高糖对大鼠心肌成纤维细胞尾加压素Ⅱ及其受体蛋白表达的影响

发布时间：2020-01-17 07:30

【摘要】：目的研究高糖对大鼠心肌成纤维细胞尾加压素II(UII)及其受体(UT)表达的影响,为进一步研究UII系统在糖尿病心肌病中的作用提供实验基础。方法在无菌条件下取新生1-3天龄Wistar大鼠的心肌成纤维细胞,体外培养并传代。待第三代心肌成纤维细胞生长密度为70%时,随机分为正常对照组、高渗对照组、高糖处理组。三组细胞分别用含5.5mmol/L葡萄糖、5.5mmol/L葡萄糖+19.5mmol/L甘露醇、25.0mmol/L葡萄糖的培养基孵育48h,然后应用免疫荧光法、免疫印迹法检测各组细胞中UII及UT蛋白量的表达。结果通过免疫荧光法和Western blot法可见高糖刺激可使心肌成纤维细胞中UII及其受体UT表达增加,高糖处理组UII和UT表达量明显高于正常对照组和高渗对照组(F=15.08~192.2,q=3.751~30.00,P0.05)。结论大鼠心肌成纤维细胞中存在UII及UT表达,高糖刺激心肌成纤维细胞可使UII及UT表达增强,提示UII系统可能参与了糖尿病时心肌纤维化过程,为进一步的研究提供实验基础。
【图文】：

心肌成纤维细胞,荧光显微镜

×200）a 左侧图片为普通光镜下心肌成纤维细胞图b 右侧图片为 a 相应的波形蛋白免疫荧光图2.2 免疫荧光实验结果通过免疫荧光检测可见，正常对照组中，心肌成纤维细胞呈长梭型或多角形，细胞密度较稀疏，胞体相对较狭长，细胞核体积小，多单核，胞质少，细胞核周围可见绿色荧光，胞质亮度呈弱阳性，隐约可见成纤维细胞轮廓。高渗对照组与高糖处理组中心肌成纤维细胞较正常状态胞体较圆，细胞核体积稍增大。其中，高糖处理组心肌成纤维细胞的形态发生明显改变，细胞多呈不规则多边型，细胞密度较正常对照组、高渗对照组的细胞密度明显增高，细胞体积多变小，细胞内多有 1-2 个细胞核。与正常对照组、高渗对照组比较，高糖处理组成纤维细胞细胞核周围绿色荧光呈明显高亮状态。高糖处理组心肌成纤维细胞在培养 48h 后其 UII、UT 荧光强度均有所增加（图 2），其 UII、UT 灰度值与前两组相比有显著差异（F=192.2、128.2，q=23.96～30.00，p<0.05）（见表 1）。

心肌成纤维细胞,荧光显微镜

×200）a 左侧图片为普通光镜下心肌成纤维细胞图b 右侧图片为 a 相应的波形蛋白免疫荧光图2.2 免疫荧光实验结果通过免疫荧光检测可见，正常对照组中，心肌成纤维细胞呈长梭型或多角形，，细胞密度较稀疏，胞体相对较狭长，细胞核体积小，多单核，胞质少，细胞核周围可见绿色荧光，胞质亮度呈弱阳性，隐约可见成纤维细胞轮廓。高渗对照组与高糖处理组中心肌成纤维细胞较正常状态胞体较圆，细胞核体积稍增大。其中，高糖处理组心肌成纤维细胞的形态发生明显改变，细胞多呈不规则多边型，细胞密度较正常对照组、高渗对照组的细胞密度明显增高，细胞体积多变小，细胞内多有 1-2 个细胞核。与正常对照组、高渗对照组比较，高糖处理组成纤维细胞细胞核周围绿色荧光呈明显高亮状态。高糖处理组心肌成纤维细胞在培养 48h 后其 UII、UT 荧光强度均有所增加（图 2），其 UII、UT 灰度值与前两组相比有显著差异（F=192.2、128.2，q=23.96～30.00，p<0.05）（见表 1）。
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R587.2

【参考文献】