男性不育患者精浆exosome中miR-184水平变化及临床意义

发布时间：2025-01-07 06:11

　　 目的:探讨男性不育患者精浆外泌体(exosome)中miR-184的水平变化及临床意义。方法:收集2015～2019年在江苏省中医院、东部战区总医院及温州医科大学附属第一医院就诊的97例无精子症患者、96例弱精子症患者及同期募集的92例正常生育男性精浆标本,分离精浆exosome后运用透射电镜、Nanosight和Western印迹对exosome进行鉴定;运用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测exosome miR-184的水平,统计分析miR-184变化、临床价值及与精液参数的相关性,进一步用生物信息学方法预测和分析miR-184靶基因、相关信号通路及与男性不育关系。结果:透射电镜、Nanosight和Western印迹结果显示,精浆中含有大量exosome。qRT-PCR结果显示,无精子症患者精浆exosome miR-184水平显著低于正常对照[0.227 (0.092, 0.790)vs 0.650 (0.408, 1.061)](P<0.01),弱精子症患者精浆exosome中miR-184水平显著高于正常对照[1.176 (0.661, 1.946)vs 0....

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【部分图文】：

图1 精浆exosome鉴定

采用TEM技术对分离的精浆exosome形态和结构进行鉴定(图1A),证实精浆中含有大量具有典型结构特征的exosome,呈球形。采用NTA技术检测分离的精浆exosome的大小分布和浓度,发现健康对照组和无精子症、弱精子症患者精浆exosome大小均为150nm左右,浓度约为....

图2 无精子症、弱精子症患者及正常对照精浆exosome miR-184水平

运用qRT-PCR技术对不育患者和正常对照组精浆exosomemiR-184水平检测结果显示,与正常对照组0.650(0.408,1.061)相比,无精子症患者精浆exosomemiR-184水平显著降低0.227(0.092,0.790)(降低2.86倍,P<0.....

图3 miR-184靶基因及参与蛋白通路生物学信息分析结果

3种生物信息学在线数据库TargetScan、miRanda和miRPathDB2.0预测miR-184可调控靶基因数量分别为93、662和2705种,3者共同预测到的miR-184靶基因为47种(图3A)。进一步通过Metascape对47种共同预测的靶基因进行功能注释和富....

本文编号：4024614