运动干预对大鼠多囊卵巢综合征的影响和作用机制研究

发布时间：2017-10-10 20:01

  本文关键词：运动干预对大鼠多囊卵巢综合征的影响和作用机制研究

  更多相关文章： 运动干预 多囊卵巢综合征 卵泡发育 瘦素抵抗 OB-Rb

【摘要】：目的观察运动干预对大鼠多囊卵巢综合征的影响,研究瘦素(leptin)及其长型受体(OBRb)以及细胞因子信号转导抑制物3(SOCS3)在干预前后的变化,揭示运动预防大鼠PCOS的作用机制,为明确PCOS的发病机制、预防和控制PCOS提供科学依据。方法本实验采取完全随机设计(completely random design),设置对照组、模型组和干预组进行实验,其中干预组采取运动的干预方式,分为高(2h/d)、中(1h/d)、低(0.5h/d)三个运动强度。放射免疫法测大鼠血清性激素、空腹胰岛素、瘦素水平;HE染色观察卵巢组织学变化;实时荧光定量PCR法检测大鼠卵巢组织中leptin、OB-Rb以及SOCS3mRNA水平;蛋白免疫印迹法检测卵巢中OB-Rb及SOCS3蛋白水平;免疫组化法检测OB-Rb、SOCS3蛋白在卵巢中的表达部位和强度。结果大鼠一般情况模型组大鼠PCOS构建成功,表现为肥胖、瘦素抵抗、性激素紊乱、无排卵和卵巢内大量囊状卵泡;空腹胰岛素(FINS)、瘦素(leptin)水平升高。0.5h干预组大鼠体重、血清性激素、瘦素水平均与模型组无统计学差别(P0.05);动情周期类似,卵巢内含大量囊状卵泡,罕见正常卵泡和黄体;空腹胰岛素水平小幅下降,差异有统计学意义(P0.05)。1h/d的运动干预减轻了大鼠的体重,使之与对照组无统计学差别(P0.05),并帮助大鼠恢复排卵功能;卵巢内可见正常卵泡和黄体,伴囊状卵泡;孕酮(P)水平较模型组显著上升但仍低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);卵泡刺激素(FSH)水平显著上升,FINS、leptin水平大幅降低,差异有统计学意义(P0.05),均与对照组水平无统计学差别(P0.05)。除雌二醇(E2)浓度低于对照组水平之外,2h干预组大鼠在体重、动情周期、卵巢形态学方面均有良好表现:2h/d的运动降低了PCOS大鼠睾酮(T)、黄体生成素(LH)、FINS、leptin水平,也提升了P和FSH水平,差异均有统计学意义(P0.05);。卵巢组织中leptin、OB-Rb以及SOCS3基因的转录水平模型组大鼠卵巢leptin和SOCS3 mRNA高于对照水平,OB-Rb mRNA水平低于对照,差异有统计学意义(P0.05)。0.5h干预组大鼠卵巢中leptin mRNA没有发生变化,与模型组无统计学差别(P0.05),但OB-Rb mRNA升高,SOCS3 mRNA降低,差异均有统计学意义(P0.05)。1h干预组大鼠卵巢中leptin mRNA低于0.5h组水平,差异有统计学意义(P0.05);OB-Rb mRNA和SOCS3 mRNA均与0.5h组水平无差别(P0.05)。2h组大鼠卵巢leptin mRNA水平与对照组无统计学差别(P0.05);OB-Rb mRNA、SOCS3 mRNA水平均高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。卵巢组织中OB-Rb、SOCS3基因的翻译水平和表达部位OB-Rb在各阶段发育卵泡的颗粒细胞以及卵母细胞中均有表达。随着卵泡的发育,卵泡的颗粒细胞和卵母细胞中OB-Rb表达呈逐渐增强的趋势。模型组和0.5h干预组各发育卵泡颗粒细胞和卵母细胞中OB-Rb表达量均显著低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。1h和2h的运动干预促进了卵泡和卵母细胞中OB-Rb的表达,显著高于模型组(P0.05)。三个干预组囊状卵泡颗粒细胞中OB-Rb表达量在组间无统计学差异(P0.05),均高于模型组水平(P0.05)。SOCS3与OB-Rb的表达部位一致。在颗粒细胞中,发育卵泡中SOCS3的表达量与OB-Rb呈现相反趋势;而在卵母细胞中则无明显差别。0.5h和1h干预组各发育卵泡中SOCS3的表达量均低于模型组但高于对照组,差异有统计学意义(P0.05),而2h干预组出现异常增高,这很可能与2h运动干预显著促进OB-Rb在卵巢中的表达有关。结论瘦素抵抗是PCOS发病的原因之一;适量的运动通过提高卵巢中OB-Rb的基因表达水平,改善瘦素抵抗,促进卵泡发育,从而达到预防PCOS发病的效果。
【关键词】：运动干预 多囊卵巢综合征 卵泡发育 瘦素抵抗 OB-Rb
【学位授予单位】：广东药科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R711.75
【目录】：

• 中文摘要5-7
• ABSTRACT7-10
• 第一章 序言10-14
• 1.1 多囊卵巢综合征概述10
• 1.2 PCOS的诊断标准10-11
• 1.3 PCOS研究领域的热点与难点11-13
• 1.3.1 瘦素抵抗11-12
• 1.3.2 治疗方法12
• 1.3.3 疾病预防12
• 1.3.4 PCOS动物模型12-13
• 1.4 本研究的主要目的与内容13-14
• 第二章 运动干预对大鼠多囊卵巢综合征的影响14-28
• 2.1 引言14
• 2.2 实验材料14-15
• 2.2.1 实验动物14
• 2.2.2 实验试剂14-15
• 2.2.3 主要仪器15
• 2.3 实验方法15-18
• 2.3.1 实验设计15
• 2.3.2 样本量的确定15-16
• 2.3.3 实验步骤16-18
• 2.3.4 统计学分析18
• 2.4 实验结果18-25
• 2.4.1 大鼠血清性激素水平比较18-19
• 2.4.2 大鼠动情周期变化19-21
• 2.4.3 大鼠卵巢形态和组织学变化21-23
• 2.4.4 大鼠体重变化23-24
• 2.4.5 大鼠血脂、空腹胰岛素和瘦素水平比较24-25
• 2.5 讨论25-28
• 2.5.1 PCOS大鼠模型评价25
• 2.5.2 运动干预对大鼠多囊卵巢综合征的影响25-28
• 第三章 运动预防大鼠多囊卵巢综合征的机制28-51
• 3.1 引言28-29
• 3.2 实验材料29-31
• 3.2.1 实验样品29
• 3.2.2 实验试剂29-30
• 3.2.3 主要仪器30-31
• 3.3 实验方法31-41
• 3.3.1 实时荧光定量PCR (Real-time PCR)31-34
• 3.3.2 蛋白免疫印迹 (Western Blot)34-39
• 3.3.3 免疫组化 (Immunocytochemistry)39-40
• 3.3.4 统计学分析40-41
• 3.4 实验结果41-47
• 3.4.1 leptin、OB-Rb、SOCS3 mRNA在大鼠卵巢中的表达41-42
• 3.4.2 OB-Rb、SOCS3蛋白在大鼠卵巢中的表达42-43
• 3.4.3 OB-Rb、SOCS3蛋白在大鼠卵巢中的定位表达43-47
• 3.5 讨论47-51
• 3.5.1 大鼠PCOS发病的可能原因47-48
• 3.5.2 运动干预对大鼠卵巢中leptin、OB-Rb基因表达的影响48-50
• 3.5.3 运动干预对大鼠卵巢中SOCS3基因表达的影响50-51
• 第四章 结论51-53
• 4.1 运动干预对大鼠PCOS的影响和作用机制51-52
• 4.2 全文总结52
• 4.3 研究的局限与不足52-53
• 参考文献53-61
• 攻读硕士学位期间的学术成果61-62
• 致谢62

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