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尿毒症患者血清对血管平滑肌细胞钙化及Ⅰ型胶原表达的影响

发布时间:2022-01-01 08:06
  目的通过不同浓度尿毒症患者血清(以下简称尿毒症血清)刺激血管平滑肌细胞(VSMCs),评估其钙化情况及I型胶原(ColⅠ)表达,探讨尿毒症血清诱导VSMCs钙化的机制。方法原代培养VSMCs,随机分为健康血清组和尿毒症血清组,依据血清在培养基中所占比例每组各设5%、10%、15%(低、中、高)三个亚组,刺激6 d后对细胞进行钙化染色及钙含量测定,同时RT-PCR检测细胞细胞内核心结合因子(Cbfα1)及ColⅠmRNA表达,Western-Blot检测细胞及上清液ColⅠ蛋白表达,并分析相关性。结果与健康血清组比较,不同浓度尿毒症血清刺激VSMCs后钙结节增加,钙含量升高,均呈浓度依赖性(P<0.05);Cbfα1 mRNA表达、ColⅠmRNA及上清液中蛋白表达均升高,且呈浓度依赖性(P<0.05)。结论不同浓度尿毒症血清刺激可使VSMCs钙化,呈现浓度依赖性,其作用机制之一可能是其促进VSMCs表型转化,进而分泌ColⅠ蛋白增加。 

【文章来源】:山东医药. 2013,53(26)

【文章页数】:4 页

【部分图文】:

尿毒症患者血清对血管平滑肌细胞钙化及Ⅰ型胶原表达的影响


不同浓度血清刺激后对VSMCsCbfα1mRNA表达的影响

血清,血清组,尿毒症,蛋白表达


?.020﹟△▲健康血清组5%浓度0.223±0.02010%浓度0.235±0.02015%浓度0.238±0.010注:与健康血清组比较,﹟P<0.05;与同组5%浓度比较,△P<0.05;与同组10%浓度比较,▲P<0.052.3ColⅠmRNA及蛋白表达与健康血清组比较,尿毒症血清组细胞ColⅠmRNA、细胞上清液中ColⅠ蛋白表达均升高,低、中、高三个亚组间呈现浓度依赖性,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。尿毒症血清组低、中、高三个亚组间比较结果见表3。同时检测发现健康血清组及尿毒症血清组细胞中均无ColⅠ蛋白表达。见图2、3。图2不同浓度血清刺激后对VSMCsColⅠmRNA表达的影响注:N:健康血清组,U:尿毒症血清组2.4尿毒症血清组VSMCs钙化、ColⅠ表达、Cbfα1图3不同浓度血清刺激后对VSMCs上清液中ColⅠ蛋白表达的影响注:N:健康血清组,U:尿毒症血清组表3不同浓度血清刺激对VSMCsColⅠmRNA及上清液中ColⅠ蛋白表达的影响(珔x±s)组别ColⅠmRNAColⅠ蛋白尿毒症血清组5%浓度0.682±0.010﹟0.651±0.02﹟10%浓度0.719±0.030﹟△0.752±0.03﹟△15%浓度0.910±0.020﹟△▲0.843±0.03﹟△▲健康血清组5%浓度0.564±0.0200.278±0.02010%浓度0.595±0.0400.399±0.04015%浓度0.598±0.0400.509±0.080注:与健康血清组比较,﹟P<0.05;与同组5%浓度比较,△P<0.05;与同组10%浓度比较,▲P<0.05表达的相关性尿毒症血清组低、中、高三个亚组VSMCs钙含量与上清液中ColⅠ蛋白表达均呈正相关(r=0.797,P<0.01),细胞ColⅠmRNA表达与Cbfα1mRNA表达亦呈正相关(r=0.784,P<0.05)。3讨论CKD患者的血管钙化主要表现为中膜钙化,位于血管中膜的血管平滑?

蛋白表达,上清液,血清组,血清


浓度比较,△P<0.05;与同组10%浓度比较,▲P<0.052.3ColⅠmRNA及蛋白表达与健康血清组比较,尿毒症血清组细胞ColⅠmRNA、细胞上清液中ColⅠ蛋白表达均升高,低、中、高三个亚组间呈现浓度依赖性,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。尿毒症血清组低、中、高三个亚组间比较结果见表3。同时检测发现健康血清组及尿毒症血清组细胞中均无ColⅠ蛋白表达。见图2、3。图2不同浓度血清刺激后对VSMCsColⅠmRNA表达的影响注:N:健康血清组,U:尿毒症血清组2.4尿毒症血清组VSMCs钙化、ColⅠ表达、Cbfα1图3不同浓度血清刺激后对VSMCs上清液中ColⅠ蛋白表达的影响注:N:健康血清组,U:尿毒症血清组表3不同浓度血清刺激对VSMCsColⅠmRNA及上清液中ColⅠ蛋白表达的影响(珔x±s)组别ColⅠmRNAColⅠ蛋白尿毒症血清组5%浓度0.682±0.010﹟0.651±0.02﹟10%浓度0.719±0.030﹟△0.752±0.03﹟△15%浓度0.910±0.020﹟△▲0.843±0.03﹟△▲健康血清组5%浓度0.564±0.0200.278±0.02010%浓度0.595±0.0400.399±0.04015%浓度0.598±0.0400.509±0.080注:与健康血清组比较,﹟P<0.05;与同组5%浓度比较,△P<0.05;与同组10%浓度比较,▲P<0.05表达的相关性尿毒症血清组低、中、高三个亚组VSMCs钙含量与上清液中ColⅠ蛋白表达均呈正相关(r=0.797,P<0.01),细胞ColⅠmRNA表达与Cbfα1mRNA表达亦呈正相关(r=0.784,P<0.05)。3讨论CKD患者的血管钙化主要表现为中膜钙化,位于血管中膜的血管平滑肌细胞在CKD患者血管钙化中起着关键作用[6]。以前人们普遍认为CKD患者血管钙化是一种钙磷被动沉积于细胞和组织间的过程,而近年来证实,血?

【参考文献】:
期刊论文
[1]地塞米松对骨髓间充质干细胞Runx2表达的影响[J]. 林乐,李旭,杨茂伟,范广宇.  山东医药. 2009(26)



本文编号:3561963

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