【摘要】：目的:探讨大黄酸(RH)减缓IgA肾病肾间质纤维化的作用及与TGF-β1/Smad信号通路的关系。实验方法:将5周SPF级SD雌性大鼠随机分为四组,即正常对照组、IgA肾病模型组、RH治疗组和RH预防组(n=7)。通过BSA+LPS+CCl4方法构建IgA肾病模型,对模型鼠在不同时间灌胃给药大黄酸建立大黄酸预防组和治疗组。10周末处死动物取材,在动物处死前1天收集24小时尿液做尿沉渣红细胞计数和24小时尿蛋白量的检测;动物处死后分别取血液和肾组织,用酶联免疫吸附试验方法(Enzyme-linked immunosorbent assay,Elisa)检测血清中IgA浓度,免疫荧光法检测肾小球IgA的沉积,苏木素-伊红(HE)染色观察各组大鼠肾脏组织的病理变化,免疫组织化学二步法观察各组肾脏组织TGF-β1、Smad3、α-SMA、FN的阳性蛋白表达并采用图像分析仪进行图像分析,实时荧光定量PCR检测各组大鼠肾脏组织中TGF-β1、Smad3、α-SMA、FN mRNA的表达。结果:1.在正常对照组中,尿液检测未见镜下血尿;与正常对照组相比,IgA肾病模型组尿液检测见镜下血尿,尿沉渣红细胞数增加(P0.01);与IgA肾病模型组相比,RH治疗组和RH预防组尿沉渣红细胞数均减少,其中RH预防组与IgA肾病模型组相比,差异有显著统计学意义(P0.01)。2.与正常对照组相比,IgA肾病模型组24小时尿蛋白量显著增加(P0.01);与IgA肾病模型组相比,RH治疗组和RH预防组24小时尿蛋白量均减少(分别为P0.05,P0.01)。3.正常对照组大鼠肾小球系膜区未见IgA沉积,IgA肾病模型组大鼠肾小球系膜区可见较强绿色荧光,呈不连续颗粒状沉积(P0.01)。RH治疗组和RH预防组大鼠肾小球系膜区绿色荧光均有不同程度减弱(P0.01),且RH预防组大鼠肾小球系膜区绿色荧光减弱更显著。4.与正常对照组相比,IgA肾病模型组血清IgA浓度明显增加(P0.01)。与IgA肾病模型组相比,RH治疗组和RH预防组血清IgA浓度降低,RH预防组与IgA肾病模型组相比,差异有显著统计学意义(P0.01)。5.正常对照组肾皮质组织结构清晰,肾小囊腔无扩张,系膜细胞及基质无增生,肾间质、肾小管无明显变化。IgAN模型组可见肾小囊腔扩张,肾小球变小,肾小球系膜细胞及基质中至重度增生,纤维化明显,肾小管肿胀,管腔狭窄。与IgA肾病模型组相比,RH治疗组RH预防组和均有不同程度的改善,肾小囊扩张减小,肾小球系膜细胞及基质轻度增生,肾小管肿胀减轻。6.免疫组化结果显示,与正常对照组相比,IgA肾病模型组肾脏TGF-β1、Smad3、FN和α-SMA的阳性蛋白表达均显著增加(P0.01);与IgA肾病模型组相比,RH治疗组和RH预防组肾脏TGF-β1、Smad3、FN和α-SMA的阳性蛋白表达均减少(P0.01)。7.实时荧光定量PCR结果显示,与正常对照组相比,IgA肾病模型组肾脏TGF-β1、Smad3、FN、α-SMA的mRNA表达均显著增加(P0.01);与IgA肾病模型组相比,RH治疗组肾脏TGF-β1、Smad3、FN、α-SMA的mRNA表达均减少(P0.05),RH预防组肾脏TGF-β1、Smad3、FN、α-SMA的mRNA表达均减少(分别为P0.01,P0.01,P0.05,P0.05)。结论:RH能减轻IgA肾病大鼠肾间质纤维化,可能是通过调控TGF-β1/Smad信号通路,发挥其抗纤维化的作用。
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R692
【图文】：
同程度减弱（P<0.01），且 RH 预防组减弱的更明显（见表表 6 肾小球 IgA 沉积的分级情况± + ++ +++ 7型组 5 2 4 3 3 4gA 浓度检测对照组相比，IgA 肾病模型组血清 IgA 浓度明显增加（P<型组相比，RH 治疗组和 RH 预防组血清 IgA 浓度降低，R模型组相比，有显著统计学差异（P<0.01）（见图 1）。
质中至重度增生，纤维化明显，肾小管肿胀，管腔狭窄组均有不同程度的改善，肾小囊扩张、肾小管肿胀及肾小情况均减轻（照片 2）。 TGF-β1、Smad3、α-SMA、FN 免疫阳性蛋白织 TGF-β1 免疫阳性蛋白的检测对照组中，TGF-β1 在肾小管中少量表达，肾小球中未见模型组中，其在肾小管中大量表达，肾小球中未见明显 处理组中，其在肾小管的表达减少，肾小球未见明显表达仪分析 TGF-β1 阳性蛋白的 IOD 值，与正常组比较，IgA蛋白的 IOD 显著增加（P<0.01）；与 IgA 肾病模型组比 预防组 TGF-β1 阳性蛋白的 IOD 均显著减少（P<0.01）（
【参考文献】
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