ERK通路在慢性高原病患者骨髓有核红细胞中的初步研究

发布时间：2017-11-08 15:14

  本文关键词：ERK通路在慢性高原病患者骨髓有核红细胞中的初步研究

  更多相关文章： 高原病 慢性 ERK信号通路 有核红细胞 PD98059

【摘要】：目的通过观察慢性高原病患者骨髓有核红细胞中Ras、Raf、MEK、ERK水平的变化,探讨ERK信号通路在CMS发生、发展中的作用。并进一步通过应用ERK信号通路抑制剂PD98059,探讨PD98059在该信号通路中的作用,进一步验证ERK信号通路对CMS发病机制的影响。方法选择青海大学附属医院收治的男性CMS患者及单纯陈旧性骨折患者各16例,采集骨髓液提取单个核细胞,用CD71与CD235a抗体筛选阳性细胞。其中CMS组骨髓有核红细胞分为5组:空白对照组、DMSO溶剂对照组、PD98059 5?mol/L、PD98059 10?mol/L、PD98059 20?mol/L。于37℃、5%CO2、3%O2的培养箱内培养72h,用Elisa法测定上清液中Ras-GTP的水平,用RT-PCR法测BRaf、MEK、ERK1/2 m RNA的表达,用Western Blot方法检测p-BRaf、p-MEK、p-ERK1/2蛋白的表达。结果1 CMS组骨髓有核红细胞中Ras-GTP水平[(21.34?0.78)pg/mL]高于对照组[(19.38?0.88)pg/m L],差异有统计学意义(P0.05)。CMS组BRaf、MEK、ERK1/2 m RNA的水平(1.60?0.38、2.57?1.50、1.11?0.59、1.08?0.79)均高于对照组(0.81?0.44、0.95?0.41、0.52?0.55、0.38?0.28),差异均有统计学意义(P0.05)。2 PD98059对Ras-GTP的影响:各组间Ras-GTP的水平差异无统计学意义(P=0.798)。3 PD98059对BRaf、MEK、ERK1/2 m RNA的影响:与溶剂对照组相比,BRaf、MEK m RNA的表达水平差异无统计学意义(P值为0.826、0.298)。与PD98059 20?mol/L比较,ERK1/2 m RNA的表达水平差异有统计学意义(P值为0.001、0.002)。4 PD98059对p-BRaf、p-MEK、p-ERK1/2蛋白的影响:与溶剂对照组相比,p-BRaf、p-MEK蛋白的表达差异无统计学意义(P值为0.370、0.351)。与PD98059 20?mol/L比较,p-ERK1/2蛋白水平差异有统计学意义(P值为0.001、0.007)。结论1 Ras/Raf/MEK/ERK通路的异常激活可能参与了CMS红细胞过度积累的发生、发展过程,推测其可能是CMS发生机制中的信号传导通路之一。2PD98059能够下调ERK1/2 m RNA及p-ERK1/2蛋白的表达。
【学位授予单位】：青海大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R594.3

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本文编号：1157665