MASP2、MASP3在C3肾小球病发病中的作用

发布时间：2020-07-27 07:29

【摘要】：研究背景C3肾小球病(C3 glomerulopathy,C3G)是指免疫荧光染色以单纯补体C3沿肾小球毛细血管袢沉积为特征的一类发病率较低的原发性肾脏疾病。随着对此病的逐渐认识和了解,于2012年专家共识中对C3肾小球病进行新的定义:C3肾小球病是以C3沉积为主的肾小球肾炎,免疫荧光以补体C3沉积为主(C3免疫荧光强度较其他免疫球蛋白荧光强度≥++),且排除急性链球菌感染后肾小球肾炎,及其他肾小球病后方可诊断。据超微结构特征分为两类疾病,致密物沉积病即电镜下肾小球基膜内出现均质飘带状电子致密物沉积,而电镜下电子致密物沉积达不到致密物沉积病(Dense deposit disease,DDD)标准时归为C3肾小球肾炎(C3 glomerulonephritis,C3GN)。C3肾小球病是与补体异常调控相关的一组疾病,补体通过三大途径即经典途径、旁路途径和甘露糖凝集素途径激活。目前研究认为,C3G主要由补体旁路途径激活导致。其他的补体活化途径在C3G中的作用尚不清楚。甘露糖结合凝集素(Mannose-Binding Lectin,MBL)途径由MBL识别病原体甘露糖残基启动,通过激活甘露糖相关的丝氨酸蛋白酶2(Mannan-associated serine protease-2,MASP2),进一步裂解C4和C2,形成MBL途径C3转化酶(C4bC2a)。C3转化酶裂解C3为C3a和C3b,进一步形成C5转化酶(C4bC2aC3b),最终形成膜攻击复合物(MAC),导致细胞溶解死亡。有研究发现补体C4裂解片段C4a在C3肾小球肾炎患者血浆中显著高于健康对照组,提示C3肾小球病很可能存在甘露糖凝集素途径活化。甘露糖相关的丝氨酸蛋白酶3(Mannan-associated serineprotease-3,MASP3),是近年来最新被研究的甘露糖结合丝氨酸蛋白酶家族成员,近期有研究显示它参与D因子的活化,而D因子作为补体旁路途径过程中活化的关键酶,可以裂解B因子为片段Ba和Bb,进而裂解补体C3,进一步形成C3转化酶C3bBb,通过活化D因子,MAPS3可通过旁路途径来参与C3肾小球病的发生发展,因此MASP3是连接MBL途径和旁路途径的桥梁,但MASP3是否参与C3肾小球病发病及其具体作用机制目前尚无报道。本研究旨在通过分析血清MASP2、MASP3与C3肾小球病患者临床表现及病理改变的相关性,探讨MASP2、MASP3在C3肾小球病发病中的作用。目的探讨补体MASP2、MASP3在C3肾小球病患者血清中的表达水平及其在C3肾小球病发病中的作用。方法选取2012.01.01至2017.06.19在郑州大学第一附属医院肾脏内科行肾活检及外院会诊并经临床和病理诊断为C3肾小球病的15例患者。健康对照组为与C3肾小球病患者年龄性别相匹配的健康志愿者10例。留取肾活检当天的EDTA抗凝全血,在4℃3000R/min离心5分钟,取其上清液保存于-80℃冰箱内待测定。采用酶联免疫吸附双抗夹心法(enzyme linked immunosorbent assay-sandwich technique,ELISA)测定各组血清MASP2和MASP3水平。分析血清MASP2和MASP3水平与各临床指标、病理分级改变之间的关系。结果共纳入15例C3肾小球病患者,其中男性11例,女性4例,平均年龄(43.20±17.55)岁。1.与对照组相比,C3肾小球病患者血清MASP2、MASP3水平显著升高(分别为P=0.012和P=0.001)。2.C3肾小球病患者血清MASP2水平与血补体C3水平、24h尿蛋白定量、血肌酐无相关性(P0.05),血清MASP3水平虽与血补体C3、Scr无相关性(P0.05),但与24h尿蛋白定量呈正相关(r=0.628,P=0.016)。3.C3肾小球病患者血清MASP2水平与免疫荧光C3沉积强度之间具有统计学意义(P=0.039),与电子致密物在基底膜沉积有无之间也具有统计学意义(P=0.047)。结论1.C3肾小球病患者尿蛋白量随着血MASP3的升高而升高,提示MBL途径可能参与该病的发生与发展。2.MASP2水平的异常降低可能与C3肾小球病病理损伤程度加重有关。
【学位授予单位】：郑州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R692.6
【图文】：

患者,病理改变,沉积强度,荧光

图 3：C3G 患者血 MASP3 水平与 24hTP 关系比较患者血清 MASP2、MASP3 与其病理改变的相关夹心ELISA法比较不同病理改变的C3肾小球病患者血清平变化。结果如表 4-13，图 4、5 所示：C3 肾小球病患者荧光 C3 沉积强度及电子致密物沉积部位（基底膜）各自分别为 P=0.039，P=0.047），除此之外，其余病理改变与血清平变化之间无相关性（P＞0.05）。荧光改变表 4 C3 免疫荧光沉积强度不同情况下血 MASP2、MASP目 n MASP2 MASP3光强度11（++） 1683.54±852.66 1390.32±796.14（+++） 623.18±544.48 2100.03±1443.

沉积强度,免疫荧光,比较项目,上皮下

内皮下11（无） 1306.93±934.54 1431.31±734.534（有） 1658.84±887.10 1987.31±1608.7共计 15 P=0.526 P=0.361表 12 电子致密物上皮下沉积时血 MASP2、MASP3 比较项目 n MASP2 MASP3上皮下11（无） 1578.80±882.45 1698.46±1112.554（有） 911.19±887.53 1252.64±606.99共计 15 P=0.218 P=0.467表 13 电子致密物基底膜内沉积时血 MASP2、MASP3 比较项目 n MASP2 MASP3基底膜内9（无） 1771.74±908.10 1212.35±764.756（有） 844.32±594.01 2130.41±1127.22共计 15 P=0.047*P=0.081所有表格均以 P＜0.05 为有意义

沉积基底,免疫荧光,患者,肾小球肾炎

3G 患者血清 MASP2 水平随着电子致密物是否沉积基底膜而不同（P图 6 C3 肾小球病患者免疫荧光表现沉积病（DDD）患者免疫荧光表现 B.C3 肾小球肾炎（C3GN）患者免疫A

【参考文献】