骨质疏松大鼠骨髓基质细胞膜片的体外构建研究
本文选题：骨质疏松 + 骨髓基质细胞 ； 参考：《中国骨质疏松杂志》2017年08期
【摘要】：目的探讨骨质疏松大鼠骨髓基质细胞膜片的构建及基本生物学特性。方法建立大鼠绝经后骨质疏松症(PMOP)模型,分离培养骨质疏松大鼠骨髓基质细胞(O-r BMSCs),并以O-rBMSCs为种子细胞构建细胞膜片。通过倒置显微镜、HE染色、扫描电镜及透射电镜对细胞膜片进行形态学检测;以免疫组织化学染色检测细胞外基质相关蛋白的表达情况。结果成功建立了大鼠PMOP模型,体外分离培养的O-rBMSCs具有多向分化潜能。显微镜下可见细胞复层生长,采用富含维生素C的培养基连续培养10 d左右即可获得白色膜样结构,该细胞膜片具有较好的弹性,HE染色及扫描电镜观察发现O-rBMSCs膜片由多层细胞及丰富的细胞外基质组成。透射电镜下可观察到细胞间连接。免疫组织化学染色示O-rBMSCs膜片高表达Ⅰ型胶原、纤维连接蛋白。结论 O-rBMSCs体外采用富含维生素C的培养基连续培养可构建细胞膜片,该细胞膜片富含细胞外基质,有望应用于骨质疏松机体的组织再生。
[Abstract]:Objective to study the construction and basic biological characteristics of bone marrow stromal cell membrane in osteoporosis rats. Methods the rat model of postmenopausal osteoporosis (PMOP) was established. Bone marrow stromal cells (BMSCs) of osteoporosis rats were isolated and cultured. O-rBMSCs was used as seed cells to construct cell membrane. The cell membrane was detected by HE staining, scanning electron microscope and transmission electron microscope, and the expression of extracellular matrix related proteins was detected by immunohistochemical staining. Results the rat PMOP model was successfully established. The O-rBMSCs isolated and cultured in vitro had multidirectional differentiation potential. Under microscope, the cell layer growth was observed, and the white membrane structure could be obtained by continuous culture on the medium rich in vitamin C for about 10 days. It was found that the O-rBMSCs membrane was composed of multilayer cells and abundant extracellular matrix. Intercellular junctions were observed under transmission electron microscope. Immunohistochemical staining showed that O-rBMSCs membrane highly expressed type I collagen and fibronectin. Conclusion Vitamin C rich culture medium can be used to construct O-rBMSCs cell membrane in vitro, which is rich in extracellular matrix and is expected to be used in tissue regeneration of osteoporosis.
【作者单位】： 福建医科大学附属口腔医院;福建省高校口腔医学重点实验室;温州医科大学附属口腔医院;
【基金】：国家自然科学基金项目(81100761) 福建省卫生系统中青年骨干人才培养项目(2015-ZQN-ZD-28) 福建省自然科学基金项目(2012J05144)
【分类号】：R580
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，本文编号：1797430
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