miR-302a与顺铂协同诱导睾丸癌细胞凋亡分子机制的研究
发布时间：2024-02-02 13:10
研究背景 顺铂是一种常见的用于治疗癌症的化疗药物,尤其是对睾丸癌患者的治愈率非常高。目前睾丸癌治疗中面临的最大的问题是患者经过药物顺铂化疗之后,出现的毒副作用严重影响了病人的生活质量。所以开发新的顺铂增敏剂,提高顺铂的治疗效率,减少顺铂治疗带来的副作用是解决这一问题的关键点。 microRNA (miRNA,即微小RNA)是一类长约21～25个核苷酸的非编码小分子RNA。一般情况下,成熟的miRNA可以通过与其靶基因的特定mRNA完全或不完全配对,降解其mRNA或抑制其转录后翻译来调控基因的表达。近年来,许多文献报道miRNA在化疗药物治疗癌症的过程中起到非常重要的作用,甚至调节癌症细胞对化疗药物的敏感性。这对研究肿瘤的发生、发展以及诊断、治疗和预后都有非常重要的作用。目前的研究发现,在恶性生殖细胞瘤中miR-302a过表达,而在良性生殖细胞瘤中却未发现,说明miR-302a可以成为一种恶性生殖细胞瘤的血清学分子标志物。但是,miR-302a是否参与到顺铂治疗睾丸癌的过程中及miR-302a是否与顺铂诱导的睾丸癌细胞凋亡敏感性有关却未见报道。 研究目的 研究miR-302a对人睾丸癌细...
【文章页数】：97 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第1章 绪论
1.1 引言
1.2 睾丸癌的发生和治疗
1.2.1 睾丸癌的发生
1.2.2 睾丸癌的组织学分类
1.2.3 睾丸癌的治疗方法
1.2.4 化疗药物顺铂的作用机制
1.2.5 顺铂诱导的睾丸癌细胞的凋亡
1.2.6 小结
1.3 miRNA参与化疗过程
1.3.1 miRNA的生成及其作用机制
1.3.2 miRNA与疾病的关系
1.3.4 miRNA与化疗
1.3.5 miR-302简介
1.3.6 miR-302与睾丸癌
1.3.7 小结
第二章 miR-302a提高顺铂敏感性并促进顺铂诱导的凋亡
2.1 前言
2.2 实验结果
2.2.1 顺铂诱导miR-302a产生
2.2.2 miR-302a抑制细胞增殖并提高顺铂敏感性
2.2.3 miR-302a促进顺铂诱导的凋亡
2.2.4 pFUM3GW促进顺铂诱导的凋亡
2.3 结果分析与讨论
第三章 miR-302a促进顺铂诱导的G2/M期的停滞
3.1 前言
3.2 实验结果
3.2.1 miR-302a对细胞周期的影响
3.2.2 miR-302a联合顺铂对细胞周期的影响
3.2.3 miR-302a抑制剂对细胞周期的影响
3.3 结果分析与讨论
第四章 miR-302a协同顺铂易于临床应用
4.1 前言
4.2 实验结果
4.2.1 miR-302a提高顺铂对NT2细胞的杀伤效应
4.2.2 miR-302a对其他细胞系的影响
4.2.3 miR-302a提高顺铂对NCCIT2细胞的杀伤效应
4.3 结果分析与讨论
第五章 miR-302a促进顺铂凋亡效应的分子机制
5.1 前言
5.2 实验结果
5.2.1 miR-302a通过靶基因p21调控顺铂效应
5.2.1.1 沉默p21对细胞周期的影响
5.2.1.2 miR-302a通过p21促进顺铂效应
5.2.2 沉默p53可以提高顺铂诱导的凋亡效应
5.2.2.1 沉默p53提高miR-302a表达
5.2.2.2 沉默p53和miR-302a转录因子之间的关系
5.3 结果分析与讨论
第六章 实验总结和讨论
第七章 实验材料仪器与方法
7.1 实验材料及方法
7.1.1 实验试剂
7.1.2 细胞系、细胞培养、复苏及冻存
7.1.2.1 细胞系
7.1.2.2 细胞培养
7.1.2.3 细胞复苏
7.1.2.4 细胞冻存
7.1.3 质粒及寡聚核苷酸的转染
7.1.4 RNA提取以及实时定量荧光PCR分析(real-time PCR)
7.1.5 免疫印迹分析(Western blotting)
7.1.6 细胞增殖和药物敏感性试验
7.1.6.1 细胞活力实验
7.1.6.2 药物敏感性试验
7.1.7 流式细胞术分析
7.1.7.1 细胞周期检测
7.1.7.2 细胞凋亡检测
7.1.8 统计分析
7.2 主要仪器设备
参考文献
致谢
在读期间发表的学术论文与取得的研究成果
本文编号：3892711
【文章页数】：97 页
【学位级别】：博士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第1章 绪论
1.1 引言
1.2 睾丸癌的发生和治疗
1.2.1 睾丸癌的发生
1.2.2 睾丸癌的组织学分类
1.2.3 睾丸癌的治疗方法
1.2.4 化疗药物顺铂的作用机制
1.2.5 顺铂诱导的睾丸癌细胞的凋亡
1.2.6 小结
1.3 miRNA参与化疗过程
1.3.1 miRNA的生成及其作用机制
1.3.2 miRNA与疾病的关系
1.3.4 miRNA与化疗
1.3.5 miR-302简介
1.3.6 miR-302与睾丸癌
1.3.7 小结
第二章 miR-302a提高顺铂敏感性并促进顺铂诱导的凋亡
2.1 前言
2.2 实验结果
2.2.1 顺铂诱导miR-302a产生
2.2.2 miR-302a抑制细胞增殖并提高顺铂敏感性
2.2.3 miR-302a促进顺铂诱导的凋亡
2.2.4 pFUM3GW促进顺铂诱导的凋亡
2.3 结果分析与讨论
第三章 miR-302a促进顺铂诱导的G2/M期的停滞
3.1 前言
3.2 实验结果
3.2.1 miR-302a对细胞周期的影响
3.2.2 miR-302a联合顺铂对细胞周期的影响
3.2.3 miR-302a抑制剂对细胞周期的影响
3.3 结果分析与讨论
第四章 miR-302a协同顺铂易于临床应用
4.1 前言
4.2 实验结果
4.2.1 miR-302a提高顺铂对NT2细胞的杀伤效应
4.2.2 miR-302a对其他细胞系的影响
4.2.3 miR-302a提高顺铂对NCCIT2细胞的杀伤效应
4.3 结果分析与讨论
第五章 miR-302a促进顺铂凋亡效应的分子机制
5.1 前言
5.2 实验结果
5.2.1 miR-302a通过靶基因p21调控顺铂效应
5.2.1.1 沉默p21对细胞周期的影响
5.2.1.2 miR-302a通过p21促进顺铂效应
5.2.2 沉默p53可以提高顺铂诱导的凋亡效应
5.2.2.1 沉默p53提高miR-302a表达
5.2.2.2 沉默p53和miR-302a转录因子之间的关系
5.3 结果分析与讨论
第六章 实验总结和讨论
第七章 实验材料仪器与方法
7.1 实验材料及方法
7.1.1 实验试剂
7.1.2 细胞系、细胞培养、复苏及冻存
7.1.2.1 细胞系
7.1.2.2 细胞培养
7.1.2.3 细胞复苏
7.1.2.4 细胞冻存
7.1.3 质粒及寡聚核苷酸的转染
7.1.4 RNA提取以及实时定量荧光PCR分析(real-time PCR)
7.1.5 免疫印迹分析(Western blotting)
7.1.6 细胞增殖和药物敏感性试验
7.1.6.1 细胞活力实验
7.1.6.2 药物敏感性试验
7.1.7 流式细胞术分析
7.1.7.1 细胞周期检测
7.1.7.2 细胞凋亡检测
7.1.8 统计分析
7.2 主要仪器设备
参考文献
致谢
在读期间发表的学术论文与取得的研究成果
本文编号：3892711
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/mjlw/3892711.html
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