镁离子浓度对高钙、高磷诱导的VSMC钙化的影响及机制

发布时间：2024-04-19 21:27

　　目的：探讨镁离子浓度对高钙、高磷诱导的大鼠主动脉血管平滑肌细胞(RVSMC)钙化的影响,并了解镁离子能否通过抑制RVSMC向成骨样细胞分化、减少其凋亡,从而抑制RVSMC钙化。 方法：体外培养RVSMC,以CaCl2,NaH2PO4, MgSO4调节培养基中钙(Ca)、磷(Pi)、镁离子(Mg2+)浓度,于培养的不同时间点用邻甲酚酞合酮法检测细胞内钙含量,Real Time PCR法检测RVSMC的cbfa-1及a-SMA mRNA的表达,MTT法检测RVSMC凋亡情况。 结果：1.高钙组、高磷组培养的RVSMC在第7、10、14天时细胞内钙含量显著高于正常钙、磷组(P<0.01)。高钙组、高磷组培养第14天时,RVSMC的a-SMA mRNA表达均明显低于正常钙、磷组(P<0.05); cbfa-1mRNA水平明显高于正常钙、磷组(P<0.05)、细胞凋亡率显著高于正常钙、磷组(P<0.01)。 2.不同浓度镁离子分别作用于高钙、高磷培养的RVSMC7、14天,RVSMC内钙含量随培养基中镁离子浓度的上升而下降(P<0.05),呈剂量依赖性。高镁(2.0...

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【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
目录
缩略词
1 绪论
2 实验材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验主要试剂及耗材
        2.1.2 实验主要试剂的配置
        2.1.3 实验主要仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 细胞复苏
        2.2.2 细胞传代
        2.2.3 细胞冻存
        2.2.4 免疫荧光染色法鉴定细胞
        2.2.5 实验分组
        2.2.6 大鼠主动脉血管平滑肌细胞内钙含量测定
        2.2.7 实时荧光定量PCR
        2.2.8 MTT法测细胞凋亡
        2.2.9 统计学处理
3 实验结果
    3.1 RVSMC形态及免疫荧光染色细胞鉴定结果
    3.2 各组RVSMC内钙含量的变化
    3.3 不同浓度钙、磷、镁培养的RVSMC中cbfa-1、α-SMAmRNA表达情况
    3.4 不同浓度钙、磷、镁培养的RVSMC凋亡情况
4 讨论
5 结论
参考文献
综述
    参考文献
致谢



本文编号：3958401