α-胞衬蛋白siRNA对人涎腺导管细胞的影响

发布时间：2017-11-29 00:11

  本文关键词：α-胞衬蛋白siRNA对人涎腺导管细胞的影响

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【摘要】：目的观察α-胞衬(α-Fodrin)蛋白小干扰RNA(siRNA)对人涎腺导管(HSG)细胞的影响,探讨α-Fodrin siRNA治疗干燥综合征(SS)的作用。方法实验分对照组、空载体组、α-Fodrin siRNA1组及α-Fodrin siRNA2组,将成功构建的10μgα-Fodrin siRNA1和α-Fodrin siRNA2表达载体分别采用脂质体法转染HSG细胞,空载体组HSG细胞转染等剂量的pGFP-V-RS空载体。转染后24、48、72和96h观察细胞转染效率,实时荧光定量(RT)-PCR法检测4组HSG细胞中α-Fodrin mRNA的表达水平;细胞荧光免疫法检测4组细胞中α-Fodrin蛋白的表达水平;ELISA法检测4组细胞上清液中IFN-γ、IL-10的表达水平。结果转染后48hHSG细胞转染效率最高;转染后48hα-Fodrin siRNA1组和α-Fodrin siRNA2组HSG细胞中α-Fodrin mRNA和蛋白的表达水平明显低于对照组和空载体组(P0.05),且α-Fodrin siRNA2组中α-Fodrin mRNA的表达水平低于α-Fodrin siRNA1组的表达水平(P0.05);α-Fodrin siRNA1组和α-Fodrin siRNA2组细胞上清液中IL-10的水平明显升高,较对照组和空载体组差异有统计学意义(P0.05),α-Fodrin siRNA1组和α-Fodrin siRNA2组比较差异无统计学意义(P0.05);α-Fodrin siRNA1组和α-Fodrin siRNA2组细胞上清中IFN-γ的水平低于对照组和空载体组,但4组之间比较差异无统计学意义(P0.05)。结论 HSG细胞转染α-Fodrin siRNA载体后,α-Fodrin mRNA和蛋白的表达水平下降,同时细胞上清中IL-10的水平升高、IFN-γ水平下降,提示α-Fodrin siRNA可以减轻炎性反应,为SS的治疗提供实验依据。
【作者单位】： 内蒙古科技大学包头医学院风湿免疫研究所/包头医学院第一附属医院风湿免疫科;
【基金】：包头市医药卫生基金项目(2009S1001-34) 内蒙古自治区科技计划项目(20120403)
【分类号】：R593.2
【正文快照】： α-胞衬(α-Fodrin)蛋白是从干燥综合征(sj錸gren’s syn-drome,SS)小鼠唇腺中提取的涎腺特异性自身抗原,在SS的发病过程中起非常重要的作用,对SS的诊断和指导治疗都起到了很好的作用,有较好的特异度和灵敏度[1-2]。人涎腺导管(human salivary gland cells,HSG)细胞来源于人下

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本文编号：1235486