二甲双胍对人网膜脂肪细胞中v-SNAREs家族表达的影响

发布时间：2018-10-29 23:13

【摘要】：目的:观察二甲双胍对人成熟脂肪细胞中囊泡相关可溶性N-乙酰基亚胺敏感因子附着蛋白受体(vescical-souble N-ethymaleimide sensitive factor attachment proteins receptor,v-SNAREs)家族成员VAMP2、3、4、5、7、8表达的影响。方法:1.选择择期开腹手术病人,术中无菌条件切取腹部大网膜脂肪组织,采用胶原酶消化法分离前脂肪细胞。于37℃、5%CO2条件下DMEM/F12(1:1)培养基中培养,并诱导其分化为成熟脂肪细胞,用油红O染色鉴定证实。2.予不同浓度二甲双胍(0m M,1m M,10m M)干预成熟脂肪细胞24h后,运用实时荧光相对定量PCR技术检测细胞VAMP2、3、4、5、7、8m RNA的表达水平。3.使用SPSS19.0软件进行统计学分析,实验数据用均值±标准差(x±s)表示,样本间均数比较采用配对样本T检验,以P0.05为差异有统计学意义结果:1.成功进行了人前脂肪细胞的原代培养,并诱导其分化为成熟脂肪细胞。2.RT-PCR结果:与对照组(0m M二甲双胍)相比,1m M二甲双胍上调脂肪细胞VAMP4、5、8水平(分别P0.05,P0.05,P0.05,),下调VAMP3、7水平(分别P0.05,P0.01),VAMP2表达的差异无统计学意义;与对照组相比10m M二甲双胍上调脂肪细胞VAMP4、5、8水平(分别P0.01,P0.01,P0.01),下调VAMP7水平(P0.01),VAMP2、3表达差异无统计学意义;10m M二甲双胍干预组与1m M组比较,VAMP3、4、5、8表达水平升高(P0.05,P0.05,P0.05,P0.01),VAMP2、7表达差异无统计学意义。结论:1.使用胶原酶消化法分离并原代培养了人大网膜前脂肪细胞,并成功的诱导分化为成熟脂肪细胞,验证了本实验室建立的前脂肪细胞培养方法的可行性和实用性。2.二甲双胍可上调VAMP4、5、8的表达,可下调VAMP3、7的表达,且具有一定的剂量依赖效应,对VAMP2的表达无影响,显示二甲双胍可能通过对v-SNAREs家族表达的调节而参与对脂肪细胞GLUT4转运的调节。本实验加深了对二甲双胍改善胰岛素抵抗机制的理解,为进一步研究二甲双胍的降糖机制提供了线索。
[Abstract]:Aim: to investigate the effect of metformin on the expression of VAMP2,3,4,5,7,8 of vesicular associated soluble N-acetylimide receptor (vescical-souble N-ethymaleimide sensitive factor attachment proteins receptor,v-SNAREs) family in human mature adipocytes. Methods: 1. The abdominal omentum adipose tissue was removed under aseptic condition and the preadipocytes were separated by collagenase digestion. It was cultured in DMEM/F12 (1:1) medium at 37 鈩，

本文编号：2299121