microRNA-125a和A20在AS患者PBMCs中的表达水平及其临床意义

发布时间：2017-11-09 13:37

  本文关键词：microRNA-125a和A20在AS患者PBMCs中的表达水平及其临床意义

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【摘要】：目的:比较强直性脊柱炎(AS)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中mi R-125a、A20的表达水平与健康对照之间的差异,分析mi R-125a、A20的表达水平与AS临床特征及相关细胞因子之间的关系,探讨mi R-125和A20在AS发病机制中的作用,为AS的诊断、治疗及预后提供基础资料。方法:采用病例对照设计的方法,2014年4月-2015年9月期间,收集AS病例和健康对照各40例。AS病例来自安徽医科大学第一附属医院风湿免疫科门诊,年龄和性别频数匹配的40例健康对照来自合肥市淮河路步行街血站献血的健康人群。强直性脊柱炎疾病活动度评分(BASDAI)评分≥4的AS患者分在AS稳定组,BASDAI评分4的AS患者分在AS活动组。病例和对照分别采集5ml静脉血,分离PBMCs,提取RNA,逆转录为c DNA。使用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-q PCR)方法检测AS病例组与对照组PBMCs中mi R-125a、A20m RNA、IL-12m RNA、IL-17m RNA的相对表达水平,每个样本做3个复孔,比较AS病例组与对照组以及AS稳定组与AS活动组之间相关分子的相对表达水平,并分析mi R-125a与A20m RNA之间的相关性;使用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测病例和对照外周血中相关细胞因子IL-1、IL-6、IL-12、IL-17、IFN-β和TNF-a的表达水平,分析mi R-125a、A20m RNA等与这些相关细胞因子之间的相关性。组间比较统计处理使用的是非参数检验和t检验,相关性分析的统计处理使用的是Spearman等级相关。结果:病例组男性29人、女性11人,平均年龄28.10±7.86岁;对照组男性28人、女性12人,平均年龄27.32±7.48岁,两组年龄和性别比较差异无显著性。mi R-125a在病例组与对照组之间的比较发现:mi R-125a的相对表达水平在病例组与对照组之间差异无统计学意义(Z=0.509,P=0.527);mi R-125a在AS稳定组与AS活动组之间的比较发现:mi R-125a在两组之间的表达没有差异性(Z=-1.529,P=0.126);mi R-125a相关性分析发现;mi R-125a与A20 m RNA无相关性(rs=0.030,P=0.804),但mi R-125a与IL-6呈正相关(rs=0.518,P=0.001)、与IL-10呈正相关(rs=0.363,P=0.035)、与TNF-α呈正相关(rs=0.365,P=0.034);A20表达在病例组与对照组之间的比较发现:与对照组相比AS病例组A20 m RNA的相对表达水平增加(Z=-3.908,P0.001),提示A20在AS患者PBMCs中有异常表达;A20在AS稳定组与活动组之间的比较发现:A20在两组之间的表达差异也没有达到统计显著性(Z=0.498,P=0.505);但A20相关性分析发现:A20m RNA水平与CRP呈负相关(rs=-0.508,P=0.009)、与BASDAI呈负相关(rs=-0.352,P=0.045),其余各因子之间的相关性分析均未发现有统计学的关联(P均0.05);相关细胞因子在AS病例组与对照组之间的比较发现:IL-12表达病例组显著高于对照组(Z=-5.04,P0.001),IL-17表达病例组显著高于对照组(Z=-2.05,P=0.040),相关性分析发现:IL-12与IL-17呈显著正相关(rs=0.571,P0.001)。结论:未观察到mi R-125a在AS患者PBMCs有异常表达,A20的表达异常可能在AS的发病机制中起重要作用。
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R593.23

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