高原低氧致大鼠胃黏膜组织细胞Beclin-1、LC3-Ⅱ水平变化的研究

发布时间：2020-03-22 17:32

【摘要】：目的:通过检测自噬特异性蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ的蛋白及m RNA表达水平,观察高原低氧环境下大鼠胃黏膜组织细胞自噬的变化,探讨其对胃黏膜损伤的影响。方法:以60只6-8周龄的成年雄性Wistar大鼠为研究对象,随机分成实验组(n=50,低压氧舱,海拔5000m)和对照组(n=10,西宁,海拔2260m),实验组根据进入低压氧舱不同时间点随机分为1d、7d、14d、21d、28d五组,每组各10只。取大鼠胃黏膜组织,HE染色观察组织大体形态改变及组织细胞凋亡情况;免疫组织化学染色法检测自噬特异性蛋白Beclin-1、LC3-Ⅱ的蛋白表达水平;提取大鼠胃黏膜组织细胞总RNA,采用Real-time PCR法检测Beclin-1、LC3-Ⅱ的m RNA表达水平;统计分析相关结果。结果:(1)胃黏膜组织HE染色结果:随着实验组大鼠进入高原低氧环境的时间延长,胃黏膜损伤程度逐渐加重,主要病理表现为胃黏膜腺体结构破坏,大量炎性细胞浸润,局部甚至有出血、凋亡等;(2)免疫组化结果:与对照组相比,实验各组大鼠胃黏膜组织细胞Beclin-1、LC3-Ⅱ的蛋白表达水平均升高,差异具有统计学意义(均P0.05),且随着暴露于高原低氧环境的时间延长,Beclin-1、LC3-Ⅱ的蛋白表达水平逐渐升高(均P0.05);(3)Real-time PCR结果:胃黏膜组织细胞Beclin-1、LC3-Ⅱ的m RNA表达水平其变化趋势与蛋白表达水平基本一致,即每组实验大鼠表达水平均高于对照组,且随着低氧暴露时间延长,表达水平逐渐升高(均P0.05)。结论:(1)高原低氧可导致大鼠胃黏膜组织细胞损伤,且随着低氧作用时间延长程度逐渐加重;(2)高原低氧可诱导胃黏膜组织细胞自噬水平增加;(3)高原低氧可能通过升高细胞自噬水平导致胃黏膜组织细胞损伤。
【图文】：

免疫组化染色,步骤,图象系统,积分光密度

8图 2.1 免疫组化染色步骤图2.2.2.4 图像采集与分析利用显微镜拍照，， LeciaApplaction Stiue 图象系统采集分析样本相关部位。采用 Image-pro plus 6.0 软件分析免疫组织化学染色所得图像，使用 IOD（Integrated optical density，积分光密度）进行半定量分析。

大鼠胃,免疫组化法,细胞,高原低氧

3.2 各组大鼠胃黏膜组织细胞 Beciln-1、LC3-Ⅱ的蛋白表达水平免疫组化法检测不同组大鼠胃黏膜组织细胞 Beclin-1、LC3-Ⅱ的蛋白表达水平并运用 IOD（Integrated optical density，积分光密度）半定量分析。结果显示（表 3.1，图 3.2-3.4）：与对照组相比，低氧 1d、7d、14d、21d、28d 五组实验组大鼠胃黏膜组织细胞自噬相关蛋白 Beclin-1、LC3-Ⅱ的蛋白表达水平均升高，且随着进入高原低氧时间延长表达水平逐渐升高（均 P＜0.05）。综上，高原低氧可诱导胃黏膜组织细胞发生自噬，且随着高原低氧暴露时间延长自噬水平增加。
【学位授予单位】：青海大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R594.3

【参考文献】