miR-182-5p靶向SMAD4对前列腺癌PC-3细胞增殖的影响

发布时间：2021-11-19 04:46

　　目的探讨miR-182-5p对前列腺癌PC-3细胞增殖的影响及可能机制。方法将前列腺癌PC-3细胞分为四组,分为空白组（未进行转染）、miR-182-5p阴性对照组（转染无义序列）、miR-182-5p模拟物组（转染miR-182-5p模拟物）、miR-182-5p抑制物组（转染miR-182-5p抑制物）,采用实时定量PCR验证转染效率,CCK-8法检测各组PC-3细胞的增殖能力,Western blot检测各组PC-3细胞SMAD4蛋白表达,应用生物信息学网站分析SMAD4是否为miR-182-5p的靶基因,应用双荧光素酶报告基因实验验证。结果 CCK-8实验结果显示,miR-182-5p过表达后,PC-3细胞增殖能力增强,SMAD4蛋白表达下降;抑制miR-182-5p表达后,PC-3细胞增殖能力降低,SMAD4蛋白表达升高。生物信息学分析结果显示SMAD4基因3’UTR区存在miR-182-5p的结合位点,双荧光素酶实验证实了SMAD4为miR-182-5p的靶基因。结论 miR-182-5p可能通过靶向SMAD4调控前列腺癌PC-3细胞的增殖。 

【文章来源】：解剖科学进展. 2020,26(05)

【文章页数】：4 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 细胞培养
    1.3 细胞转染
    1.4 实时荧光定量PCR检测mi R-182-5p的表达
    1.5 Western blot检测SMAD4蛋白表达
    1.6 CCK-8检测细胞增殖
    1.7 mi R-182-5p的靶基因预测及双荧光素酶报告基因实验
    1.8 统计分析
2 结果
    2.1 细胞培养及mi R-182-5p表达的检测
    2.2 Western blot检测SMAD4蛋白表达
    2.3 CCK-8检测细胞增殖活性
    2.4 mi R-182-5p靶基因预测结果
3 讨论



本文编号：3504317