶链反应(Real time quantitative polymerase chainreaction,RT-PCR)观察损伤输尿管与正常输尿管的病理变化及表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)、转化生长因子(transforming growth factor β,TGF-β)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)、角化生长因子(keratinocyte growth factor,KGF)、Ⅰ型胶原a1(Ⅰcollagen type a1,COLIa1)、 Ⅰ型胶原a2(Ⅰcollagen type a2,COLIa2)、Ⅲ型胶原(Ⅲcollagen,COLⅢ)、纤维连接蛋白(fibrin,FN)等细胞因子的表达情况,筛选敏感指标。B组(干预组)实验取新西兰长耳兔40只,同样随机平均分为腔内机械损伤组和热损伤组,机械损伤组分为一组和二组,热损伤组分为三组,四组,从实验开始给予依那普利糖丸10mg/Kg/d口服,直到实验结束。机械损伤组两周(一组)和四周(二组)以及热损伤组两周(三组)和四周(四组)后分别取损伤段输尿管2cm,以同时期A组动物损伤段输尿管做对照,行苏木精-伊红(hematoxylin-eosin stain,HE)染色及RT-PCR分别对比药物干预对损伤输尿管的影响。 【结果】兔输尿管腔内机械损伤及热损伤模型均构建成功,A组动物中,HE染色提示输尿管腔内机械损伤及热损伤均造成了输尿管粘膜下层及肌层出现不同程度的增厚,成纤维细胞增生,胶原纤维排列交错紊乱,而粘膜层及外膜层比较完整,c组较a组纤维化程度高,b组和d组纤维化程度无明显差异,b组较a组,d组较c组纤维化程度明显增加;EGF、TGF-β、CTGF、COLIa1、COLIa2、COLⅢ、FN等细胞因子的表达量较正常输尿管显著升高(均P0.05),其中,c组较a组表达量升高(均P0.05),b组和d组表达量无明显变化(均P0.05),b组较a组,d组较c组表达量明显增加(均P0.05)。KGF各组表达量无明显增加(均P0.05)。B组依那普利干预研究中,EGF、TGF-β、CTGF、FN的表达量一组较a组,二组较b组,三组较c组,四组较d组显著降低(均P0.05);而COLIa1、COLIa2、COLⅢ表达量有所下降,但差异无统计学意义(均P0.05)。HE染色结果显示损伤输尿管粘膜完整,粘膜下层及肌层仍有不同程度的增厚,,一组较a组,二组较b组,三组较c组,四组较d组无明显改善。 【结论】输尿管腔内损伤后所致输尿管狭窄实质为输尿管粘膜下层及肌层纤维瘢痕形成;EGF、TGF-β、CTGF、COLIa1、COLIa2、COLⅢ、FN等细胞因子在损伤输尿管中表达升高;依那普利可明显降低EGF、TGF-β、CTGF、FN的表达,对COLIa1、COLIa2、COLⅢ的表达也有一定抑制作用;热损伤比机械损伤更容易导致损伤输尿管的纤维化,损伤时间越久,纤维化程度越高;依那普利干预后输尿管成纤维细胞的增生并未受到明显抑制,提示药物干预并不能很好的降低输尿管狭窄的发生率,避免腔内输尿管损伤,才是预防输尿管狭窄的主要手段,只有这样才能从根本上降低输尿管狭窄的发生率。
[Abstract]:......
【学位授予单位】:苏州大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2014
【分类号】:R699.4

【参考文献】

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本文编号:2319260

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