调控TET2表达对膀胱尿路上皮癌T24细胞增殖及侵袭的影响

发布时间：2020-06-04 15:00

【摘要】：目的:探索TET2对膀胱尿路上皮癌T24细胞增殖及侵袭行为的影响。材料与方法:以膀胱癌尿路上皮癌T24细胞作为实验对象,将实验对象分为7组:T24细胞组即空白组,抑制对照组(T24细胞+TET2-NC),TET2-519抑制组(T24细胞+TET2-homo-519),TET2-1417抑制组(T24细胞+TET2-homo-1417),TET2-3092抑制组(T24细胞+TET2-homo-3092),过表达对照组(T24细胞+空白质粒),TET2过表达组(T24细胞+TET2过表达质粒)。采用脂质体Lipofectamine~(TM)2000完成转染,采用蛋白免疫印迹法检测各组T24细胞TET2蛋白表达情况。利用MTT实验测定各组T24细胞增殖情况,采用Transwell实验观察各组T24细胞侵袭能力的改变。选择SPSS22.0软件对实验数据进行统计学分析。结果:1.使用荧光显微镜检测细胞转染情况,当转染率大于80%表示转染成功,可进入下一步实验。2.蛋白免疫印迹:TET2-519抑制组、TET2-1417抑制组、TET2-3092抑制组TET2的蛋白表达情况对比于抑制对照组均有不同程度下降,其中TET2-519抑制组相比较于抑制对照组差异具有统计学意义,(p0.05)。TET2过表达组TET2蛋白表达对比TET2过表达对照组升高(p0.05)。3.MTT实验:TET2-519抑制组细胞增值率为:17.18%±2%,与抑制对照组相比差异具有统计学意义(p0.05)。TET2过表达组细胞抑制率为16.82%±8%,与过表达对照组相比差异具有统计学意义(p0.05)。4.Transwell实验:TET2-519抑制组与抑制对照组相比T24细胞侵袭能力增强(p0.05)。TET2过表达组与过表达对照组对比T24细胞侵袭能力减弱(p0.05)。结论:TET2的表达上调可以抑制T24细胞的增殖及侵袭。
【图文】：

图 4.1.1 细胞转染情况（200×）疫印迹法检测实验组及对照组 T24 细胞率大于 80%细胞，提取总蛋白。使用β-actin 作直至使得各组蛋白量基本相等。白免疫印迹法检测干预 TET2 基因表达后 T24 细图 4.2.1，4.2.2 所示：TET2-519 抑制组、TET组 3 组 T24 细胞中的 TET2 蛋白表达与抑制对照以 TET2-519 抑制组下降为显著，（p＜0.05），制组。过表达组 T24 细胞中 TET2 的蛋白表达比较（p＜0.05）。表明上调 T24 细胞内 TET2 的表达

干预 TET2 对 T24 细胞增殖能力的影响转染 48 小时后，使用 MTT 测定法测定细胞增殖能力。记录 OD 值，并计算细胞增殖率。结果如图 4.3.1 所示。实验结果显示：TET2 过表达组出现负，，说明 TET2 过表达具有抑制增殖作用，TET2 过表达组抑制率为：16.82%。TET2-519 抑制组增殖率为：17.18%±2%。
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R737.14

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本文编号：2696555