LSD1与肾透明细胞癌相关性的初步研究

发布时间：2024-03-09 21:36

　　目的： 通过反转录PCR及免疫组织化学方法，初步评估和探讨赖氨酸特异性组蛋白去甲基化酶(LSD1)与肾透明细胞癌发病之间的相关性。 方法 1、收集2012年7月²012年12月南昌大学第一附属医院泌尿外科肾癌患者腹腔镜肾癌根治手术切除的新鲜肾癌组织标本30例，术后病理诊断均为肾透明细胞癌，同肾癌旁2cm处肾组织为癌旁组标本30例、同肾距离肿瘤5cm以上处肾组织为正常组织标本各30例；30例肾癌患者中男性18例，女性12例，患者均有完整的临床资料，术后经病理检查均为肾透明细胞癌，术前均未行放疗、化疗、药物靶向治疗及免疫治疗等。根据1997年WHO推荐的Fuhrman分级方法分组：高分化组6例，中分化组19例，低分化组5例； 2、运用反转录PCR方法检测LSD1基因在肾透明细胞癌、癌旁组织及正常肾组织中的表达情况，并分析其意义； 3、运用免疫组织化学方法检测LSD1蛋白在肾透明细胞癌，癌旁组织及正常肾组织的表达情况，并分析其意义； 4、用直接计数法计算各组频率分布，数据均用SPSS13.0进行统计分析。各组例数比较用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。用比...

【文章页数】：42 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
目录
第1章 前言
    1.1 肾癌简介
    1.2 表观遗传学
    1.3 LSD1 简介
    1.4 LSD1 对肿瘤发生的调节作用
    1.5 LSD1 与泌尿系肿瘤的关联研究
第2章 材料与方法
    2.1 主要试剂及仪器
        2.1.1 主要试剂
        2.1.2 主要仪器和设备
        2.1.3 主要溶液成分及试剂配制
    2.2 实验方法与步骤
        2.2.1 材料的收集
        2.2.2 材料的保存
        2.2.3 Trizol 法行组织标本的 RNA 抽提及检测
        2.2.4 逆转录 cDNA（AMV First Strand cDNA Synthesis Kit，具体见 Kit说明书）
        2.2.5 PCR（Polymerase Chain Reaction，聚合酶链反应）
        2.2.6 标本的病理制片
        2.2.7 标本组织 HE 染色
        2.2.8 标本组织免疫组化（二步法）
    2.3 统计及方法
第3章 结果
    3.1 反转录 PCR 法检测 LSD1 基因在肾透明细胞癌组织中的表达
        3.1.1 RNA 的纯度与浓度检测
        3.1.2 内参基因 control 反转录 PCR 电泳图
        3.1.3 LSD1 基因反转录 PCR 电泳图
        3.1.4 反转录 PCR 法检测 LSD1 基因在肾透明细胞癌组织和癌旁组织中的表达
        3.1.5 反转录 PCR 法检测 LSD1 基因在肾透明细胞癌组织和正常肾组织中的表达
        3.1.6 反转录 PCR 法检测 LSD1 基因在癌旁组织和正常肾组织中的表达
    3.2 免疫组化法检测 LSD1 蛋白在肾透明细胞癌组织中的表达
        3.2.1 免疫组化法检测 LSD1 蛋白在肾透明细胞癌组织和癌旁组织中的表达
        3.2.2 免疫组化法检测 LSD1 蛋白在肾透明细胞癌组织和正常肾组织中的表达
        3.2.3 免疫组化法检测 LSD1 蛋白在癌旁组织和正常肾组织中的表达
第4章 讨论
第5章 结论
致谢
参考文献
综述
    参考文献



本文编号：3923948