膀胱粘膜TRP通道的表达及尿液ATP在诊断BPH患者膀胱出口梗阻程度中的作用

发布时间：2024-03-22 05:14

　　背景:膀胱粘膜上皮除了发挥传统的屏障功能外,近年来研究发现还表达多种感受性离子通道和受体,例如TRP通道、Pannexin 1通道、Piezo 1通道、及胆碱能受体、嘌呤能受体等,能够感受机械、化学、温度刺激,并释放ATP、乙酰胆碱(Ach)、NO等介质及多种神经生长因子和细胞因子。因而,膀胱粘膜被认为是一个感觉器官。生理情况下,膀胱粘膜上皮能够感受膀胱充盈的机械刺激,上皮感受机械刺激的机制近年来受到很大的关注。有研究表明,膀胱充盈过程中粘膜上皮受到机械牵张刺激,导致胞内Ca2+的升高及ATP的释放,进而激活感觉末梢上的P2X3受体,导致感觉神经的兴奋是膀胱感觉产生的重要机制。但目前膀胱粘膜上皮感受机械刺激诱发胞内Ca2+升高的细胞及分子机制尚不清楚。在粘膜上皮表达的机械感受TRP通道中,以TRPV4表达最丰富。有研究认为TRPV4在牵张刺激激活后,可引发一系列生理反应,在膀胱充盈感的产生及排尿反射的启动中起重要作用。近年来随着相关研究的进展,TRPV4在膀胱感觉功能中的作用被日益揭示,但TRPV4感受膀胱充盈刺激后,细胞内Ca2+升高及是否存在其他因子如ATP的释放的具体细胞机制,还...

【文章页数】：76 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１．１?Ａ．显示细胞灌流从Ｉｎｌｅｔ流入细胞槽，从Ｏｕｔｌｅｔ流出，玻片上的细胞浸??

ＭＥＭ培养基，重复上述操作，吹打离心去上清。??（５）滴入适量膀胱尿路上皮细胞专用培养基（ＵＣＭ），将细胞吹打成悬液。??（６）将细胞悬液滴至多聚赖氨酸包埋好的玻片上，放置孵箱培养２４－４８小??时。??２．?２制造液气界面方法??Ａ?Ｏｕｔｌｅｔ?ａ?／?Ｉｎｌｅｔ??———?....

图１．２尿路上皮细胞受机械刺激后出现快速的胞内Ｃａ２＋升高，且可重复??

?山东大学硕士学位论文???大鼠的尿路上皮在给予液气界面的机械刺激后，尿路上皮细胞出现快速的胞??内钙离子升高（图１．２）。在１０张大鼠尿路上皮细胞爬片，共３７０个尿路上皮细??胞，给予第一次机械刺激诱发９３．?６％的细胞胞内Ｃａ２＋升高，其幅度为０．?７９±０．?０６，??重新....

图１．４大鼠膀胱ＴＲＰＶ４免疫组化?（Ａ）低倍镜下可见ＴＲＰＶ４通道在尿路上皮??

?山东大学硕士学位论文??图１．３机械刺激可引起尿路上皮释放ＡＴＰ??Ｂａｓｅ：刺激前基础值，Ｍ：刺激后测得值；??３．?３?ＴＲＰＶ４在膀胱尿路上皮的表达??我们对所获得的大鼠膀胱进行了免疫组化染色，以鉴定ＴＲＰＶ４是否确实表达??于尿路上皮（图１．４）。图中，箭头所指棕色颗粒....

图１．５机械刺激引起的胞内Ｃａ２＋升髙可被ＧｄＣ１３阻断??

学硕士学位论文???仍可诱发大幅度的胞内钙升高（０．?５９±０．?０８），说明ＧｄＣ１３只阻断机械通道，不??阻断ＡＴＰ反应通道，而且细胞保持很好的活性状态。??Ａ?ＧｄＣＩ３?ｌＯＯｕＭ?Ｂ?１?ｉ??１??ＨＢＳＳ?Ｗａｓｈ?０?８?＿??．〇?Ｉ?§?°－６?■??ＩｓＬ?....

本文编号：3934684