短期持续机械牵拉对人膀胱平滑肌细胞收缩表型蛋白的影响及其与ERK/MAPK信号通路的关系

发布时间：2024-06-11 23:51

　　目的：研究人膀胱平滑肌细胞在短时间内持续牵拉各收缩表型蛋白的改变及与Erk/MAPK信号通路的关系。方法：本实验采用Real-time PCR、Western blot检测mRNA水平和蛋白水平各收缩表型蛋白的改变,免疫细胞化学和免疫细胞荧光观察α-SMA在MAPK阻断剂影响下后的改变,分析短时间持续牵拉人膀胱平滑肌细胞后各表型蛋白的改变以及与MAPK信号通路的关系。结果：持续牵拉人膀胱平滑肌细胞α-SMA出现先先下降后上升的现象,与细胞收缩功能密切相关的形态学表现一致,解除牵拉后,α-SMA仍能进一步上升,牵拉过程中Erks出现显著改变,而P38无明显改变,抑制剂分别抑制Erk通路和P38通路后,前者致使收缩表型蛋白发生显著改变。结论：α-SMA和细胞形态可反映人膀胱平滑肌细胞的收缩能力,短期牵拉人膀胱平滑肌细胞,其收缩功能先下降后回升,解除牵拉,其收缩功能也增加,这与Erk通路有关,而与P38通路无关。

【文章页数】：60 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图２?Ａ．?Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ?ＰＣ民人膀脫平滑肌细施ａ?－ＳＭＡ?ｍ民ＮＡ表达量与对照组相对量??柱状图统计

分为８沮：Ｏｓ组（Ｃｏｎｔｒｏｌ组即对照组）、３０ｓ沮、Ｉｍｉｎ组、５ｍｉｎ组、ｌＯｍｉｎ组、１５ｍｉｎ??组、３０ｍｉｎ组、：ｌｈ组。牵拉后２ｈ终止细胞培养。民ｅａｌ－ｔｉｍｅＰＣ民和Ｗｅｓｔｅｍｂｌｏｔ的结??果显不出现一波形改变，其中在ｌＯｍｉｎ组和１５ｍｉｎ组表型蜜白表达....

图２Ｅ．?Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ?ＰＣ民人膀脱平滑肌细胞ｍＲＮＡ的溶解曲线，ａ；ＳＭ２２、ｂ：ａ－??ＳＭＡ、Ｃ；?Ｓｍｏｏｔ；ｈｅｌｉｎ、ｄ；?Ｃａｌｐｏｎｉｎ、ｅ：?ＧＡＰＤＨ

ｍＲＮＡ发生波形改变，出现先减少，后增加现象，波答位于ｌＯｍｉｎ组和??１５ｍｉｎ?姐。??图２Ｃ？民ｅａｌ－ｔｉｍｅ?ＰＣ民人膀騰平滑肌细胞Ｃａｌｐｏｎｉｎ?ｍ民ＮＡ表达量与对照组相对??量柱状图统计。＊Ｐ＜０．０５?ＶＳ．对照组，提示在不同牵拉时间条件下，Ｃａｌｐｏｎｉｎ??....

图２Ｆ．?Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ条带提示人膀腕平滑肌细胞ａ－ＳＭＡ在不同牵拉条件下也出现类??－似Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ?ＰＣＲ波形改变，出现先减少，后增加现象，波谷位于ｌＯｍｉｎ组??

ｍＲＮＡ发生波形改变，出现先减少，后增加现象，波答位于ｌＯｍｉｎ组和??１５ｍｉｎ?姐。??图２Ｃ？民ｅａｌ－ｔｉｍｅ?ＰＣ民人膀騰平滑肌细胞Ｃａｌｐｏｎｉｎ?ｍ民ＮＡ表达量与对照组相对??量柱状图统计。＊Ｐ＜０．０５?ＶＳ．对照组，提示在不同牵拉时间条件下，Ｃａｌｐｏｎｉｎ??....

图２Ｇ：对图２Ｆ的条带用ｌｉｎａｇｅ?Ｊ软件进行灰度分析，先与ＧＡＰＤＨ内参进行比对后，??既而与Ｃｏｎｔｒｏｌ组进行比对，做一柱状图，＊Ｐ＜０．０５ｖｓ．对照组，结果更能直??

本文编号：3992900