Nrf2介导的抗氧化通路在常染色体显性多囊肾病中的作用及其机制研究

发布时间：2024-04-12 03:18

　　常染色体显性多囊肾病(autosomal dominant polycystic kidney disease,ADPKD)是人类最常见的遗传性肾病之一,主要表现为肾小管出现囊性扩张,进而破坏肾脏结构,导致肾脏功能的下降,最终导致终末期肾衰竭(ESRD)^[1,2]。绝大多数ADPKD患者的致病突变都发生在PKD1或者PKD2基因上,分别编码多囊蛋白1(polycystin-1,PC1)和多囊蛋白2(polycystin-2,PC2)。虽然ADPKD致病基因发现至今已有20多年,但对于多囊蛋白的正常生理功能及其突变导致疾病发生的分子机制仍不是十分清楚。近年来的研究发现,血管加压素受体拮抗剂托伐普坦(Tolvaptan)可以抑制ADPKD小鼠肾脏囊肿生长^[3]。临床试验的结果表明,托伐普坦可以一定程度地缓解疾病进程,改善肾脏功能,目前已在美国、欧洲和日本获批使用,但药物本身用量大,价格昂贵,并伴有多尿、夜尿、烦渴以及较为严重的肝脏毒性等副作用,因此限制了药物的使用^[4,5]。所以,阐释多囊肾病发病的分子机制,开发新的更为有效...

【文章页数】：74 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
缩略语
前言
对象和方法
    1.1 实验材料
        1.1.1 实验动物
        1.1.2 细胞系
        1.1.3 主要仪器设备
        1.1.4 实验试剂
        1.1.5 主要分析工具软件
    1.2 实验方法
        1.2.1 试剂配制
        1.2.2 细胞系培养
        1.2.3 细胞/组织蛋白提取
        1.2.4 蛋白免疫印迹
        1.2.5 细胞RNA提取
        1.2.6 RNA反转录
        1.2.7 实时荧光定量PCR
        1.2.8 基因组DNA提取
        1.2.9 H&E染色
        1.2.10 石蜡包埋
        1.2.11 细胞和组织DHE染色
        1.2.12 冷冻组织切片免疫荧光染色
        1.2.13 尿素氮检测
        1.2.14 肾集合管原代细胞分离
        1.2.15 他莫昔芬诱导
        1.2.16 肾脏灌流及心脏取血
        1.2.17 细胞免疫荧光
        1.2.18 组织蛋白提取(TMT)
        1.2.19 组织RNA提取
        1.2.20 数据分析
结果
    2.1 ADPKD小鼠模型转录组学和蛋白质组学联合生物信息学分析
        2.1.1 ADPKD小鼠模型转录组学分析
        2.1.2 ADPKD小鼠模型蛋白组学分析
        2.1.3 ADPKD小鼠模型转录组学和蛋白质组学共同差异基因
        2.1.4 转录组学以及蛋白质组学共同下调基因聚类分析
    2.2 Nrf2 介导的抗氧化通路在ADPKD中的机制
        2.2.1 多种多囊肾病疾病模型氧化应激水平检测
        2.2.2 蛋白质组学分析Nrf2 介导的抗氧化通路
        2.2.3 ADPKD中 Nrf2 调控通路检测
    2.3 Nrf2 调控通路在ADPKD中的功能
        2.3.1 Nrf2 敲除加速疾病进程
        2.3.2 中期模型激活Nrf2 介导的抗氧化通路缓解疾病进程
        2.3.3 长期模型激活Nrf2 介导的抗氧化通路缓解疾病进程
        2.3.4 激活Nrf2 介导的抗氧化通路缓解ADPKD伴随的肝脏囊肿
讨论
结论
参考文献
综述 Nrf2介导的抗氧化通路在ADPKD中的机制研究
    综述参考文献
发表论文和参加科研情况说明
致谢
个人简历



本文编号：3951578