乙酰辅酶A羧化酶B基因多态性与2型糖尿病及糖尿病肾脏疾病的相关性研究

发布时间：2018-11-14 12:06

【摘要】：第一部分：乙酰辅酶A羧化酶B基因rs2268388多态性检测的实验条件研究目的：建立一种快速、准确、特异的定量检测ACACB基因rs2268388多态性的方法。方法：针对ACACB基因序列设计引物和Taqman探针,探索实时荧光定量PCR技术检测ACACB基因rs2268388多态性的最佳条件,设立不同浓度,并检测其灵敏度和特异性。结果：PCR反应预变性时间为10min,退火、延伸时间为1min时扩增产物效果理想。Taqman实时荧光定量PCR探针及引物浓度0.5ul (0.2uM), TaqMan Genotyping Master Mix 5ul, dH2O 2.5ul总体系为10ul时扩增产物效果理想并节约了实验费用。检测特异性良好。结论：优化Taqman探针法的实验条件能够灵敏、特异、稳定地对ACACB基因rs2268388多态性进行定量检测,并有效节约了实验成本。第二部分：乙酰辅酶A羧化酶B基因多态性与2型糖尿病的相关性研究目的：探讨乙酰辅酶A羧化酶B (ACACB)基因rs2268388及rs2268393多态性与中国昆明地区汉族人群2型糖尿病(T2DM)的相关性。方法：分别运用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术及Taqman探针技术,在昆明地区汉族人群中对184例2型糖尿病(T2DM)患者和70例健康对照组(NC)的ACACB基因rs2268388及rs2268393多态性进行检测,并比较分析各组间基因型、等位基因频率、相关临床和生化指标。结果：(1)T2DM组和NC组ACACB基因rs2268393各基因型和等位基因频率无统计学差异(x2=4.810,p=0.09, x2=1.29,p=0.24); (2) T2DM组ACACB基因rs2268388 C/C基因型和C等位基因频率高于NC组,有统计学差异(χ2=10.469,p=0.005,χ2=4.71,p=0.007)；(3)二分类Logistic回归分析表明：ACACB基因rs2268388 C/C基因型及高甘油三酯(TG)是T2DM发生的危险因素。结论：在昆明地区汉族人群中,ACACB基因rs2268388 C/C基因型可能与T2DM发生相关。第三部分：乙酰辅酶A羧化酶B基因多态性与糖尿病肾脏疾病的相关性研究目的：探讨乙酰辅酶A羧化酶B(ACACB)基因rs2268388多态性与我国昆明地区汉族人群糖尿病肾脏疾病(DKD)的相关性。方法：选取T2DM患者248例,根据两次UAlb/Cr或24 h UAlb结果分为DKDo组85例、DKD1组99例及DKD2组64例,另选取健康对照(NC)组70名。采用Taqman PCR(Three-star)法对各组ACACB基因rs2268388多态性进行检测,并比较分析各组基因型、等位基因频率、风险因素及相关临床和生化指标。结果：(1)DKD各组C/T基因型频率均低于NC组(Z=2.391,P=0.017)；DKD1组和DKD2组ACACB基因rs2268388T/T基因型频率高于DKD0组(Z=-2.522,P=0.012；Z=-4.981,P=0.001)；DKD1组和DKD2组T/T基因型频率及各组等位基因频率比较,差异无统计学意义(P0.05).(2)Logistic回归分析表明,糖尿病病程、rs2268388T/T基因型、高TG、高HbA1c及高尿酸血症(HUA)是DKD发生的危险因素。结论：在昆明地区汉族人群中,ACACB基因rs2268388 T/T基因型可能与DKD发生相关。
[Abstract]:Part I: experimental conditions for detecting rs2268388 Polymorphism of Acetyl CoA carboxylase B Gene objective: to establish a rapid, accurate and specific method for quantitative detection of ACACB gene rs2268388 polymorphism. Methods: primers and Taqman probes were designed for the sequence of ACACB gene. The optimal conditions for detecting rs2268388 polymorphism of ACACB gene by real-time fluorescence quantitative PCR were explored. Different concentrations were set up and their sensitivity and specificity were detected. Results: the pre-denaturation time of PCR reaction was 10 min, the annealing time and the extension time were 1min. The Taqman real-time fluorescence quantitative PCR probe and 0.5ul (0.2uM), TaqMan Genotyping Master Mix 5 ull) concentration were obtained. When the total dH2O 2.5ul system was 10ul, the effect of amplification product was ideal and the cost of experiment was saved. The specificity of detection was good. Conclusion: the optimized Taqman probe method can be used to detect the rs2268388 polymorphism of ACACB gene in a sensitive, specific and stable manner, and the cost of the experiment can be effectively saved. Part II: Association between acetyl coA carboxylase B gene polymorphism and type 2 diabetes objective: to explore the relationship between rs2268388 and rs2268393 polymorphism of acetyl coA carboxylase B (ACACB) gene and type 2 glucose in Han nationality population in Kunming, China. Correlation of urinary disease (T2DM). Methods: polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) and Taqman probe technique were used, respectively. The polymorphisms of ACACB gene rs2268388 and rs2268393 were detected in 184 patients with type 2 diabetes mellitus (T2DM) and 70 healthy controls in Kunming Han population, and the genotypes and allelic frequencies were compared and analyzed. Related clinical and biochemical indicators. Results: (1) there was no significant difference in the frequency of rs2268393 genotypes and alleles of ACACB gene between T2DM group and NC group (x24.810p0.09, x2o1.29hp 0.24). (2) the frequency of rs2268388 C / C genotype and C allele of ACACB gene in T2DM group was significantly higher than that in NC group (蠂 2 + 10.469% P 0.005, 蠂 2 + 4.71% P 0.007). (3) Two-classification Logistic regression analysis showed that ACACB gene rs2268388 C / C genotype and high triglyceride (TG) were risk factors of T2DM. Conclusion: rs2268388 C / C genotype of ACACB gene may be associated with T2DM in Kunming Han population. Part three: Association between acetyl CoA carboxylase B gene polymorphism and diabetic kidney disease objective: to explore the relationship between rs2268388 polymorphism of acetyl coA carboxylase B (ACACB) gene and diabetes mellitus in Han nationality in Kunming, China. Correlation of (DKD) in renal disease. Methods: 248 patients with T2DM were divided into DKDo group (n = 85), DKD1 group (n = 99) and DKD2 group (n = 64) according to the results of twice UAlb/Cr or 24 h UAlb. The rs2268388 polymorphism of ACACB gene in each group was detected by Taqman PCR (Three-star method, and the genotype, allele frequency, risk factors and related clinical and biochemical indexes were compared and analyzed. Results: (1) the frequency of C / T genotype in DKD group was lower than that in NC group (Z 2.391P0. 017), and the rs2268388T/T genotype frequency of ACACB gene in DKD1 group and DKD2 group was higher than that in DKD0 group. There was no significant difference in T / T genotype frequency and allele frequency between DKD1 group and DKD2 group (P0.05). (2) Logistic regression analysis showed that the course of diabetes, rs2268388T/T genotype and high TG, were significant. High HbA1c and hyperuricemia (HUA) are risk factors of DKD. Conclusion: rs2268388 T / T genotype of ACACB gene may be associated with DKD in Kunming Han population.
【学位授予单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R587.1

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 曹建成;肾脏疾病抗心磷脂抗体检测及其临床意义[J];宁波医学;2000年04期

2 李淑葵;肾脏疾病的实验室检查(一)[J];中国临床医生;2000年02期

3 李秋荣,周建萍,郜青,赵黎明,庞保柱,张玉洁;肾脏疾病的食物交换份[J];现代康复;2001年15期

4 胡亦新;血管紧张素受体拮抗剂与血管紧张素转化酶抑、制剂在肾脏疾病治疗中的异同[J];国外医学(内科学分册);2002年11期

5 吴玉梅;血管内皮生长因子在肾脏疾病中的研究进展[J];国外医学.泌尿系统分册;2002年03期

6 殷培;血管内皮生长因子在肾脏疾病中的表达及意义[J];国外医学.泌尿系统分册;2002年06期

7 孙艳,胡望平;尿γ-谷氨酰转移酶在炎症或非炎症性肾脏疾病中的应用价值[J];现代检验医学杂志;2003年06期

8 丁洁;基因检测在遗传性肾脏疾病诊治和研究中的作用[J];中华肾脏病杂志;2005年11期

9 郑君芙;邢淑丽;宋瑞芬;韩华英;;降钙素基因相关肽与肾脏疾病[J];辽宁中医学院学报;2006年03期

10 马红;;肾脏疾病的自我调理与防治[J];中国社区医师(综合版);2007年19期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 孙晓丽;高嵩;;全段甲状旁腺激素测定在肾脏疾病中的应用研究[A];中华医学会肾脏病学分会2006年学术年会论文集[C];2006年

2 柯昌兴;王剑松;王家平;李迎春;袁曙光;闫东;童玉云;朱全胜;;选择性动脉造影栓塞术在肾脏疾病中的临床应用[A];第十六届全国泌尿外科学术会议论文集[C];2009年

3 邢娜;;非浓缩尿蛋白电泳在肾脏疾病中的应用[A];第五次全国中青年检验医学学术会议论文汇编[C];2006年

4 刘章锁;;进展性肾脏疾病中趋化因子的作用[A];中华医学会肾脏病学分会2006年学术年会专题讲座[C];2006年

5 陈楠;;遗传性肾脏疾病的筛查[A];2008年浙江省肾脏病学术年会论文汇编[C];2008年

6 刘志红;;肾脏疾病的分子诊断[A];中华医学会第七次全国中青年检验医学学术会议论文汇编[C];2012年

7 邢昌赢;;炎症因子在肾脏疾病中的意义[A];中华医学会肾脏病学分会2010学术年会专题讲座汇编[C];2010年

8 查艳;;糖皮质激素治疗肾脏疾病专家共识的解读[A];贵州省中西医结合学会肾病专业委员会成立暨中西医结合诊治肾脏病学习班论文汇编[C];2011年

9 王伟铭;陈楠;王朝晖;张文;任红;陈晓农;徐耀文;;肾脏疾病中的脂质异常及其危险因素分析[A];“中华医学会肾脏病学分会2004年年会”暨“第二届全国中青年肾脏病学术会议”论文汇编[C];2004年

10 江黎明;陈孝文;;白细胞介素—13与肾脏疾病[A];第六届全国中西医结合肾脏病学术会议论文汇编[C];2000年

中国重要报纸全文数据库 前10条

1 郝长生 施涛;核心区域市场固定 热点投放月度集中[N];中国医药报;2006年

2 ;中老年人谨防肾脏疾病[N];医药养生保健报;2007年

3 卫生部中日友好医院肾病中心主任医师 李文歌;中老年人要重视肾脏疾病的防治[N];中国老年报;2009年

4 孙国根;我国科学家发现肾脏疾病治疗新靶点[N];中国医药报;2010年

5 西安交通大学医学院第一附属医院 尹爱萍　(主任医师);肾脏疾病的信号[N];家庭医生报;2009年

6 张群 吴倪娜 蒋廷玉;专家为预防肾脏疾病支招[N];新华日报;2006年

7 吴一福;我国肾脏疾病发病呈低龄化趋势[N];中国医药报;2006年

8 邱英;尿起泡沫警惕肾脏疾病[N];上海中医药报;2008年

9 吴红梅;追击肾脏病致病元凶[N];新华日报;2011年

10 尹爱平;肾脏疾病的信号[N];健康报;2002年

中国博士学位论文全文数据库 前1条

1 王冬燕;建国以来中西医结合治疗肾脏病研究[D];山东中医药大学;2009年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 杨慧;补肾温阳化瘀法治疗早期2型糖尿病肾脏疾病及对CD68、MCP-1mRNA表达的影响[D];安徽中医药大学;2015年

2 董自强;25（OH）D水平与肾脏疾病的相关性研究[D];昆明医科大学;2015年

3 唐俊婷;乙酰辅酶A羧化酶B基因多态性与2型糖尿病及糖尿病肾脏疾病的相关性研究[D];昆明医科大学;2015年

4 张芝平;原发性肾病综合征与糖尿病肾脏疾病血脂异常特点的分析[D];吉林大学;2011年

5 李佳;辽宁中医肾内科从肺防治肾脏疾病经验总结[D];辽宁中医药大学;2011年

6 杜罕;一氧化氮对梗阻性肾脏疾病非血流动力学保护作用机制的研究[D];华中科技大学;2008年

7 施素华;中国36379例肾小球疾病病理分型及流行病学分析[D];福建医科大学;2012年

8 王进雪;HIF-1α、CTGF在肾脏疾病中表达关系的研究[D];青岛大学;2007年

9 马丽;中西医结合治疗糖尿病肾脏疾病的系统评价[D];成都中医药大学;2008年

10 郭呈林;苁归益肾胶囊对2型糖尿病肾脏疾病大鼠OPN、TGF-β1的影响及对2型糖尿病早期肾脏疾病患者临床疗效的观察[D];安徽中医药大学;2014年

，

本文编号：2331111