男性不育患者减数分裂遗传重组与染色体行为的研究

发布时间：2017-05-20 10:11

  本文关键词：男性不育患者减数分裂遗传重组与染色体行为的研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：探讨XYY综合征患者两条Y染色体对精子发生过程的影响及XYY综合征患者精母细胞减数分裂染色体配对、联会及重组的异常,发现XYY综合征患者不育的遗传学因素。方法：1、应用免疫荧光染色技术联合细胞铺展法,用SCP3抗体标记联会复合体侧轴,MLHl抗体标记减数分裂重组位点,CREST抗体标记染色体着丝点。2、γ-H2AX抗体染色标记未联会的染色体区域3、FISH技术鉴定Y染色体。4、SYCPl抗体标记染色体联会。5、石蜡包埋和HE染色观察睾丸组织曲细精管精子发生。结果：石蜡包埋和HE染色显示47,XYY核型患者睾丸组织曲细精管精母细胞明显减少,未见成熟精子,被分析患者71个粗线期精母细胞中常染色体配对未见异常,而在被分析的71个粗线期精母细胞均出现两条Y染色体之间的相互配对,其中有42(59.2%)个细胞中出现Y染色体短臂完全配对和Y染色体长臂部分配对,其余的29(40.8%)个精母细胞中整条Y染色体配对。患者两条Y染色体完全联会和部分联会的细胞数分别为19和52。在65个Y染色体完全或部分联会的粗线期精母细胞中两条Y染色体间有重组的细胞数为27(41.5%)。与5个健康对照共437个精母细胞平均重组频率进行比较,患者常染色体重组频率明显低于健康对照组(44.9±4.6,vs.48.1±5.8;P0.001,秩和检验)；与健康对照组相比,患者细线期、偶线期细胞数均明显增加,而粗线期细胞数目明显减少(P0.001,卡方检验)。结论：一条多余的Y染色体使患者精母细胞减数分裂性染色体配对、联会及重组发生异常,性染色体MSCI无法形成,精子发生过程异常,最终导致患者睾丸组织生精细胞减少,精液中无精子。
【关键词】：性染色体 减数分裂 减数分裂性染色体沉默(MSCI) XYY综合征
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R698.2
【目录】：

• 英文缩略词表6-7
• 中文摘要7-8
• 英文摘要8-10
• 1 引言10-15
• 1.1 研究背景10-11
• 1.2 减数分裂概述11-12
• 1.3 减数分裂联会复合12-13
• 1.4 减数分裂DNA断裂、修复与重组13-14
• 1.5 减数分裂染色体沉默14-15
• 2 材料及方法15-25
• 2.1 所需材料15-16
• 2.1.1 标本收集15-16
• 2.2 仪器与试剂16-21
• 2.2.1 相关试剂16-17
• 2.2.2 抗体17
• 2.2.3 仪器和工具17-19
• 2.2.4 试剂配制19-21
• 2.3 实验方法21-25
• 2.3.0 睾丸组织精母细胞免疫荧光色21-22
• 2.3.1 精母细胞拍照及分析标准22-23
• 2.3.2 睾丸组织生精功能观察(石蜡包埋切片、H&E染色)石蜡包埋切片、H&E染色23-24
• 2.3.3 FISH技术鉴定Y染色体24
• 2.3.4 γ H2AX染色24-25
• 2.3.5 SYCP1染色25
• 3 统计方法25-26
• 4 实验结果26-35
• 5 实验结果分析35-36
• 6 讨论36-38
• 7 结论38
• 参考文献38-43
• 附录43-44
• 致谢44-45
• 综述45-53
• 参考文献50-53

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