iNKT细胞在类风湿性关节炎中的频率及功能变化研究

发布时间：2018-05-12 20:16

本文选题：类风湿关节炎 + 流式细胞技术　；参考：《河北医科大学》2015年硕士论文

【摘要】：目的:类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是以全身关节部位的慢性炎症和骨质破坏为主要病理特征的自身免疫性疾病,RA发病机制复杂,多种免疫细胞参了RA的发病过程。目前认为:Th1/Th2细胞功能失衡,Th1和Th17细胞因子大量分泌导致的过度炎症可能是RA发病的中心环节。RA病率达0.4-1%,致残率超过脑血管疾病,目前尚缺乏特效的RA药物和治疗手段。近年发现恒定自然杀伤T细胞(invariant nature killer T,i NKT)在自身免疫性疾病中有重要作用,并且与RA发病密切相关。通过观察RA患者外周血中i NKT细胞频率及功能的动态变化、分析i NKT频率与IFN-γ/IL-4比值的相关性,揭示i NKT在RA中的特殊功效和作用环节,进一步明确i NKT细胞在RA发病中的意义,是确定RA治疗新靶标的重要基础。方法:收集70例RA患者(并对其中30例患者在缓解期连续跟踪)和40例健康人外周静脉抗凝血并分离单个核细胞(peripheral blood mono-nuclear,PBMC),采用流式细胞技术(Fluorescence-activated cell sorting,FACS)分析样本中i NKT细胞频率;再对PBMC体外培养,FACS动态检测i NKT细胞增殖频率;MILLIPLEX MAP Human Cytokine/Chemokine kit检测相应血清及PBMC培养上清中IFN-γ/IL-4的水平;RT-PCR检测i NKT细胞中IFN-γm RNA与IL-4 m RNA表达水平。结果:与健康对照组相比,RA患者外周血i NKT细胞频率显著降低(P0.05),治疗后缓解期患者i NKT细胞频率有所恢复,与活动期RA患者比较差异显著(P0.05),与健康对照组比较无显著性差异(P0.05);与健康对照组相比,活动期RA患者血清及PBMC培养上清中IFN-γ/IL-4比值升高,差异显著(P0.05)。缓解期RA患者血清中IFN-γ/IL-4比值下降,与活动期比较差异显著(P0.05),与健康对照组比较无显著性差异(P0.05);与健康对照组相比,RA患者i NKT细胞增殖频率显著降低(P0.05),增殖延迟,缓解期患者i NKT细胞增殖频率有所恢复,与活动期RA患者比较差异显著(P0.05),与健康对照组比较无显著性差异(P0.05);与健康对照组比较,活动期RA患者i NKT细胞中IFN-γm RNA表达升高,IL-4 m RNA表达降低(P0.05)。缓解期RA患者与健康对照组间IFN-γm RNA、IL-4 m RNA表达水平的差异不明显(P0.05);RA患者外周血中i NKT细胞频率与IFN-γ/IL-4比值呈负相关(P0.05)。结论:RA患者存在i NKT细胞频率低下与功能缺陷。i NKT细胞参与RA发病过程,且与病情活动性密切相关。
[Abstract]:Objective : To investigate the relationship between the frequency of i NKT cells and the levels of IFN - 纬 / IL - 4 in peripheral blood mononuclear cells ( PBMC ) of patients with rheumatoid arthritis ( RA ) . Compared with healthy control group , the frequency of IFN - 纬 mRNA and IL - 4 mRNA in patients with RA were significantly lower than those in healthy control group ( P0.05 ) .

【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R593.22

【参考文献】