低雄激素状态对大鼠阴茎海绵体组织中P2Y受体表达的影响

发布时间：2020-06-25 00:51

【摘要】：目的:阴茎勃起功能障碍是指成年男性在与性伴侣进行性交时,阴茎反复或持续无法勃起或勃起硬度不够等以至于无法完成令男女双方都满意的性行为的勃起,尽管ED是一种温和的慢性的良性疾病,但是仍然可能会损害患者与其性伴侣的情感交流,从而影响患者的夫妻情感生活、患者个人的自信心和幸福感,对个人的整体生活质量有比较大的负面影响。通过手术和雄激素替代治疗建立动物模型来了解低睾酮水平是否通过P2Y受体亚型调控阴茎海绵体组织中的e NOS表达和活化并影响阴茎勃起,为中老年男性、前列腺癌患者等低睾酮水平所致ED临床治疗提供新的理论基础。方法:36只8周龄健康雄性大鼠,简单随机化分为6个组,具体分为去势+睾酮替代治疗4周组(A组:cast+T 4-week)、去势4周组(B组:cast 4-week)、假手术4周组(C组:sham 4-week)、去势+睾酮替代治疗8周组(D组:cast+T 8-week)、去势8周组(E组:cast 8-week)、假手术8周组(F组:sham8-week)。cast 4-week、cast 8-week组大鼠通过手术阉割去势,cast+T 4-week、cast+T8-week组大鼠手术去势后1天开始睾酮3 mg/kg/2d皮下注射,cast 4-week、sham 4-week、cast 8-week、sham 8-week组皮下注射同等剂量植物油。分别于4周和8周测定各组大鼠电刺激下的勃起功能,通过RT-PCR法检测各组大鼠阴茎海绵体中P2Y1、P2Y2、P2Y4、P2Y6的m RNA表达及Western blot检测阴茎海绵体中的e NOS、P-e NOS、P2Y1、P2Y2、P2Y4、P2Y6的蛋白表达。结果:各实验组大鼠体重(A组cast+T 4-week:295.33±1.79g、B组cast 4-week:296.35±2.69g、C组sham 4-week:296.65±1.51g、D组cast+T 8-week:295.22±2.84g、E组cast 8-week:297.57±1.53g、F组sham 8-week:295.37±3.28g)、平均颈动脉压(A组cast+T 4-week:119.19±5.31mm Hg、B组cast 4-week:119.15±5.31 mm Hg、C组sham 4-week:119.21±5.14 mm Hg、D组cast+T 8-week:119.20±5.24 mm Hg、E组cast 8-week:119.29±5.10mm Hg、F组sham 8-week:119.37±5.01mm Hg)无显著差异。血清T值:cast+T 4-week(20.46±3.43nmol/L)、sham 4-week(20.63±3.30nmol/L)、cast+T 8-week(17.78±2.67nmol/L)、sham8-week(18.57±2.84nmol/L)大鼠睾酮值无显著差异,cast 4-week(1.35±0.41nmol/L)较cast+T 4-week(20.46±3.43nmol/L)和sham 4-week(20.63±3.30nmol/L)极显著降低(P0.01),cast 8-week(0.30±0.17nmol/L)较cast+T 8-week(17.78±2.67nmol/L)和sham 8-week(18.57±2.84nmol/L)极显著降低(P0.01),且cast 8-week(0.30±0.17nmol/L)较cast 4-week(1.35±0.41nmol/L)显著降低(P0.05)。在3V、5V电压刺激下各组大鼠ICPmax/MAP比值:cast 4-week组(0.39±0.03,0.54±0.04)较cast+T 4-week组(0.70±0.04,0.83±0.01)和sham 4-week组(0.69±0.01,0.82±0.01)极显著降低(P0.01),cast 8-week组(0.26±0.03,0.36±0.01)较cast+T 8-week组(0.70±0.04,0.82±0.02)和sham 8-week组(0.70±0.02,0.80±0.02)极显著降低(P0.01),且cast 8-week组(0.26±0.03,0.36±0.01)较cast 4-week组(0.39±0.03,0.54±0.04)显著降低(P0.05)。cast+T 4-week、sham 4-week、cast+T 8-week、sham 8-week组大鼠ICPmax/MAP值无显著差异。RT-PCR结果显示:P2Y1、P2Y2、P2Y4、P2Y6:cast 4-week组(0.75±0.08、0.86±0.02、0.73±0.09、0.86±0.03)较cast+T 4-week组(1.17±0.04、1.18±0.06、1.23±0.12、1.16±0.03)和sham 4-week组(1.12±0.09、1.19±0.03、1.18±0.10、1.16±0.02)极显著降低(P0.01),cast 8-week组(0.51±0.07、0.50±0.03、0.42±0.16、0.59±0.02)较cast+T 8-week组(1.18±0.04、1.17±0.01、1.20±0.07、1.15±0.03)和sham 8-week组(1.17±0.02、1.16±0.04、1.24±0.02、1.15±0.04)极显著降低(P0.01),且cast 8-week组较cast 4-week组著降低(P0.05),cast+T 4-week组、sham 4-week组、cast+T 8-week组、sham 8-week组无显著差异。Western blot结果显示:P2Y1、P2Y2、P2Y4、P2Y6、e NOs、P-e NOs:cast 4-week组(0.85±0.06、0.88±0.13、0.83±0.10、0.69±0.08、0.82±0.12、0.63±0.17)较cast+T 4-week组(1.16±0.05、1.23±0.10、1.19±0.14、1.14±0.03、1.18±0.03、1.23±0.02)和sham 4-week组(1.20±0.03、1.21±0.07、1.19±0.16、1.12±0.06、1.18±0.06、1.28±0.07)极显著降低(P0.01),cast 8-week组(0.55±0.04、0.48±0.09、0.56±0.23、0.32±0.05、0.55±0.04、0.33±0.21)较cast+T 8-week组(1.14±0.08、1.21±0.12、1.10±0.09、1.11±0.03、1.17±0.06、1.27±0.07)和sham 8-week组(1.13±0.09、1.14±0.04、1.18±0.18、1.11±0.03、1.18±0.05、1.28±0.10)极显著降低(P0.01),且cast 8-week组较cast 4-week组显著降低(P0.05),cast+T 4-week组、sham 4-week组、cast+T 8-week组、sham 8-week组无显著差异。大鼠血清睾酮与P2Y1、P2Y2、P2Y4、P2Y6蛋白表达相关性:各组大鼠血清睾酮值与P2Y1蛋白表达量成正相关,相关方程Y=0.705+0.023X,r=0.861,P0.01;各组大鼠血清睾酮值与P2Y2蛋白表达量成正相关,相关方程Y=0.676+0.026X,r=0.837,P0.01;各组大鼠血清睾酮值与P2Y4蛋白表达量成正相关,相关方程Y=0.702+0.023X,r=0.764,P0.01;各组大鼠血清睾酮值与P2Y6蛋白表达量成正相关,相关方程Y=0.509+0.031X,r=0.901,P0.01。结论:低睾酮水平可能在大鼠阴茎海绵体组织中起到下调P2Y1、P2Y2、P2Y4、P2Y6受体的表达的作用,抑制e NOS磷酸化,降低e NOS活性,抑制勃起功能。由于P2Y受体各亚型具有相同或相似的抗原决定簇,可能影响目前检测结果,因此还需要采用基因敲除或转染等方法进一步证实。
【学位授予单位】：西南医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R698.1
【图文】：

变化曲线,变化曲线,去势,对照组

图 1 （A） ICP、MAP 变化曲线Figure 1 （A） ICP/MAP at 3V and 5V electrical stimulation in different groups of ratsA 组：4 周对照组；B 组：4 周去势组；C 组：4 周去势+替代组；D 组：8 周对照组；E 组：8 周去势组；

电刺激,去势,大鼠,激素替代治疗

图 1（B）3V、5V 电刺激下各组大鼠 ICP/MAP 变化Figure 1（B） ICP/MAP at 3V and 5V electrical stimulation in different groups oA 为去势后雄激素替代治疗 4 周组，B 为去势 4 周组，C 为假手术 4 周组，D 为去雄激素替代治疗 8 周组，E 为去势 8 周组，F 为假手术 8 周组。去势 4 周组与去势

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