游离脂肪酸对甲状腺细胞增殖的影响
本文选题:游离脂肪酸 + FRTL-5细胞 ; 参考:《福建医科大学》2015年硕士论文
【摘要】:目的:探讨游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)对大鼠甲状腺细胞(Fischer rat thyroid cell line-5,FRTL-5)增殖的影响。方法:1、分别用不同浓度FFA、同一时间和同一浓度FFA、不同时间干预大鼠FRTL-5细胞,MTT比色法检测大鼠FRTL-5细胞增殖的情况。2、用不同浓度FFA干预大鼠FRTL-5细胞48h,Western blotting检测Wnt/β-catenin信号通路中糖原合成酶激酶-3β(Glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)和β-连环蛋白(β-catenin)表达的变化。3、用不同浓度FFA、不同作用时间干预大鼠FRTL-5细胞,ELISA测三碘甲状腺原氨酸(Triiodothyronin,T3)、甲状腺素(Thyroxine,T4)水平。结果:1、MTT结果显示:大鼠FRTL-5细胞经不同浓度的FFA干预48h,与正常对照组相比,0.5、1.0mmol/LFFA组的细胞存活率略有降低(p0.05),1.5、2.0、2.5、3.0mmol/LFFA组的细胞存活率呈浓度依赖性降低(p0.05),2.5mmol/LFFA组对大鼠FRTL-5细胞增殖的抑制程度较1.5、2.0mmol/LFFA组明显(p0.05),而与3.0mmol/L FFA组相比,抑制效应无明显差别(p=0.71)。同时,大鼠FRTL-5细胞经2.5mmol/L FFA分别干预6、12、24、48h,与正常对照组相比,6、12h组的细胞存活率略有降低(p0.05),24、48h组的细胞存活率显著降低(p0.05),48h组对大鼠FRTL-5细胞增殖的抑制程度较24h组明显(p0.05)。2、Western blotting结果显示:大鼠FRTL-5细胞经不同浓度的FFA干预48h,与正常对照组相比,0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mmol/L FFA组GSK-3β的表达呈浓度依赖性升高(p0.05),而0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mmol/L FFA组β-catenin的表达呈浓度依赖性降低(p0.05)。3、ELISA结果显示:大鼠FRTL-5细胞经不同浓度FFA、不同时间干预,不同浓度FFA对T3、T4水平有影响(P0.05),不同时间对T3、T4水平也有影响(P0.05),浓度、时间两者之间有交互作用(P0.05),当2.5mmol/L FFA干预大鼠FRTL-5细胞24h及0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mmol/L FFA干预大鼠FRTL-5细胞48h时,T3的水平降到最低,同时,当2.5mmol/LFFA干预大鼠FRTL-5细胞48h时,T4的水平也降到最低。结论:高浓度的FFA可以明显抑制大鼠FRTL-5细胞的增殖,以及它可能是通过Wnt/β-catenin信号通路起作用。
[Abstract]:Aim: to investigate the effect of free fatty acido (FFA) on proliferation of Fischer rat thyroid cell line-5 (FRTL-5) in rat thyroid cells. Methods the proliferation of rat FRTL-5 cells was detected by different concentrations of FFAs, at the same time and at the same time, respectively. The proliferation of rat FRTL-5 cells was detected by MTT colorimetry. The cell proliferation of rat FRTL-5 cells was detected by different concentrations of FFA for 48 h. Western blotting was used to detect Wnt/ 尾 -catenin signal transduction. The changes of glycogen synthase kinase -3 尾 -Glycogen synthase kinase-3 尾 -GSK-3 尾 and 尾 -catenin (尾 -catenin) expression in rat FRTL-5 cells were measured by Elisa with different concentrations and different time of action. The levels of triiodothyronine triiodothyroninine T3 and Thyroxineine T4 were measured by Elisa. Results the cell viability of rat FRTL-5 cells treated with different concentrations of FFA for 48h was slightly lower than that of the normal control group. The cell survival rate was decreased in a concentration-dependent manner. The proliferation of rat FRTL-5 cells was decreased in a dose-dependent manner. Compared with 3.0mmol/L FFA group, the inhibition degree of LFA was significantly higher than that of 1.5 mmol / L LFFA group (P < 0.05). There was no significant difference in inhibitory effect between two groups. At the same time, The survival rate of rat FRTL-5 cells treated with 2.5mmol/L FFA for 48 h was slightly lower than that of control group. The cell survival rate of the control group was significantly lower than that of the control group (p 0.05 + 24 h). The inhibition of FRTL-5 cell proliferation was significantly lower in the control group than that in the control group (p0.05.2Western blotting). The results showed that the expression of GSK-3 尾 in rat FRTL-5 cells increased in a concentration-dependent manner in a dose-dependent manner with different concentrations of FFA, and the expression of 尾 -catenin was decreased in a concentration-dependent manner in rat FRTL-5 cells in a dose-dependent manner. The results showed that the expression of 尾 -catenin in rat FRTL-5 cells decreased in a concentration-dependent manner compared with the control group. The results showed that the expression of 尾 -catenin in rat FRTL-5 cells was decreased in a concentration-dependent manner. The results showed that the expression of 尾 -catenin was decreased in a concentration-dependent manner in rat FRTL-5 cells. The same concentration of FFA, different time intervention, Different concentrations of FFA had an effect on the level of T3, T4 and T3 T4, and the concentration and time of T3 T4 also affected P0. 05. The level of T 3 in rat FRTL-5 cells decreased to the lowest when 2.5mmol/L FFA interfered with FRTL-5 cells for 24 h and 0. 51.0 mg / L FFA for 48 h. When 2.5mmol/LFFA interfered with FRTL-5 cells for 48 h, the level of T4 decreased to the lowest. Conclusion: high concentration of FFA can significantly inhibit the proliferation of rat FRTL-5 cells, and it may play a role through the Wnt/ 尾 -catenin signaling pathway.
【学位授予单位】:福建医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R581
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,本文编号:1842234
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