肾损伤分子-1在肾小管上皮细胞缺氧损伤中的保护作用

发布时间：2019-08-01 10:42

【摘要】：目的观察肾损伤分子-1(KIM-1)对肾小管上皮细胞缺氧损伤时增殖及凋亡的影响,证实KIM-1对肾缺氧损伤的保护作用。方法以人近端肾小管上皮细胞HK-2为研究对象,用pcDNA-hKIM-1质粒转染HK-2细胞,获得稳定表达KIM-1的pcDNA-hKIM-1-HK2细胞株。观察pcDNA-hKIM-1-HK2细胞(A组)和KIM-1抗体预处理pcDNA-hKIM-1-HK2细胞(C组)在缺氧损伤后细胞活力、凋亡指标及凋亡相关信号分子表达,以未转染缺氧HK-2细胞(B组)作为对照。结果 A组细胞活力指数高于B组(0.427±0.046 vs.0.210±0.036,P0.05),细胞凋亡数量及流式细胞仪检测的缺氧早、晚期凋亡指数明显低于B组(P0.05)。A组细胞缺氧时磷酸化ERK、磷酸化Akt表达较C组明显升高(P0.05)。结论 KIM-1对肾小管上皮细胞缺氧损伤具有保护作用,其机制与激活PI3K-Akt/PKB和ERK信号通路抑制凋亡有关。
【图文】：

胞ＫＩＭ－１表达结果３组细胞缺氧损伤后培养基中可溶性ＫＩＭ－１表达检测结果见图１。Ａ组细胞ＫＩＭ－１浓度［（１３０．８８±２３．９２）ｎｇ／Ｌ］与Ｂ组细胞［（１９．７８±４．６０）ｎｇ／Ｌ］比较差异有统计学意义（ｔ＝１３．６８１，Ｐ＝０．００２），而Ｃ组细胞ＫＩＭ－１浓度［（１７．２０±３．７４）ｎｇ／Ｌ］与Ｂ组比较差异无统计学意义（ｔ＝０．４０７，Ｐ＝０．７５３）。ａ：Ｐ＜０．０５，与Ｂ组比较。图１ＨＫ２细胞缺氧损伤后的可溶性ＫＩＭ－１浓度检测２．２ＭＴＴ法检测细胞活力结果３组细胞缺氧损伤后细胞活力检测结果见图２。Ａ组细胞活性指数（０．４２７±０．０４６）与Ｂ组（０．２１０±０．０３６）比较差异有统计学意义（ｔ＝９．４２３，Ｐ＝０．０１１），而Ｃ组细胞活性指数（０．１９８±０．０１５）与Ｂ组比较差异无统计学意义（ｔ＝０．４１３，Ｐ＝０．７２０）。ａ：Ｐ＜０．０５，与Ｂ组比较。图２ＨＫ２细胞缺氧损伤后的细胞活力检测（ＭＴＴ法）２．４流式细胞仪细胞凋亡检测３组细胞缺氧后流式细胞仪凋亡检测结果见图３。结果显示：Ａ组细胞缺氧损伤后的早期凋亡量、晚期凋亡量及凋亡总量分别为（２．８４±０．２５）％、（５．２９±１．２７）％及（８．１３±１．４４）％，明显低于Ｂ组ＨＫ２细胞（ｔ＝２０．２８０，７．９５８，２５．３０１；Ｐ＝０．００２，０．０１５，０．００２）。而Ｃ组细胞凋亡量［（１８．５５±６．３８１）

０．０５，与Ｂ组比较。图１ＨＫ２细胞缺氧损伤后的可溶性ＫＩＭ－１浓度检测２．２ＭＴＴ法检测细胞活力结果３组细胞缺氧损伤后细胞活力检测结果见图２。Ａ组细胞活性指数（０．４２７±０．０４６）与Ｂ组（０．２１０±０．０３６）比较差异有统计学意义（ｔ＝９．４２３，Ｐ＝０．０１１），而Ｃ组细胞活性指数（０．１９８±０．０１５）与Ｂ组比较差异无统计学意义（ｔ＝０．４１３，Ｐ＝０．７２０）。ａ：Ｐ＜０．０５，与Ｂ组比较。图２ＨＫ２细胞缺氧损伤后的细胞活力检测（ＭＴＴ法）２．４流式细胞仪细胞凋亡检测３组细胞缺氧后流式细胞仪凋亡检测结果见图３。结果显示：Ａ组细胞缺氧损伤后的早期凋亡量、晚期凋亡量及凋亡总量分别为（２．８４±０．２５）％、（５．２９±１．２７）％及（８．１３±１．４４）％，明显低于Ｂ组ＨＫ２细胞（ｔ＝２０．２８０，７．９５８，，２５．３０１；Ｐ＝０．００２，０．０１５，０．００２）。而Ｃ组细胞凋亡量［（１８．５５±６．３８１）％、（２６．８４±６．６５１）％、（４５．３９±６．３７７％）］与Ｂ组细胞相似（ｔ＝３．８５１，２．８０７，４．７２５；Ｐ＝０．０６１，０．１０７，０．０５２）。Ａ：参照；Ｂ：Ａ组；Ｃ：Ｃ组；Ｄ：Ｂ组。图３ＨＫ２细胞缺氧损伤后的凋亡检测（流式细胞术）２．５凋亡相关信号分子表达３组细胞缺氧损伤后的凋亡相关信号分子检测结果见图４。３组细胞ＥＲＫ、Ａｋｔ及磷酸化ｐ３８，磷酸化ＪＮＫ
【作者单位】： 第三军医大坪医院野战外科研究所泌尿外科;
【基金】：第三军医大学青年人才创新基金资助(2010XQN30)
【分类号】：R692

【共引文献】

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