miR-214在狼疮性肾炎小鼠肾小球系膜细胞增殖中的作用及其机制

发布时间：2017-11-11 17:26

  本文关键词：miR-214在狼疮性肾炎小鼠肾小球系膜细胞增殖中的作用及其机制

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【摘要】：目的探讨微小RNA-214(miR-214)在狼疮性肾炎(LN)小鼠肾小球系膜细胞增殖中的作用及其相关机制。方法将MRL-Faslpr/JNju小鼠(简称LN小鼠,20只)和野生型小鼠(20只)处死,分离、培养其肾小球系膜细胞;将LN小鼠肾小球系膜细胞随机分为两组,分别转染miR-214 mimics(观察组)和NC mimics control(对照组)。采用实时荧光定量PCR法检测两种小鼠及两组肾小球系膜细胞miR-214相对表达量,采用MTT法检测两组转染1、2、3天的细胞增殖抑制率。采用生物信息学方法预测细胞中miR-214的靶基因,并经双荧光素酶报告基因试验验证,YKL-40是miR-214的靶基因。采用实时荧光定量PCR法和Western blotting法检测两组YKL-40 mRNA及蛋白相对表达量。取对数生长期的LN小鼠肾小球系膜细胞,分别转染si YKL-40和negative control,采用MTT法检测转染1、2、3天的细胞增殖抑制率。结果 LN小鼠和野生型小鼠肾小球系膜细胞miR-214相对表达量分别为0.35±0.09、1,两者比较P0.01。观察组和对照组miR-214相对表达量分别为85.54±12.07、1,两组比较P0.01。观察组转染1、2、3天的细胞增殖抑制率均高于对照组(P0.05或0.01)。与对照组比较,观察组YKL-40 mRNA及蛋白相对表达量均降低(P均0.05)。与转染negative control比较,转染si YKL-40的LN小鼠肾小球系膜细胞转染1、2、3天的细胞增殖抑制率均升高(P0.05或0.01)。结论 LN小鼠肾小球系膜细胞中miR-214表达降低,上调miR-214表达可抑制其增殖;下调YKL-40表达可能是miR-214的作用机制。
【作者单位】： 哈尔滨医科大学第四附属医院;
【基金】：黑龙江省青年科学基金资助项目(QC2010094)
【分类号】：R593.242
【正文快照】： 肾小球系膜细胞过度增殖是狼疮性肾炎(LN)的主要病变特点,过度增殖的系膜细胞可以释放更多的炎症因子,分泌细胞外基质,加剧炎症和引起肾小球硬化。微小RNA分子(microRNAs)简称miRNAs,广泛参与胚胎发育、细胞分化、肿瘤形成及损伤修复等生理病理过程[1,2]。研究发现,LN组织中有

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