丹酚酸B对糖尿病血糖波动模型大鼠胰岛细胞的保护作用及机制研究
发布时间：2018-04-15 14:46
本文选题：丹酚酸B + 糖尿病 ； 参考：《皖南医学院》2017年硕士论文
【摘要】：目的:观察丹酚酸B对糖尿病血糖波动模型大鼠胰岛细胞的保护作用,并探讨其可能机制。方法:1.动物实验:采用高糖高脂加一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)40mg·kg-1诱导糖尿病大鼠模型。将造模成功的大鼠(随机血糖≥16.7 mmol/L)随机分为波动血糖组(双蒸水,5 ml·kg-1·d-1)、丹酚酸B高、低剂量组(160 mg·kg-1·d-1及80mg·kg-1·d-1),另设正常对照组(双蒸水,5 ml·kg-1·d-1),连续灌胃给药6周。波动血糖组与丹酚酸B治疗组大鼠通过皮下注射胰岛素或灌服葡萄糖建立糖尿病血糖波动模型,期间每周称重一次,并检测1日内5点血糖波动水平,每2周检测大鼠空腹血糖变化,于给药6周末进行口服糖耐量(OGTT)试验,计算曲线下面积(AUC)。腹主动脉取血,检测大鼠血清总胆固醇(TC)、糖化血红蛋白(GHb)和空腹血清胰岛素(FINS)水平,并计算胰岛素敏感指数(ISI)和胰岛素抵抗指数(IR);测定血清和胰腺组织中总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量和胰腺组织Caspase-9、Caspase-3活性;HE染色及TUNEL染色分别检测胰腺组织病理学改变及胰岛细胞凋亡水平;Western blot法检测胰腺组织JNK、NF-κB活化水平及胰十二指肠同源盒-1(PDX-1)、Bax、Bcl-2、Bim蛋白表达水平。2.INS-1细胞实验:INS-1细胞与丹酚酸B(1×10-5,10-6,10-7mol/L)预孵24 h后暴露于间歇性高糖(11.1 mmol/L 12 h,33.3 mmol/L 12 h)72 h。CCK8法测定INS-1细胞活力,ELISA法检测葡萄糖刺激的胰岛素释放水平,流式细胞术检测细胞凋亡水平,荧光探针DCFH-DA、JC-1分别测定细胞内活性氧(ROS)水平和线粒体膜电位变化,比色法测定细胞T-AOC、MDA含量及Caspase-9、Caspase-3活性,Western blot法检测细胞JNK、NF-κB活化水平和PARP、PDX-1、Bax、Bcl-2、Bim蛋白表达情况。结果:1.动物实验:(1)丹酚酸B可明显增加糖尿病大鼠体重,降低糖化血红蛋白含量,改善糖耐量水平(P0.05或P0.01)。(2)丹酚酸B可显著增加胰岛素分泌水平,降低空腹血糖、血清总胆固醇水平(P0.05或P0.01),改善胰岛素抵抗并提高胰岛素敏感指数(P0.05)。(3)丹酚酸B可明显改善糖尿病大鼠胰岛病理学改变,减少胰岛细胞损伤,抑制JNK、NF-κB活化水平(P0.05或P0.01)。(4)丹酚酸B可明显抑制糖尿病大鼠胰岛细胞凋亡,上调PDX-1、Bcl-2蛋白水平,下调Bax、Bim蛋白表达(P0.05或P0.01),降低Caspase-9、Caspase-3活性(P0.05或P0.01)。(5)丹酚酸B能显著提高大鼠血清及胰腺组织中SOD活性,增强总抗氧化能力(P0.05或P0.01),降低MDA水平(P0.05或P0.01)。2.INS-1细胞实验:(1)丹酚酸B可明显改善间歇性高糖诱导的INS-1细胞损伤和凋亡,增强细胞活力,上调Bcl-2蛋白表达,下调Bax、Bim表达水平,降低Caspase-9、Caspase-3活性和PARP剪切水平(P0.05或P0.01)。(2)丹酚酸B能显著提高线粒体膜电位水平和胰岛素释放(P0.05或P0.01),增加PDX-1蛋白表达(P0.05或P0.01)。(2)丹酚酸B可明显增强INS-1细胞总抗氧化能力,降低细胞内ROS水平和MDA含量,抑制JNK、NF-κB活化水平(P0.05或P0.01)。结论:1.丹酚酸B可明显改善糖尿病血糖波动模型大鼠胰岛功能,抑制胰岛细胞凋亡;2.丹酚酸B抑制胰岛β细胞凋亡、增加胰岛素分泌水平与增强抗氧化能力,抑制应激敏感性JNK、NF-κB信号通路、上调PDX-1蛋白表达有关;3.丹酚酸B抑制胰岛β细胞凋亡还与调节Bcl-2家族蛋白表达失衡、降低线粒体膜通透性、进而抑制Caspase-9、Caspase-3活性有关。
[Abstract]:鐩殑:瑙傚療涓归厷閰窧瀵圭硸灏跨梾琛，
本文编号：1754563
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/nfm/1754563.html
最近更新
教材专著
