基于微流控共培养条件下膀胱肿瘤细胞能量代谢特点的研究

发布时间：2017-06-06 00:09

  本文关键词：基于微流控共培养条件下膀胱肿瘤细胞能量代谢特点的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的系统分析膀胱肿瘤细胞及肿瘤相关成纤维细胞能量代谢过程中线粒体相关蛋白质的改变,并探讨膀胱肿瘤细胞能量代谢特点。方法(1)应用微流控芯片三维立体培养技术建立成纤维细胞及膀胱肿瘤细胞共培养体系;(2)用多功能酶标仪检测计算不同组别细胞培养后培养液内乳酸的浓度(3)通过免疫荧光染色方法定性分析线粒体相关蛋白的改变;(4)通过蛋白印迹法定量分析线粒体相关蛋白的改变;(4)应用spss软件进行数据分析。结果(1)乳酸浓度测定:结果由高到低依次为实验组、膀胱肿瘤细胞对照组、成纤维细胞对照组。(2)蛋白定性结果:对照组成纤维细胞线粒体相关蛋白荧光较膀胱肿瘤强;实验组膀胱肿瘤线粒体相关蛋白荧光较成纤维强;实验组膀胱肿瘤细胞线粒体相关蛋白荧光较对照组强;对照组成纤维细胞线粒体相关蛋白荧光较实验组强。(3)蛋白定量结果:对照组线粒体相关蛋白的表达在膀胱肿瘤中较成纤维细胞明显降低(p0.05);实验组膀胱肿瘤线粒体相关蛋白的表达在膀胱肿瘤中较成纤维细胞明显增高(p0.05);成纤维细胞的线粒体相关蛋白的表达在实验组中较对照组的明显降低(p0.05);膀胱肿瘤细胞中的线粒体相关蛋白在实验组中较对照组的明显增高(p0.05)。结论膀胱肿瘤细胞的能量代谢并不完全是“瓦伯格”效应所认为的即便在氧供充足的条件下肿瘤仍以糖酵解的方式功能,在氧供充足的条件下膀胱肿瘤能量代谢也有高效氧化磷酸化的过程,同时也有肿瘤相关细胞有着密切联系,即肿瘤能量代谢是通过诱导毗邻的间质细胞进行糖酵解,引起营养前体生成增多。这些高能的代谢产物通过定向转运转移到毗邻的肿瘤细胞并进入三羧酸循环,致使氧化磷酸化增加和足量的ATP生成,从而构成代谢偶联。
【关键词】：能量代谢 瓦伯格效应 三维立体细胞培养 肿瘤发生 微流控
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.14
【目录】：

• 摘要2-3
• Abstract3-7
• 引言7-8
• 1 材料与试剂8-11
• 1.1 材料8
• 1.2 主要试剂8-9
• 1.3 主要仪器设备9-11
• 2 试验方法与步骤11-14
• 2.1 微流控芯片制作11-12
• 2.2 实验分组12
• 2.3 细胞系的建立12
• 2.4 培养液中乳酸浓度的测定12-13
• 2.5 蛋白定性分析：细胞免疫荧光法处理并观察实验组及对照组细胞的不同13
• 2.6 蛋白定量分析：通过蛋白印迹法分析不同组别膀胱肿瘤及成纤维细胞中线粒体相关蛋白的变化13-14
• 3 结果14-18
• 3.1 乳酸浓度测定结果14-15
• 3.2 蛋白定性分析结果15-16
• 3.3 蛋白定量分析结果16-18
• 4 讨论18-22
• 5 结论22-23
• 参考文献23-27
• 综述27-36
• 参考文献33-36
• 攻读学位期间的研究成果36-37
• 致谢37-39

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本文编号：424932