解偶联蛋白1在小鼠肾脏缺血再灌注损伤的作用
本文关键词:解偶联蛋白1在小鼠肾脏缺血再灌注损伤的作用
【摘要】:一、C57BL小鼠肾脏IRI模型的建立与观察目的:能够成功建立IRI损伤模型,对C57BL/6小鼠出现的肾功能损伤和病理形态作初步的观察与评定。方法:40只C57BL小鼠,满足实验指标,随机选择30只C57小鼠作为手术组,建立损伤模型;剩下的10只小鼠作为对照组。术后对C57小鼠肾功能进行评估,小鼠肾损伤通过肾脏标本进行苏木精-伊红染色来观察,并初步评定损伤级别:轻度、中度、重度,最后观察手术成功率,评定建模方法稳定性。结果:实验组C57BL小鼠术后存活率为93.33%,苏木精-伊红染色结果显示肾小管等的损伤,评定IRI损伤为轻中度。血肌酐相比对照组升高明显,肾功能损害。结论:C57BL小鼠手术成功率高,建模方法稳定可用,肾功能下降,染色病理损伤观察明显和作出评定,并初步完成C57BL小鼠IRI损伤的初步研究。二、UCP1在小鼠肾脏缺血再灌注损伤的作用目的:观察比较UCP1缺陷小鼠肾脏的IRI以及确定UCP1作用。方法:UCP1缺陷小鼠,雄性,6至8周,20-25g,20只作为实验组(UCP1组),C57小鼠,雄性,6至8周,20-25g,20只作为对照组(C57组),利用第一部分所采用的手术方式来构建损伤模型,实验术后24小时评定两组小鼠肾功能变化,采集实验组和对照组的血清和肾脏标本,通过苏木精-伊红染色肾脏标本,肾脏病理染色后观察肾脏改变并评定损伤等级。所有测定标本统一时间测定数值。实验结果:UCP1组(168.1±36.56、57.12±4.81)的血肌酐、尿素氮均高于对照C57组(60.99+11.16、36.38±5.21),具有统计学差异。(P0.001),另外UCP1缺陷小鼠病理损伤比C57小鼠更加严重,损伤评定级别升高。实验结论:UCP1缺陷的情况下IRI在小鼠肾脏中更加严重,所以UCP1能减轻这种损伤。三、研究UCP1缺陷小鼠肾脏IRI损伤加重机制目的:初步明确UCP1缺陷条件下存在的损伤机理方法:第二部分实验结果及相关的研究表明ROS可能导致了炎症反应更加的严重,利用对经典的炎症标记物TNF-α来衡量肾脏的炎症水平,第二部分所收集的标本(-80℃冰箱保存)进行RT-PCR检测TNF-α的含量检测。实验结果:UCP1组TNF-α表达水平(3.65+0.052),C57组TNF-α表达水平(1.65±0.048),具有统计学差异。(P0.05)结论探讨:在UCP1缺陷小鼠的肾脏中TNF-α表达水平明显高于C57小鼠,可能的原因为UCP1缺陷的情况下,产生更多的ROS并激发炎症相关因子作用损伤的肾脏,使得肾脏IRI损伤加重。
【关键词】:解偶联蛋白1 缺血再灌注损伤 活性氧
【学位授予单位】:中国人民解放军医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R699.2
【目录】:
- 中文摘要5-7
- 英文摘要7-10
- 前言10-13
- 一、C57BL小鼠肾脏IRI模型的建立与观察13-21
- 1. 材料13-14
- 2. 实验方法14-17
- 3. 数据统计学方法17
- 4. 结果17-19
- 5. 讨论19-21
- 二、观察UCP1缺陷小鼠肾脏IRI以及UCP1作用21-30
- 1. 材料21-22
- 2. 实验方法22-25
- 3. 数据统计学方法25
- 4. 结果25-27
- 5. 讨论27-30
- 三、研究UCP1对小鼠肾脏IRI保护机制30-38
- 1. 材料30-31
- 2. 实验方法31-34
- 3. 结果34
- 4. 讨论34-38
- 参考文献38-42
- 综述42-55
- 参考文献50-55
- 攻读硕士期间发表论文情况55-56
- 致谢56
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,本文编号:520236
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