热射病大鼠认知功能远期损害及其海马NMDA受体表达的研究

发布时间：2017-11-10 20:03

  本文关键词：热射病大鼠认知功能远期损害及其海马NMDA受体表达的研究

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【摘要】：背景热射病(heat stroke,HS)是一种危及生命的急症,以中枢神经系统功能障碍为主要表现,神经功能后遗症以小脑和认知功能损害最为突出,但目前并没有针对热射病引起远期认知功能损害的实验研究。热射病后认知功能损害的机制尚不完全清楚,离子型谷氨酸N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体可通过改变突触可塑性和兴奋性氨基酸毒性作用影响学习记忆能力,参与缺血缺氧损伤、神经退行性变等多种生理和病理过程,热射病后海马NMDA受体的表达变化及其与认知功能障碍的关系目前仍不清楚。目的通过建立热射病大鼠模型,观察发病7天及21天后水迷宫实验,研究热射病认知功能的远期损害。检测热射病大鼠发病即刻、7天及21天后海马NMDA受体亚基NR2A、NR2B的表达,探讨热射病后海马神经元NMDA受体的动态表达变化及其与认知功能损害的关系。方法1.热射病大鼠模型的建立及分组建立热射病大鼠模型,将造模成功后的大鼠按照随机原则分为3组,热射病即刻组(HS0,n=10)、热射病7天组(HS7,n=21)、热射病21天组(HS21,n=21)。18只大鼠作为手术对照组(Sham,n=18)。HS0组大鼠在造模成功后立即断头取脑,留取海马组织。2.Morris水迷宫测试HS7和HS21组分别于造模后对应时间行Morris水迷宫实验。实验分为两部分:定位航行实验和空间探索实验。在最后一次水迷宫实验结束后,各组大鼠随机抽取4只立即断头取脑,留取海马组织。3.mRNA及蛋白检测应用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time quantitative Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)技术和蛋白质印迹法(Western Blot,WB)分析HS0、HS7、HS21及Sham组大鼠海马组织中NR2A、NR2B基因转录水平及蛋白水平的变化。4.统计学分析数据统计分析应用SPSS20.0及Graph Pad Prism 5统计软件。P0.05表示差异有统计学意义。结果1.定位航行实验HS7组与Sham组:HS7组较Sham组逃避潜伏期明显延长(P0.05);HS21组与Sham组:1-3 d时,HS21组与Sham组潜伏期无显著性差异(P0.05);4-5 d时,HS21组较Sham组潜伏期延长(P0.05);HS21组与HS7组:3-5 d时,HS21组较HS7组潜伏期缩短(P0.05)。2.空间探索实验目标象限停留时间:HS7组较Sham组缩短(P0.05);HS21组与Sham组无显著性差异(P0.05);HS21组较HS7组延长(P0.05)。穿越平台次数:HS7组和HS21组较Sham组减少(P0.05);HS21组与HS7组无显著性差异(P0.05)。3.RT-PCR检测结果(1)各组NR2A mRNA水平:HS0、HS7、HS21组NR2A mRNA的表达水平呈升高趋势,在第7天升高至峰值,第21天较第7天稍下降。各热射病组与Sham组相比均无统计学差异(P0.05)。(2)各组NR2B mRNA水平:HS0、HS7、HS21组NR2B mRNA的表达水平呈升高趋势。各热射病组与Sham组相比均无统计学差异(P0.05)。4.Western-Blot检测结果:(1)各组NR2A蛋白水平:HS0与Sham组比较NR2A蛋白水平明显下降(P0.05),HS7、HS21组与Sham组比较无统计学差异(P0.05)。在热射病发生后即刻NR2A蛋白水平下降,随着热射病后恢复期时间的延长,NR2A蛋白水平呈升高趋势。(2)各组NR2B蛋白水平:HS0与Sham组比较NR2B蛋白水平明显下降(P0.05),HS7、HS21组与Sham组比较无统计学差异(P0.05)。在热射病发生后即刻NR2B蛋白水平下降,随着热射病后恢复期时间的延长,NR2B蛋白水平在第7天升高,21天时稍下降。结论1.热射病后大鼠空间学习记忆能力下降,并可遗留远期认知功能损害。2.热射病后海马组织中NMDA受体表达变化可能与认知功能损害有关。
【学位授予单位】：新乡医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R594.1

【参考文献】

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本文编号：1168118