泌尿系草酸钙结石蛋白分析

发布时间：2024-05-11 23:01

　　目的:研究泌尿系草酸钙结石蛋白成分特点,为进一步探索结石内基质蛋白在泌尿系结石形成中的作用与机制提供依据。方法:通过随机收集临床结石样本20例,通过清洗、干燥、充分碾磨结石标本后,采用结石成分分析仪分析结石无机组成成分;收集对应患者晨尿进行尿液分析及细菌培养。取准备好的结石样本粉末1克,加入5毫升RIPA蛋白裂解液溶解结石内蛋白,经冷冻干燥技术,浓缩提取结石内蛋白;采用Qproteome Bacterial Protein Prep K it试剂盒提取大肠杆菌蛋白。应用Bradford法分别测定草酸钙结石和大肠埃希氏菌内蛋白浓度,再通过SDS-SPAGE电泳纯化蛋白,银染染色和考马斯亮蓝染色分别鉴定结石和大肠杆菌内蛋白分子量大小,最后进行蛋白对比。通过胶内酶解后抽提肽段,经质谱分析鉴定蛋白质成份,对质谱结果进行Gene Ontology等生物功能信息分析。结果:1、草酸钙结石平均蛋白浓度为0.57ug/uL。存在泌尿道感染时的草酸钙结石内蛋白含量相对较高(p<0.05)。大肠杆菌蛋白浓度为5.38ug/uL。2、草酸钙结石蛋白与大肠杆菌的蛋白条带比对:SDS-PAGE结果显示草酸...

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【部分图文】：

图1尿蛋白浓度测定的标准曲线2.4SDS-PAGE电泳草酸钙结石内蛋白有3至4

江西医药2018年3月第53卷第3期JiangxiMedicalJournal，March2018，Vol53，No3*基金项目：江西省卫计委科技计划20152099；国家十二五科技支撑计划2013BAI05B00通信作者：傅斌ed.Keywords:Calciumoxalate....

图2草酸钙结石SDS-PAGE胶分离后行银染染色（M为蛋白marker)

江西医药2018年3月第53卷第3期JiangxiMedicalJournal，March2018，Vol53，No3*基金项目：江西省卫计委科技计划20152099；国家十二五科技支撑计划2013BAI05B00通信作者：傅斌ed.Keywords:Calciumoxalate....

图2草酸钙结石SDS-PAGE胶分离后行银染

第3章结所有结石样本均含有不同浓度的蛋白0.57ug/uL，其标准曲线见图1。合并感染的合并感染的结石平均蛋白浓度为0.23ug/uL。提示结石合并感染时和非感染时，结石蛋白浓度为5.38ug/uL。3.4SDS-PAGE凝胶电泳结果3.4.1草酸钙结石蛋白电泳结....

图3大肠杆菌蛋白SDS-PAGE胶分离后考3.5草酸钙结石蛋白质谱结果

图3大肠杆菌蛋白SDS-PAGE胶分离后3.5草酸钙结石蛋白质谱结果质谱结果共鉴定到各类蛋白88个示48.8%为结合功能蛋白，19.58%为催蛋白生物学过程分析结果显示8.14%的10.34%和7.12%的蛋白分别参与细胞过结合功能蛋白，提示结合功能蛋白在结作....

本文编号：3970500