PARP-1在前列腺癌中表达的意义及其在前列腺癌PC3细胞株增殖中的作用研究
发布时间:2019-04-13 15:57
【摘要】:目的探讨中国人群中多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)及其活性产物聚腺苷二磷酸核糖(PAR)在前列腺癌及良性前列腺增生组织中的表达及意义;研究PARP-l特异性小分子干扰RNA (siRNA)对雄激素非依赖性前列腺癌PC3细胞株增殖的影响及其作用机制,为前列腺癌的治疗提供一个新的思路。 方法应用免疫组织化学SP法检测并比较PARP-1和PAR在78例前列腺癌和49例前列腺增生组织中的表达,分析其在前列腺癌中与血清TPSA (TPSA>20及TPSA≤20)的关系,及其在高分化前列腺癌(Gleason评分≤6分)和低分化前列腺癌(Gleason评分≥8分)组织中的表达差异。同时,设计合成3条PARP-l特异性siRNA序列,进行脂质体转染后,通过RT-PCR、蛋白质印迹法检测其对PARP-l的干扰效果,,筛选出最佳干扰效果的2条siRNA序列;通过单溶液细胞增殖检测法检测干扰PC3细胞内源性PARP-l表达对细胞增殖的影响,并检测细胞内Akt及其下游GSK3β活化水平的变化。 结果1、PARP-1及PAR主要表达于前列腺癌及前列腺增生组织中细胞核中,几乎不在细胞质中表达。PARP-1及PAR在前列腺癌组织中表达的阳性率及强阳性率均显著高于前列腺增生组织(P<0.05)。 2、尽管PARP-1或PAR在前列腺癌患者PSA>20ng/ml组中的阳性及强阳性表达高于PSA≤20ng/ml组,但并无统计学差异(P>0.05)。同样,PARP-1或PAR在前列腺癌患者Gleason评分≥8组中的阳性及强阳性表达高于Gleason评分≤6组,但亦并无统计学差异(P>0.05)。 3、PARP-1特异性干扰序列siRNA-1706、siRNA-2003和siRNA-2907均可以明显抑制PARP-l mRNA和蛋白的表达(P0.05)。其中siRNA-1706的干扰效果最好,siRNA-2907的干扰效果最弱,差异有统计学意义(P0.05)。 4、转染PARP-1的siRNA-1706和siRNA-2003均可以明显抑制PC3细胞增殖,差异均有统计学意义(P0.01)。 5、转染PARP-1的siRNA-1706和siRNA-2003在明显抑制PARP-l表达的同时,也明显抑制Akt(Ser473位点)及其下游GSK3β(Ser9位点)的磷酸化,但对总Akt1和GSK3β的表达并无明显影响。结论1、PARP-1及其活性产物PAR在前列腺癌组织中的表达较良性前列腺增生组织中明显增高,表明其可能在前列腺癌发生发展中起重要作用。 2、PARP-1及PAR与前列腺癌患者血清TPSA及Gleason评分无明显相关性,但有随着TPSA及Gleason评分增高而表达增高的趋势,表明其可能作为前列腺癌进展的标志物,但仍需进一步验证。 3、PARP-l特异性siRNA可以明显干扰PC3细胞内源性PARP-l的表达并抑制细胞增殖,该抑制作用与Akt的活化抑制以及其下游GSK3β的激活有关,有助于前列腺癌的分子机制研究及治疗探索。但PARP-l特异性siRNA对细胞增殖相关基因的转录调控机制仍有待进一步研究。 4、抑制PARP-1功能有望成为治疗前列腺癌的新的靶点,为前列腺癌的治疗提供一个新的思路。
[Abstract]:Objective to investigate the expression and significance of poly (adenosine diphosphate) polymerase-1 (PARP-1) and its active product polyadenosine diphosphate (PAR) in prostate cancer and benign prostatic hyperplasia (BPH) in Chinese population. To study the effect of PARP-l-specific small interfering RNA (siRNA) on the proliferation of androgen-independent prostate cancer PC3 cell line and its mechanism, and to provide a new idea for the treatment of prostate cancer. Methods Immunohistochemistry SP method was used to detect and compare the expression of PARP-1 and PAR in 78 cases of prostate cancer and 49 cases of benign prostatic hyperplasia. The relationship between the expression of PAR and serum TPSA (TPSA > 20 and TPSA 鈮
本文编号:2457721
[Abstract]:Objective to investigate the expression and significance of poly (adenosine diphosphate) polymerase-1 (PARP-1) and its active product polyadenosine diphosphate (PAR) in prostate cancer and benign prostatic hyperplasia (BPH) in Chinese population. To study the effect of PARP-l-specific small interfering RNA (siRNA) on the proliferation of androgen-independent prostate cancer PC3 cell line and its mechanism, and to provide a new idea for the treatment of prostate cancer. Methods Immunohistochemistry SP method was used to detect and compare the expression of PARP-1 and PAR in 78 cases of prostate cancer and 49 cases of benign prostatic hyperplasia. The relationship between the expression of PAR and serum TPSA (TPSA > 20 and TPSA 鈮
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