GLP-1对STZ诱导的糖尿病小鼠胰岛β细胞自噬的影响及其机制

发布时间：2018-07-12 12:14

本文选题：糖尿病 + GLP-1　；参考：《河南科技大学》2017年硕士论文

【摘要】：目的:本研究拟探讨胰高血糖素样肽-1(GLP-1)是否通过调节自噬水平影响高脂饮食联合小剂量链脲佐菌素(STZ)诱导的2型糖尿病小鼠的胰岛β细胞的功能。方法:取6周龄雄性c57BL/6J小鼠为实验研究对象,按照饲养方式及干预时间分为2大实验组:1.高脂组:A组:LFD(低脂饮食+生理盐水皮下注射);B组:高生(高脂饮食+生理盐水皮下注射);C组:GLP-1处理2周(高脂饮食+GLP-1皮下注射2周);D组:GLP-1处理6周(高脂饮食+GLP-1皮下注射6周);2.糖尿病组:A组:LFD(低脂饮食+生理盐水);B组:DM+生理(高脂饮食+STZ+生理盐水);C组:DM+GLP-1处理2周(高脂饮食+STZ+GLP-1干预2周);D组:DM+GLP-1处理6周(高脂饮食+STZ+GLP-1干预6周)。糖尿病造模方法为:高脂干预8周+STZ 5天,一周后血糖大于16.7 mmol/L为模型成功,进行后续实验。分别于GLP-1干预2周及6周时给予腹腔注射行葡萄糖耐量试验和胰岛素耐量试验,并计算其曲线下面积。干预结束后处死小鼠,留取肝脏、胰腺等组织标本;HE染色观察其形态学改变;PCNA免疫组化染色观察其增值情况;胰岛素、胰高血糖素、LC3、P62免疫荧光染色了解其胰岛分泌及自噬情况。结果:1.高脂组结果:(1)脂饲养8周后,高脂组(B组)小鼠体重显著大于低脂饲养组(A组)小鼠体重(P0.05);给予GLP-1干预6周后,小鼠体重显著降低(P0.05)。(2)IPGTT及ITT实验结果:GLP-1干预前,高脂组(B组)与低脂对照组(A组)相比,糖负荷后30 min血糖高于A组(P0.05);给予GLP-1干预后,GLP-1干预组(D组)糖负荷后15 min、30 min、60 min血糖显著低于高脂组(B组)(P0.05)。ITT:GLP-1干预前B组30 min血糖高于A组血糖(P0.05),四组ITT其他各时间点血糖无差异(P0.05);GLP-1干预后,D组各时间点血糖值均低于B组,但差异无统计学意义(P0.05)。(3)HE染色显示:与A组比较,B组肝脏有脂肪变性,GLP-1干预后可减轻;与A组比较B组胰岛内偶见脂滴空泡,胰岛细胞之间出现一定间隙,可见散在单个炎细胞浸润,C组与B组无明显差异,D组脂肪变性有所减轻。(4)胰岛β细胞增值情况:B组与A组比较PCNA表达增加,B组、C组之间无差异,D组PCNA表达较B组进一步增加(P0.05)。(5)胰岛LC3、P62表达:B组LC3表达较A组增高,给予GLP-1后,C、D组LC3表达进一步增高;B组与A组比P62表达降低,给予GLP-1后,C、D组P62表达进一步降低。2.糖尿病组结果:(1)糖尿病造模:采用高脂喂养8周,联合小剂量STZ腹腔注射,STZ:50mg/Kg/d,连续5天注射(成模率:100%,死亡率:0%)。(2)IPGTT及ITT实验结果:IPGTT:GLP-1干预后,C组空腹及糖负荷后60 min时血糖低于B组,差异有统计学意义(P0.05);ITT:GLP-1干预后,C组30 min、60 min、120 min时血糖低于B组,差异有统计学意(P0.05)。C组与D组血糖无明显差异。(3)HE染色显示:与A组比,B组肝细胞脂肪变性、坏死、炎细胞浸润,C、D组与B组比较有所减轻,D组脂肪变性及炎细胞浸润较C组减轻;B、C、D组胰岛形态改变,细胞坏死、炎细胞浸润,以B组最为严重。(4)胰岛β细胞增值情况:A、D组PCNA表达略微高于B、C组,差异无统计学意义(P0.05)。(5)胰岛LC3、P62表达:B组LC3与A组相比有所降低(P0.05),给予GLP-1后,D与B组相比LC3增高(P0.05);B组与A组相比P62表达水平增高(P0.05);给予GLP-1后,D与B组相比P62有所降低(P0.05)。结论:1.在高脂组,高脂饮食可使小鼠胰腺及肝脏出现脂肪变性;且高脂饮食后,促进胰岛细胞增殖并激活自噬,GLP-1干预后,胰岛细胞增殖提高,且自噬被进一步激活;2.在糖尿病组,高糖条件下胰岛细胞自噬被抑制,而后给予GLP-1干预自噬被激活。
[Abstract]:Objective : To study the function of glucagon - like peptide - 1 ( GLP - 1 ) in rats with type 2 diabetic mice induced by high - fat diet plus low - fat diet plus low - fat diet plus low - fat diet plus normal saline . Compared with group A , there was no significant difference between group B and group B ( P0.05 ) . ( 5 ) The expression of LC3 and P62 in group B was higher than that in group A . After administration of GLP - 1 , the expression of LC3 in group C and D was further increased . ( 3 ) Compared with group A , the expressions of fatty degeneration , necrosis , inflammatory cell infiltration , C and D in group B were significantly higher than those in group B and group B ( P0.05 ) .
【学位授予单位】：河南科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R587.1

【参考文献】