GPC5-生长因子信号通路抑制前列腺癌进展机制的初步研究

发布时间：2017-04-03 07:13

  本文关键词：GPC5-生长因子信号通路抑制前列腺癌进展机制的初步研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:筛选出前列腺癌中与GPC5相互作用的生长因子/受体配体成员,并初步探索他们之间的相互作用对调节肿瘤进展的潜在机制。方法:1.应用CO-IP技术和质谱分析技术,在前列腺癌细胞中筛选出与GPC5相互作用的生长因子。2.应用免疫荧光共聚焦技术,检测前列腺癌细胞中GPC5和其靶蛋白在细胞亚结构内的分布。3.应用免疫共沉淀技术提取GPC5-靶蛋白免疫复合物,后行蛋白印迹,验证GPC5与靶蛋白的相互作用。4.应用脂质体辅助质粒DNA转染技术,建立GPC5异常表达的前列腺癌细胞系。5.应用western blot技术,检测前列腺癌细胞GPC5异常表达后,细胞内其靶蛋白含量的变化。结果:1.以GPC5为诱饵蛋白的免疫共沉淀复合物中共检测出三种生长因子:HDGF、IGF2BP1、GRB2,其中HDGF为三个样品中均含有的生长因子,且其蛋白分值较高。2.免疫荧光共聚焦结果显示,GPC5和HDGF在细胞浆内分布有广泛重叠区域。3.以GPC5为诱饵蛋白的免疫共沉淀复合物中检测到HDGF的蛋白印迹,同时以HDGF为诱饵蛋白的免疫共沉淀复合物中也检测到GPC5的蛋白印迹。4.建立了稳转的GPC5过表达前列腺癌PC3细胞系。5.GPC5过表达后,前列腺癌PC3细胞内HDGF含量减少而其下游蛋白PI3-K及PAI-1含量增加。结论:1.HDGF为细胞膜表面糖蛋白GPC5在前列腺癌中的作用靶点。2.在前列腺癌中,GPC5可降低细胞内HDGF的水平,对HDGF的跨膜信号传导有潜在的抑制作用。
【关键词】：GPC5 磷脂酰肌醇蛋白聚糖 前列腺癌 HDGF 信号通路
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.25
【目录】：

• 中文摘要4-5
• Abstract5-8
• 缩略语/符号说明8-10
• 前言10-17
• 研究现状、成果10-16
• 研究目的、方法16-17
• 对象和方法17-38
• 结果38-45
• 讨论45-49
• 结论49-50
• 参考文献50-54
• 发表论文和参加科研情况说明54-55
• 综述 HDGF在肿瘤中的研究现状与展望55-68
• 综述参考文献60-68
• 致谢68

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1 张晓会;GPC5-生长因子信号通路抑制前列腺癌进展机制的初步研究[D];天津医科大学;2015年

2 刘志飞;GPC5在前列腺癌中的表达及意义[D];天津医科大学;2013年

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本文编号：283918