CUEDC2在糖尿病肾病EMT发生中的作用及机制研究

发布时间：2018-05-03 15:19

本文选题：CUEDC2 + 糖尿病肾病　；参考：《南方医科大学》2017年硕士论文

【摘要】：糖尿病肾病(Diabetic nephropathy,DN)是糖尿病最常见且最难治的微血管并发症。肾小球硬化,肾小球系膜细胞外基质(Extra cellular matrix,ECM)的沉积和肾小管间质中的纤维化是糖尿病肾病的主要病理特征,其中肾小管间质性纤维化(Tubular interstitial fibrosis,TIF)是包括糖尿病肾病在内的多种慢性肾脏疾病进展为终末期肾病的主要病理基础。肾小管上皮细胞EMT(Epithelial-Mesenchymal Transition,EMT)对肾间质纤维化起到关键性作用,被认为是肾间质纤维化发生发展的核心环节之一。虽然肾小管上皮细胞EMT在肾脏纤维化中的作用已经被充分认识到,但是它们在糖尿病肾病发生发展过程中的精确调节分子机制仍需要进一步阐明。转化生长因子β1(Transforminggrowth factorβ1,TGF-β1)被认为是DN中的关键性介质,能直接诱导肾小管上皮细胞EMT。TGF-β1可上调ECM蛋白的表达,同时增强ECM降解酶抑制剂如纤溶酶原激活物抑制剂1型(PAI-1)的表达。同时,TGF-β1/Smads信号传导通路被认为是介导肾脏纤维化最重要、最经典的途径。CUEDC2(CUE domain containging βrotein 2,CUEDC2)是一种新发现的含有CUE结构域的多功能蛋白,在多种肿瘤中表达量上升,并在诸如细胞周期,炎症和肿瘤发生等许多生物过程中发挥关键作用。CUE结构域含有一个约40个氨基酸的大小的泛素结合序列,能够识别单泛素和多泛素,并促进分子间单泛素化。CUEDC2能与孕激素受体(PR)相互结合,促进孕酮诱导的孕激素受体泛素化降解。此外,据报道,CUEDC2可以通过募集蛋白磷酸酶1(PP1)到IKK/CUEDC2复合物,并通过招募PP1对IkB激酶α(IKKα)和IkB激酶β(IKKβ)去磷酸化作用,从而抑制IKKα和IKKβ磷酸化,最终下调NF-κB通路。然而,CUEDC2在DN发生发展中的作用及机制尚未阐明。本课题组从以下两个方面开展研究工作以揭示CUEDC2在糖尿病肾病EMT发生中的作用及机制:(一)CUEDC2对DN肾脏生化功能及肾间质纤维化的作用为了探究CUEDC2对DN肾间质纤维化及肾脏生化功能的作用,我们首先在临床DN和db/db小鼠自发性糖尿病肾病模型中检测CUEDC2在肾脏中的表达及定位;而后在自发性糖尿病肾病db/db小鼠模型中,探讨干预CUEDC2蛋白的表达对肾脏生化功能及肾间质纤维化的影响;我们得到以下结果:1.CUEDC2主要表达于肾小管细胞胞浆中,在糖尿病肾病肾脏组织中的表达特异性下调;2.在活体糖尿病肾病小鼠体内,采用超声微泡联合穿膜肽转染过表达CUEDC2的表达,可以降低db/db小鼠的体重、血糖、总胆固醇和尿白蛋白的排泄,减轻肾间质纤维化。(二)CUEDC2在DN肾脏肾小管上皮细胞EMT中的作用及可能机制为了探究CUEDC2在DN肾脏肾小管上皮细胞EMT中的作用及可能机制,我们在体外培养肾小管上皮细胞(HK2),在离体细胞水平检测干预CUEDC2蛋白的表达对糖尿病肾病EMT的作用并探讨相关机制;我们得到以下结果:1.TGF-β1刺激条件下,在HK2中过表达CUEDC2,能下调P-Smad2和P-Smad3表达并且能下调间充质表型蛋白:Fibronectin和vimentin的表达,而上调E-cadherin的表达,相反干涉CUEDC2的表达,结果相反。充分表明过表达/抑制CUEDC2能抑制/促进TGF-β/Smads信号通路及TGF-β1诱导的HK2 EMT。2.CUEDC2与Smad7存在内源性及外源性结合,TGF-β1刺激可以加强这种相互作用。CUEDC2可能通过介导Smad7使TGF-β的I型受体(TβR I)去磷酸化失活,从而负性调控TGF-β1/Smads信号通路,发挥抑制糖尿病肾病肾小管上皮细胞EMT作用。
[Abstract]:In addition , TGF - 尾1 / Smads signaling pathway plays a key role in the development of renal interstitial fibrosis . 1 . In vivo , the expression of CUEDC2 in renal tubular epithelial cells of diabetic nephropathy was regulated by the expression of CUEDC2 in renal tubular epithelial cells of diabetic nephropathy .

【学位授予单位】：南方医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R587.2;R692.9

【参考文献】