Nrf2/ARE信号通路对高尿酸血症促进慢性肾脏病的保护作用及其机制
发布时间:2024-04-14 14:12
目的:本研究通过构建高尿酸细胞模型,通过Nrf2诱导剂SFN进行干预,观察激活Nrf2/HO-1信号通路对肾小管上皮细胞氧化应激相关指标的影响,并探讨Nrf2/HO-1信号通路在高尿酸血症促进慢性肾脏病中的保护作用和机制。方法:在本次实验研究中,我们将肾小管上皮细胞分配为8组,各组分别如下:A组:正常肾小管上皮细胞,用1640培养基培养48小时,无尿酸及SFN添加;B组:于1640培养基中加入SFN,使SFN浓度至5umol/L,随后培养48小时;C组:于1640培养基中加入尿酸,使尿酸浓度至300umol/L,并培养48小时;D组:于1640培养基中加入尿酸,使尿酸浓度至300umol/L,并同时加入SFN,使SFN浓度至5umol/L,随后培养48小时;E组:于1640培养基中加入尿酸,使尿酸浓度至500umol/L,并培养48小时;F组:于1640培养基中加入尿酸,使尿酸浓度至500umol/L,并同时加入SFN,使SFN浓度至5umol/L,随后培养48小时;G组:于1640培养基中加入尿酸,使尿酸浓度至700umol/L,并培养48小时;H组:于1640培养基中加入尿酸,使尿...
【文章页数】:65 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
ABSTRACT
前言
材料与方法
2.1 材料
2.1.1 实验细胞
2.1.2 主要设备及耗材
2.1.3 主要试剂
2.1.4 主要溶液配制方法
2.2 实验方法
2.2.1 实验分组
2.2.2 细胞模型构建方法
2.2.3 CCK-8试剂盒检测细胞活力及增殖
2.2.4 ROS的检测
2.2.5 MDA的检测
2.2.6 SOD的检测
2.2.7 HK2细胞的培养方法
2.2.8 细胞总蛋白、细胞质/核蛋白的提取
2.2.9 蛋白浓度的测定(BCA法)
2.2.10 蛋白质印迹法(免疫印迹试验)
2.2.11 细胞免疫荧光步骤
2.2.12 统计学分析
结果
3.1 SFN及不同浓度尿酸对肾小管上皮细胞活力的影响
3.2 不同浓度尿酸对肾小管上皮细胞ROS的影响
3.3 SFN及不同浓度尿酸对肾小管上皮细胞中MDA的影响
3.4 SFN及不同浓度尿酸对肾小管上皮细胞中SOD的影响
3.5 SFN处理后增加了Nrf2蛋白向细胞核内的转移
3.6 各组细胞质/细胞核中Nrf2的蛋白表达水平
3.7 各组总蛋白中HO-1的蛋白表达水平
讨论
结论
参考文献
中英文缩略词对照
致谢
本文编号:3954807
【文章页数】:65 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
摘要
ABSTRACT
前言
材料与方法
2.1 材料
2.1.1 实验细胞
2.1.2 主要设备及耗材
2.1.3 主要试剂
2.1.4 主要溶液配制方法
2.2 实验方法
2.2.1 实验分组
2.2.2 细胞模型构建方法
2.2.3 CCK-8试剂盒检测细胞活力及增殖
2.2.4 ROS的检测
2.2.5 MDA的检测
2.2.6 SOD的检测
2.2.7 HK2细胞的培养方法
2.2.8 细胞总蛋白、细胞质/核蛋白的提取
2.2.9 蛋白浓度的测定(BCA法)
2.2.10 蛋白质印迹法(免疫印迹试验)
2.2.11 细胞免疫荧光步骤
2.2.12 统计学分析
结果
3.1 SFN及不同浓度尿酸对肾小管上皮细胞活力的影响
3.2 不同浓度尿酸对肾小管上皮细胞ROS的影响
3.3 SFN及不同浓度尿酸对肾小管上皮细胞中MDA的影响
3.4 SFN及不同浓度尿酸对肾小管上皮细胞中SOD的影响
3.5 SFN处理后增加了Nrf2蛋白向细胞核内的转移
3.6 各组细胞质/细胞核中Nrf2的蛋白表达水平
3.7 各组总蛋白中HO-1的蛋白表达水平
讨论
结论
参考文献
中英文缩略词对照
致谢
本文编号:3954807
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