γ射线诱导的神经细胞损伤对免疫细胞的影响效应研究

发布时间：2020-03-05 11:28

【摘要】：电离辐射会对生物体的遗传物质造成损伤,引发细胞坏死和凋亡。会对机体损伤严重的电离辐射,常出现于医院用于治疗肿瘤病人的放疗以及太空上的宇宙射线。人的大脑作为重要器官之一,结构复杂且功能强大,当脑部受到辐射损伤,往往会伴随这一系列炎症反应。因为生物体过于复杂,所以在本文中使用细胞系建立了神经免疫相互作用的细胞模型,探索受到γ射线辐射损伤的神经细胞会对免疫细胞产生的效应。本文使用SH-SY5Y细胞(神经细胞的体外模型)、U87 MG(胶质细胞的体外模型)、THP-1/U937(单核巨噬细胞的体外模型)和Jurkat(T细胞的体外模型)这五种细胞系构建体外神经免疫作用模型。共培养时,神经细胞SH-SY5Y和U87 MG细胞是混合培养的,在辐射后换液再培养24小时、48小时、72小时,并将收集的神经细胞的培养基再次用于培养免疫细胞,24小时后,收集免疫细胞,并对免疫细胞进行检测实验。首先,进行辐射剂量和培养时间的确定,然后在选取了10Gy培养72小时作为THP-1后续研究的条件,选取了7Gy培养24小时作为研究Jurkat研究和实验条件。THP-1细胞进行了Brd U增殖实验、免疫荧光染色、活化细胞表面糖蛋白流式检测以及趋化实验。对Jurkat细胞进行了细胞计数、周期流式检测和凋亡流式检测。从实验中可以得知,受到辐射损伤的共培养细胞会在10、15Gy时会对THP-1产生抑制增殖促活化作用,并会对THP-1细胞产生趋化作用。受到辐射损伤的共培养细胞会抑制Jurkat的增殖。因此,我们推断当神经系统受到辐射后损伤时,会活化单核巨噬细胞并产生趋化因子募集更多免疫细胞,但此时,适应性免疫中T细胞的增殖是被抑制的。
【图文】：

北京理工大学硕士学位论文.2 不同辐射剂量损伤的神经胶质 U87 MG 单独培养的培养基对免疫细胞的作用为了观测单独培养的神经胶质细胞 U87 MG 在受到辐射损伤后会对免疫细生何种作用，将 U87 MG 按 4.5%s105 接种量种于 T25 的培养瓶中，培养了48、72 小时后收集培养上清，将培养上清继续用于培养免疫细胞 24 小时使用 MTS 法来检测细胞的存活率。（1）不同辐射剂量的神经胶质单独培养的培养基对 THP-1 的作用受到不同程度辐射损伤的 U87 MG 细胞的培养基对 THP-1 细胞的作用主要为，在低剂量 5Gy 时无反应，在高剂量 7、10、15Gy 对 THP-1 产生促活作用。因为 U87 MG 细胞的半致死剂量为 10Gy，所以 5Gy 的辐射剂量可于 U87 MG 来说，只是造成轻微的损伤，所以基本没有效应。从 7Gy 开始 72 小时的 U87 MG 细胞的培养基对 THP-1 产生促活化作用。

北京理工大学硕士学位论文.2 不同辐射剂量损伤的神经胶质 U87 MG 单独培养的培养基对免疫细胞的作用为了观测单独培养的神经胶质细胞 U87 MG 在受到辐射损伤后会对免疫细生何种作用，将 U87 MG 按 4.5%s105 接种量种于 T25 的培养瓶中，培养了48、72 小时后收集培养上清，将培养上清继续用于培养免疫细胞 24 小时使用 MTS 法来检测细胞的存活率。（1）不同辐射剂量的神经胶质单独培养的培养基对 THP-1 的作用受到不同程度辐射损伤的 U87 MG 细胞的培养基对 THP-1 细胞的作用主要为，在低剂量 5Gy 时无反应，，在高剂量 7、10、15Gy 对 THP-1 产生促活作用。因为 U87 MG 细胞的半致死剂量为 10Gy，所以 5Gy 的辐射剂量可于 U87 MG 来说，只是造成轻微的损伤，所以基本没有效应。从 7Gy 开始 72 小时的 U87 MG 细胞的培养基对 THP-1 产生促活化作用。
【学位授予单位】：北京理工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R594.8

【参考文献】

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1 吴少雄,邓美玲,李巧巧,赵充,卢泰祥,李凤岩,崔念基;脑胶质瘤放射治疗的预后因素分析[J];癌症;2004年S1期

本文编号：2584991