GSK-3β在类固醇糖尿病小鼠胰岛β细胞凋亡中的作用

发布时间：2017-11-20 12:09

  本文关键词：GSK-3β在类固醇糖尿病小鼠胰岛β细胞凋亡中的作用

  更多相关文章： GSK-3β 类固醇糖尿病 β细胞 凋亡

【摘要】：目的通过建立类固醇激素糖尿病小鼠动物模型,观察GSK-3β基因在类固醇激素糖尿病小鼠胰岛β细胞凋亡中的作用,并探讨高脂饮食对GSK-3β基因表达的影响。方法将64只雄性C57小鼠(18~25g)随机分为4组:普通饲料对照组(A),普通饲料给药组(B),高脂饲料对照组(C),高脂饲料给药组(D)。A组和B组给予普通维持饲料,C、D组给予高脂饲料喂养3个月。然后,B、D组给予地塞米松腹腔注射(5mg/Kg),每天上午八点注射,每日一次,A组、C组用同样方法给予同等剂量的生理盐水,并监测小鼠体重、血糖变化,3周后,进行口服葡萄糖耐量(OGTT)实验,取血,处死动物,留取少量全血迅速测量糖化血红蛋白水平,其余血液离心后留取血浆,测定胰岛素、C肽、血糖、血脂、游离脂肪酸水平,利用HOMA-β评价胰岛β细胞功能,并迅速留取胰腺组织,通过光学显微镜和透射电子显微镜观察小鼠胰腺组织形态学变化,应用TUNEL方法观察胰岛细胞凋亡情况,免疫组织化学染色方法观察胰岛细胞GSK-3β,p-GSK-3β-Ser9,p-GSK-3α/β-Tyr279/216,胰岛素原,糖皮质激素受体和凋亡相关基因Caspase-3,Bax,Bcl-2的表达,进一步通过Western blot方法观察GSK-3β,p-GSK-3β-Ser9,p-GSK-3α/β-Tyr279/216表达水平。结果高脂饲料喂养的C57小鼠与普通维持饲料喂养的小鼠相比,体重明显增加(P0.05),口服糖耐量受损;给予地塞米松腹腔注射后,与A组、C组相比,B组、D组体重下降明显,血糖升高,口服糖耐量受损加重,均具有统计学意义(P0.05);与A组相比,B、C、D组总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白均有升高,但B组的变化没有统计学意义,C、D组的升高具有统计学意义(P0.001),C、D组高密度脂蛋白明显降低(P0.001);与A组相比,B组游离脂肪酸水平有所升高,C组的游离脂肪酸水平也有升高(P0.01),D组的升高最明显(P0.001),而且与C组相比,D组的游离脂肪酸水平有了显著的升高(P0.001)。B组、D组糖化血红蛋白升高,且D组升高更加明显(P0.05),C组糖化血红蛋白变化不大;与A组相比,B、C、D组血浆胰岛素、C肽和HOMA-β(%)均有不同程度的降低,D组降低最明显(P0.01);TUNEL染色结果显示:A组未见凋亡细胞,B、C、D组均可见凋亡细胞,其中B、D组胰岛细胞凋亡严重;免疫组织化学染色结果显示:与A组相比,B、C、D组Proinsulin表达水平下调,D组下调最明显;与A组相比,B、D组的Caspase-3、Bax表达水平上调,Bcl-2表达水平下调,p-GSK-3β-Ser9表达水平下调,p-GSK-3α/β-Tyr279/216表达水平上调,C组变化不明显,各组之间GSK-3β并没有明显差异;Western blot结果显示:与A组相比,B、D组p-GSK-3β-Ser9表达水平下调(P0.01),p-GSK-3α/β-Tyr279/216表达水平上调(P0.05),C组变化不明显,与免疫组化结果一致;光学显微镜观察显示:A、C组胰岛结构完整,边界清晰,形态规则;B组胰岛面积减小;D组胰岛数量减少,面积减小,形态极不规则;透射电子显微镜观察显示,A组小鼠胰岛β细胞胞浆内有大量的分泌颗粒,为圆球形,较大,外包以界膜,颗粒内有电子密度不一的芯,芯多为圆形,少数可见矩形或不规则的芯,界膜与芯之间的间隙较大,明亮,清晰。胞浆内线粒体、内质网较丰富,细胞核较大,呈圆形或卵圆形,核膜光滑;与A组相比,B、C组内分泌颗粒减少,致密芯密度减低,核染色质浓缩,B组细胞核染色质边集,C组伴有明显的内质网扩张,D组细胞内分泌颗粒显著减少,有的细胞甚至缺如,致密芯密度明显减低;线粒体数量减少,肿胀变形,内质网不同程度扩张,可见脱颗粒现象;胞核小而不规则,核膜凹凸不平,染色质凝集成块状,散布于细胞核内。结论GSK-3β介导的胰岛β细胞凋亡参与地塞米松诱导类固醇糖尿病的发生;高脂饮食可通过提高GSK-3β活性加重类固醇糖尿病小鼠的胰岛β细胞损伤。
【学位授予单位】：华北理工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R587.1

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 邓向群;陈璐璐;;胰岛β细胞凋亡的分子机制[J];国际内分泌代谢杂志;2006年03期

2 寇敏;刘倩琦;;细胞因子诱导胰岛β细胞凋亡的研究进展[J];实用糖尿病杂志;2007年04期

3 寇敏;刘倩琦;;细胞因子诱导胰岛β细胞凋亡的研究进展[J];实用糖尿病杂志;2007年05期

4 迟金华;一氧化氮与胰岛β细胞凋亡[J];国外医学(儿科学分册);2002年06期

5 丁红,张月明;1型糖尿病胰岛β细胞凋亡的影响因素[J];中国公共卫生;2005年02期

6 徐佳;李果;;胰淀素引起胰岛β细胞凋亡的机制[J];国际内分泌代谢杂志;2006年06期

7 吴小燕;陈永峰;;2型糖尿病胰岛β细胞凋亡机制[J];中国医学创新;2011年17期

8 朱晗玉;洪权;张冬;耿文佳;刘沫言;谢院生;陈香美;;单核细胞趋化蛋白-1通过促进胰淀素表达调控胰岛β细胞凋亡[J];军医进修学院学报;2012年05期

9 曹仁贤;胰岛β细胞凋亡与糖尿病[J];国外医学.内分泌学分册;1997年02期

10 朱波,薛耀明;胰岛β细胞凋亡在2型糖尿病中的作用研究进展[J];广东医学;2005年05期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 丁红;张月明;;1型糖尿病胰岛β细胞凋亡的影响因素[A];营养健康新观察（第二十六期）：膳食营养与糖尿病专题[C];2006年

2 朱敏;;熊脱氧胆酸对内质网应激的胰岛β细胞凋亡的保护作用及其机制[A];第六届江浙沪儿科学术会议暨儿科学基础与临床研究进展学术班论文汇编[C];2009年

3 侯芳芳;芦秀丽;高兵;刘振青;王旭德;;游离胆固醇通过激活氧化应激信号途径诱导胰岛β细胞凋亡[A];北方遗传资源的保护与利用研讨会论文汇编[C];2010年

4 朱波;薛耀明;李晨钟;沈洁;潘永华;张燕;;罗格列酮对胰岛素抵抗大鼠胰岛β细胞凋亡的影响[A];2006年中华医学会糖尿病分会第十次全国糖尿病学术会议论文集[C];2006年

5 李桢;周智广;胡芳;向宇飞;贺利宁;周启昌;;Exendin-4对胰岛β细胞凋亡和线粒体的影响[A];中华医学会糖尿病学分会第十六次全国学术会议论文集[C];2012年

6 门秀丽;张菲菲;张文健;彭亮;许世清;娄晋宁;;GLP-1对内质网应激诱导的胰岛β细胞凋亡的影响[A];中国病理生理学会第九届全国代表大会及学术会议论文摘要[C];2010年

7 傅静奕;李焱;严励;张淼;陈黎红;傅祖植;;甘精胰岛素对游离脂肪酸诱导的胰岛β细胞凋亡的拮抗的作用[A];2006年中华医学会糖尿病分会第十次全国糖尿病学术会议论文集[C];2006年

8 魏倩;张锦;;胰高血糖素样肽-1类似物对高游离脂肪酸诱导的胰岛β细胞凋亡作用的研究[A];中华医学会第十一次全国内分泌学学术会议论文汇编[C];2012年

9 冯楠;马晓伟;郭晓蕙;;高糖和或高脂刺激下p38MAPK四种亚型对胰岛β细胞凋亡影响的研究[A];中华医学会第十二次全国内分泌学学术会议论文汇编[C];2013年

10 张增利;李冰燕;王小慧;童建;;维生素D对怀孕后小鼠胰岛β细胞结构和功能的影响[A];第二届全国妊娠糖尿病学术会议论文汇编[C];2008年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 蒋铁建;胰岛β细胞凋亡在NOD鼠糖尿病发生发展及免疫干预中的作用研究[D];中南大学;2003年

2 门秀丽;Drp-1基因参与高糖诱导胰岛β细胞凋亡的相关机制研究[D];中国协和医科大学;2007年

3 吴薇;糖原合成酶激酶3在油酸诱导胰岛β细胞凋亡中的作用及调控[D];华中科技大学;2011年

4 钱波;TRB3基因参与高糖诱导的胰岛β细胞凋亡机制的研究[D];中国协和医科大学;2008年

5 邓向群;SIRT1表达对大鼠胰岛β细胞凋亡及非酒精性脂肪肝病形成的影响[D];华中科技大学;2007年

6 吴薇;糖原合成酶激酶3在油酸诱导胰岛β细胞凋亡中的作用及调控[D];华中科技大学;2011年

7 祝群;1-磷酸鞘氨醇及中性神经酰胺酶保护炎症因子引起的胰岛β细胞凋亡[D];南京医科大学;2008年

8 顾剑;人参皂苷Compound K对2型糖尿病小鼠胰岛β细胞凋亡的保护作用及其机制研究[D];吉林大学;2013年

9 方妮;TRIB3参与内质网应激诱导的胰岛β细胞凋亡机制的研究[D];北京协和医学院;2014年

10 秦君;TRB3在游离脂肪酸诱导胰岛β细胞凋亡中的作用及机制研究[D];山东大学;2014年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 郭彬;GSK-3β介导地塞米松诱导胰岛β细胞凋亡的体外研究[D];华北理工大学;2015年

2 高向楠;Roux-en-Y胃旁路术对2型糖尿病大鼠胰岛β细胞凋亡的影响[D];辽宁医学院;2015年

3 王昊乾;PrxI对STZ诱导的胰岛β细胞凋亡的保护作用[D];黑龙江八一农垦大学;2016年

4 吉慧珍;内质网应激、自噬及miR-375在高糖高脂诱导的胰岛β细胞凋亡中的作用探讨[D];山西医科大学;2016年

5 周贺;GSK-3β在类固醇糖尿病小鼠胰岛β细胞凋亡中的作用[D];华北理工大学;2016年

6 张菲菲;胰高血糖素样肽-1对内质网应激诱导胰岛β细胞凋亡的影响[D];河北联合大学;2011年

7 石小丽;波动性高糖诱导胰岛β细胞凋亡研究[D];浙江大学;2011年

8 张洁;p58促胰岛β细胞凋亡机制的研究[D];中国协和医科大学;2008年

9 张宏波;催乳素对胰岛β细胞凋亡的保护作用及其机理研究[D];上海交通大学;2010年

10 郝萌萌;黄芪对小鼠胰岛炎及胰岛β细胞凋亡的保护作用[D];青岛大学;2013年

，

本文编号：1207089