高压氧对大鼠肾移植后缺血再灌注肾组织粘附分子、Th17细胞、单核巨噬细胞以及C3表达的影响
本文关键词：高压氧对大鼠肾移植后缺血再灌注肾组织粘附分子、Th17细胞、单核巨噬细胞以及C3表达的影响，由笔耕文化传播整理发布。
【摘要】：目的:通过建立同系大鼠肾移植缺血再灌注损伤(ischemia reperfusion injury,IRI)模型,观察粘附分子(ICAM-1、VCAM-1)、C3、IL-17(Th17细胞标志物)和ED1(单核巨噬细胞标志物)在移植肾组织中的表达变化以及高压氧(hyperbaric oxygenation,HBO)治疗对其表达的影响,进一步研究肾IRI发生发展的分子机制以及高压氧对肾IRI的治疗作用和机制。方法:将SD大鼠随机分为肾移植组、肾移植㧏HBO治疗组(简称HBO治疗组)及假手术组,每组又分为1h、3h和5h组(每组n=6)。肾移植组仅行肾移植手术,HBO治疗组于再灌注后0h、2h和4h分别将肾移植术后的大鼠置于动物实验氧舱内予以HBO治疗1h,假手术组仅切除右肾,不做肾移植手术。于肾移植后1h、3h和5h处死肾移植组和HBO治疗组大鼠,留取移植肾组织和血标本,假手术组也于术后相应时间点处死大鼠并留取左肾组织和血标本。采用HE染色观察肾组织的病理改变,免疫组化法检测ICAM-1、VCAM-1、C3、ED1、IL-17蛋白的表达,实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测ICAM-1和C3 m RNAs的表达以及全自动生化分析仪检测血清肌酐(SCr)。结果:1.肾功能变化:在再灌注1h、3h、5h时,与假手术组比较,肾移植组和HBO治疗组SCr值均显著增高(P0.05);与肾移植组比较,HBO治疗组在1h、3h时无明显差异,在5h时SCr值则明显降低(P0.05)。肾移植组和HBO治疗组内SCr值随时间延长逐渐升高(P0.05)。假手术组内,各时间点SCr值无统计学差异(P0.05)。2.肾组织病理变化:HE染色发现,假手术组各时间点肾组织结构正常,各时间点对比无明显变化。肾移植组随再灌注时间延长组织损伤加重,可见肾小管管腔扩张,上皮细胞肿胀,肾小球体积增大,逐渐可见蛋白样管型、红细胞管型、颗粒样变性及中性粒细胞浸润。HBO治疗组于1h和3h时,镜下观察与肾移植组无显著区别,在5h时其肾组织损伤则较肾移植组明显减轻。3.免疫组化法检测肾组织ICAM-1、VCAM-1、C3、ED1以及IL-17的表达变化:(1)ICAM-1:ICAM-1蛋白主要表达于肾小管上皮细胞胞核及间质细胞胞核。相对定量结果显示,再灌注1h、3h、5h时肾移植组的ICAM-1蛋白表达量显著高于假手术组和HBO治疗组(P0.05),而HBO治疗组与假手术组无显著差异(P0.05)。肾移植组和HBO治疗组内,随时间延长ICAM-1蛋白表达量显著升高(P0.05)。(2)VCAM-1:VCAM-1蛋白主要表达于肾小管上皮细胞胞浆,少量表达于肾小球细胞胞浆。相对定量结果显示,再灌注1h、3h、5h时,肾移植组的VCAM-1蛋白表达量显著高于假手术组(P0.05),HBO治疗后VCAM-1蛋白表达量显著降低(P0.05),但仍高于假手术组。肾移植组和HBO治疗组内,随时间延长VCAM-1蛋白表达量显著升高(P0.05)。(3)C3:C3蛋白主要表达于肾小管上皮细胞胞浆。相对定量结果显示,再灌注1h、3h、5h时,肾移植组的C3蛋白表达量显著高于假手术组(P0.05),HBO治疗后C3蛋白表达量显著降低(P0.05),但仍高于假手术组。肾移植组和HBO治疗组内,随时间延长C3蛋白表达量显著升高(P0.05)。(4)ED1(单核巨噬细胞表面标志物):ED1蛋白主要表达于肾小管上皮细胞胞浆。相对定量结果显示,再灌注1h时,肾移植组的ED1蛋白表达量显著高于假手术组和HBO治疗组(P0.05),HBO治疗组与假手术组无显著差异;再灌注3h和5h时,肾移植组的ED1蛋白表达量显著高于假手术组(P0.05),HBO治疗后ED1蛋白表达量显著降低(P0.05),但仍高于假手术组。肾移植组和HBO治疗组内,随时间延长ED1蛋白表达量显著升高(P0.05)。(5)IL-17(Th17细胞标志物):在肾移植组和HBO治疗组,IL-17蛋白主要表达于肾小管上皮细胞胞浆,肾小球细胞胞浆可见极少量表达,在假手术组,IL-17蛋白仅表达于肾小管上皮细胞胞浆,肾小球则无表达。相对定量结果显示,再灌注1h、3h、5h时,肾移植组的IL-17蛋白表达量显著高于假手术组(P0.05),HBO治疗后IL-17蛋白表达量显著降低(P0.05),但仍高于假手术组。肾移植组和HBO治疗组内,随时间延长IL-17蛋白表达量显著升高(P0.05)。4.real-time PCR检测肾组织ICAM-1和C3 m RNAs的表达变化:(1)ICAM-1 m RNA:相对表达量结果显示,再灌注1h时,三组间ICAM-1 m RNA的表达量无统计学差异;再灌注3h时,肾移植组ICAM-1 m RNA的表达量显著高于假手术组和HBO治疗组(P0.05),HBO治疗组与假手术组无统计学差异;再灌注5h时,肾移植组ICAM-1 m RNA的表达量显著高于假手术组(P0.05),HBO治疗后ICAM-1 m RNA的表达量显著降低(P0.05),但仍高于假手术组。肾移植组和HBO治疗组内,再灌注1h和3h ICAM-1 m RNA的表达量无统计学差异(P0.05),再灌注5h ICAM-1 m RNA的表达量显著高于1h和3h(P0.05)。(2)C3 m RNA:相对表达量结果显示,再灌注1h、3h、5h时,肾移植组C3 m RNA的表达量显著高于假手术组(P0.05),HBO治疗后C3 m RNA的表达量显著降低(P0.05),但仍高于假手术组。肾移植组和HBO治疗组内,随时间延长C3 m RNA的表达量显著升高(P0.05)。5.相关分析显示,大鼠SCr值与肾组织ICAM-1、VCAM-1、C3、ED1、IL-17蛋白表达量的P值均小于0.05,均存在正相关关系。结论:(1)肾移植再灌注后早期即出现了肾功能的损害和肾组织破坏,粘附分子、C3、Th17细胞和单核巨噬细胞参与并促进了肾缺血再灌注损伤,且随着再灌注时间延长组织损伤逐渐加重。(2)高压氧治疗于肾缺血再灌注损伤早期即可通过抑制肾组织中粘附分子的过表达、补体系统的活化、Th17细胞的聚集和单核巨噬细胞的浸润发挥肾保护作用,且随着再灌注时间延长,其保护作用越明显。
【关键词】：高压氧 大鼠 肾移植 缺血再灌注损伤 粘附分子 补体 单核巨噬细胞 Th17细胞
【学位授予单位】：遵义医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R699.2
【目录】：
- 中英缩略词对照表4-5
- 中文摘要5-8
- 英文摘要8-12
- 前言12-15
- 材料与方法15-24
- 结果24-41
- 讨论41-44
- 结论44-45
- 参考文献45-50
- 综述50-66
- 参考文献56-66
- 致谢66-67
- 作者简介67-68
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 奚永志;叶根耀;蒋本荣;;单核巨噬细胞对红系造血的调控[J];国外医学.输血及血液学分册;1987年03期
2 姚小剑;单核巨噬细胞在病毒感染中的作用及抗体介导的感染增强[J];微生物学免疫学进展;1989年04期
3 郭忠民,沈淑静,唐慰萍;单核巨噬细胞与肿瘤转移的关系[J];湛江医学院学报;1990年Z1期
4 奚永志;叶根耀;蒋本荣;;单核巨噬细胞及前列腺素E_2在正常人粒系造血调控中的作用[J];临床血液学杂志;1991年03期
5 肖鹏,蒋定国,侯熙德;单核巨噬细胞在神经系统疾病中的作用[J];中国神经精神疾病杂志;1992年03期
6 包兴才,李同义;再障病人外周单核巨噬细胞某些造血调控功能异常[J];国外医学.输血及血液学分册;1992年06期
7 江圣勇,汪由坤,宋佩辉,郝连杰,唐生杰,姚光弼;急、慢性乙肝患者肝内单核巨噬细胞的原位研究[J];同济医科大学学报;1992年01期
8 汪维伟,赵玲,陆明;粘附培养的人单核巨噬细胞之酶活性及吞噬功能的观察[J];重庆医科大学学报;1993年02期
9 王晓莲,周苏明,程蕴琳;衰老时单核巨噬细胞功能变化的研究进展[J];中华老年医学杂志;2005年11期
10 俞晓峰;黄策;汪美先;;细菌内毒素作用机理的研究进展[J];国外医学(微生物学分册);1993年05期
中国重要会议论文全文数据库 前9条
1 王纯洁;斯日古楞;幺宏强;贾德刚;敖日格乐;云彦军;李表表;;鸡包涵体肝炎过程中单核巨噬细胞消长规律的研究[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会论文集[C];2005年
2 毛予龙;徐歆;胡胜兰;郑建林;李雅丽;李卫芬;;甘草酸苷对体外小鼠单核巨噬细胞细胞因子分泌的影响[A];中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十一次全国动物营养学术研讨会论文集[C];2012年
3 麻慧;韩红兵;王淑辉;牟进菲;李俊英;宁中华;连正兴;李宁;;单核巨噬细胞吞噬性能的选择对矮小鸡G1代抗病性能的影响[A];中国动物遗传育种研究进展——第十五次全国动物遗传育种学术讨论会论文集[C];2009年
4 张思明;徐镔蕊;杨利峰;;单核巨噬细胞(MNPs)在朊病发病机制中的作用多样性[A];2012年中国畜牧兽医学会兽医病理学分会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会学术研讨会论文集[C];2012年
5 尚云连;佘锐萍;;鸡感染新城后P物质的分布与变化[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十三次学术讨论会和中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十二次学术讨论会论文集[C];2005年
6 曲芸芸;马春燕;朱敏;刘晓雯;孙新平;徐洁;赵跃然;;免疫复合物对单核巨噬细胞调节及其机制[A];山东生物化学与分子生物学会2009年学术会议论文汇编[C];2009年
7 舒旷怡;李向阳;;LBP对LPS刺激单核巨噬细胞分泌细胞因子的调节作用[A];2009年浙江省检验医学学术年会论文汇编[C];2009年
8 李雅丽;文静;余东游;李卫芬;;芽孢杆菌B10对H_2O_2致小鼠单核巨噬细胞氧化应激损伤的保护作用[A];中国畜牧兽医学会动物营养学分会第十一次全国动物营养学术研讨会论文集[C];2012年
9 斯日古楞;王纯洁;幺宏强;贾德刚;;雏鸡单核巨噬细胞消长规律的研究[A];动物生理生化学分会第八次学术会议暨全国反刍动物营养生理生化第三次学术研讨会论文摘要汇编[C];2004年
中国博士学位论文全文数据库 前5条
1 王燕;甘露聚糖结合凝集素对单核巨噬细胞分化发育调节作用的研究[D];南方医科大学;2012年
2 张伟伟;miR-145通过调节单核巨噬细胞增殖/凋亡平衡参与调控慢性炎症过程[D];复旦大学;2010年
3 王晓秋;透明质酸通过诱导单核巨噬细胞耐受导致子宫内膜异位症[D];复旦大学;2010年
4 何龙;LPS和CpG寡聚DNA对单核巨噬细胞的效应和作用机制的研究[D];第二军医大学;2001年
5 罗蔓;多壁碳纳米管对单核巨噬细胞的作用及基因组学的研究[D];复旦大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 鲁凡;超高分子聚乙烯微粒对小鼠单核巨噬细胞HMGB1蛋白表达的影响[D];暨南大学;2015年
2 廖武琼;系膜细胞活化模型的建立及其对单核巨噬细胞的生物学效应[D];中国人民解放军医学院;2015年
3 王欣;高压氧对大鼠肾移植后缺血再灌注肾组织粘附分子、Th17细胞、单核巨噬细胞以及C3表达的影响[D];遵义医学院;2016年
4 傅春燕;HIV-1感染单核巨噬细胞的凋亡机制研究[D];北京协和医学院;2014年
5 陈玉惠;IBRV对牛单核巨噬细胞表达细胞因子的影响[D];内蒙古农业大学;2013年
6 高晶;IBRV对牛单核巨噬细胞生物学特性及主要细胞表面分子表达的影响[D];内蒙古农业大学;2013年
7 斯日古楞;鸡包涵体肝炎过程中免疫细胞变化规律的研究[D];内蒙古农业大学;2004年
8 张玉红;盐酸右美托咪定对LPS诱导单核巨噬细胞的炎症反应的影响[D];福建农林大学;2013年
9 马永强;基于盐皮质激素受体中介的单核巨噬细胞表型调控对实验性肺纤维化的干预研究[D];河北医科大学;2014年
10 孙志明;IBRV荧光定量PCR检测方法的建立及其对单核巨噬细胞表达IL-2和IFN-γ的影响[D];内蒙古农业大学;2012年
本文关键词：高压氧对大鼠肾移植后缺血再灌注肾组织粘附分子、Th17细胞、单核巨噬细胞以及C3表达的影响，，由笔耕文化传播整理发布。
本文编号：374504
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/mjlw/374504.html
