吡格列酮作用于人膀胱癌细胞及正常膀胱移行细胞后相关指标的研究

发布时间：2020-04-10 02:25

【摘要】：目的:探讨PPAR-γ激动剂吡格列酮对正常膀胱移行细胞SV-HUC-1及膀胱癌细胞5637的增殖、凋亡、侵袭、迁移能力及两者PPAR-γ、β-catenin、AP-1表达的影响。材料和方法:培养后的正常膀胱移行细胞SV-HUC-1及膀胱癌细胞5637分别用吡格列酮对照组(0μM)和实验组(10μM,20μM,40μM)处理24h、48h和72h。MTT及流式细胞学分别检测细胞的增殖抑制及凋亡情况。实时定量PCR(Polymerase Chain Reaction,聚合酶链式反应)检测PPAR-γmRNA在两种细胞中的表达情况。免疫印迹法(Western blot)检测β-catenin、AP-1的蛋白表达情况。Transwell实验检测不同浓度吡格列酮对膀胱癌细胞5637迁移及侵袭力的影响。依据实验结果探讨PPAR-γ激动剂吡格列酮对正常膀胱移行细胞和膀胱癌细胞增殖、迁移及各相关因子表达变化的影响。结果:(1)经过PPAR-γ激动剂吡格列酮处理后的正常膀胱移行细胞SV-HUC-1于24h、48h、72h时相对于对照组增殖明显受抑制,48h后正常膀胱移行细胞SV-HUC-1凋亡率随着吡格列酮浓度增加而上升,差异具有统计学意义(P0.05),膀胱癌细胞5637未见明显变化。(2)RT-PCR检测正常膀胱移行细胞SV-HUC-1及膀胱癌细胞5637的PPAR-γmRNA随着吡格列酮浓度的增加其表达均相应增加,且PPAR-γ在膀胱癌细胞5637中表达较少(P0.05)。(3)Western blot法检测正常膀胱移行细胞SV-HUC-1中,随着吡格列酮浓度的增加AP-1及β-catenin的蛋白表达未见明显变化,膀胱癌细胞5637中β-catenin、AP-1较正常膀胱细胞表达水平较高,且随着吡格列酮浓度增加有下降趋势(P0.05)。(4)随着吡格列酮浓度增加膀胱癌细胞的Transwell小室孔穿过的数目未见明显变化。结论:1.PPAR-γ激动剂吡格列酮可促进正常膀胱细胞细胞凋亡并对其增殖起抑制作用,对膀胱癌细胞无增殖抑制及凋亡作用。2.PPAR-γ在膀胱癌细胞中较正常膀胱细胞表达量少。3.AP-1、β-catenin在膀胱癌细胞中较正常膀胱细胞表达量高,PPAR-γ激动剂吡格列酮可抑制AP-1、β-catenin的表达。4.PPAR-γ激动剂吡格列酮不影响膀胱癌细胞的侵袭及迁移力。
【图文】：

48h后不同浓度PIO处理后的正常膀胱细胞较对照组凋亡变化情况

72h后经不同浓度PIO处理后的膀胱癌细胞及正常膀胱细胞PPAR-γmRNA表达情况
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R737.14

【参考文献】

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1 许斌;华立新;;膀胱癌流行病学进展[J];国际泌尿系统杂志;2007年04期

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本文编号：2621616