共轭亚油酸改善肥胖糖尿病小鼠脂代谢的作用及其分子机制研究

发布时间：2020-03-25 03:16

【摘要】：一、研究背景非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是指除酒精和其他明确的损肝因素所致的肝细胞内脂肪过度沉积为主要特征的临床病理综合征,和2型糖尿病(T2DM)、胰岛素抵抗(IR)、肥胖、代谢综合征等密切相关,后期可能进展为肝硬化甚至是肝癌。非酒精性脂肪肝在全球发病率日渐增高而临床上缺乏有效治疗药物。共轭亚油酸(Conjugated linoleic acid,CLA)是指含有共轭双键的亚油酸同分异构体,其中c9,t11-CLA和t10,c12-CLA两种异构体是最主要的成分。研究证明CLA能发挥多种重要的生理功能,如减肥降脂、抗氧化、抗肿瘤、治疗糖尿病等,但其分子作用机制并不完全清楚。过氧化物酶体增殖物激活受体(Peroxisome pro liferator-activated receptors,PPARs)是配体激活的转录因子,其中PPARα和PPARγ两种亚型参与调节多种脂质代谢相关基因表达,从而在能量平衡和代谢功能中发挥重要的调节作用。二、研究目的分析共轭亚油酸对肥胖糖尿病合并脂肪肝小鼠的治疗作用,探讨共轭亚油酸通过PPARα、PPARγ、SREBP-1c等核转录因子通路调节CD36、ACC、FASN等脂质代谢相关基因表达的作用机制。三、研究方法动物实验:将c9,t11-cla和t10,c12-cla等量混合后喂给鼠龄18个月雄性肥胖糖尿病合并脂肪肝小鼠(db/db小鼠),测量小鼠体重、饮食摄入量、空腹血糖含量、甘油三酯、总胆固醇水平等。HE染色和油红染色检测肝脏病理学改变和脂肪酸含量。荧光定量PCR和western blot实验检测PPARα、PPARγ、CD36、CHREBP和SREBP-1c等基因表达水平。细胞实验:以空白组和亚油酸处理组为对照,分别用50uM c9,t11-cla和t10,c12-cla处理HepG2细胞,荧光定量PCR和western blot实验检测PPARα、PPARγ、CD36、ACC等基因表达;通过SiRNA转染敲低PPARy表达后检测CD36基因表达。四、研究结果(1)共轭亚油酸能减少db/db小鼠饮食量,有效减轻小鼠体重,降低血清甘油三酯和胆固醇水平。(2)共轭亚油酸能有效降低db/db小鼠空腹血糖,提高糖耐量。(3)肝脏病理学切片和油红染色结果表明共轭亚油酸能减少肝脏里脂滴累积,有效改善脂肪肝。(4)共轭亚油酸能增加PPARα蛋白表达;降低SREBP-1c蛋白表达;通过降低PPARy基因表达而降低CD36蛋白表达。(5)共轭亚油酸能增加ACC磷酸化水平,细胞内乙酰辅酶A浓度升高,抑制脂肪酸合成,增加脂肪酸氧化。五、研究结论两种共轭亚油酸同分异构体混合物能够明显改善db/db小鼠脂肪肝,降低空腹血糖,提高糖耐量,对肥胖、糖尿病合并脂肪肝动物模型产生综合性的治疗效果。其作用机制可能是通过激活PPARα转录因子,激活其调控脂质代谢通路;抑制PPARy基因表达而下调CD36蛋白表达,减少细胞对脂肪酸吸收;降低SREBP-1c蛋白表达而抑制FANS基因表达,减少脂肪酸合成;增加ACC磷酸化水平,抑制ACC活性,减少脂肪酸的合成。
【图文】：

水摄入,共轭亚油酸,小鼠,食物

逦第３章实验结果逦逡逑第３章实验结果逡逑３．１饮食量、体重和器官指数逡逑３．１．１经过一个月的共轭亚油酸治疗，实验组５只小鼠饮水总量保持在５０ｇ／天，逡逑摄食总量下降到约３０ｇ／天；对照组小鼠饮水总量逐渐增多到约１００ｇ／天，摄食总逡逑量增加到约８０ｇ／天。实验组小鼠的水和食物摄入量显著降低（图３－１－１Ａ，，邋Ｂ）。逡逑

共轭亚油酸,处理组,对照组,实验组

图３－１－２共轭亚油酸处理组与对照组小鼠体重改变逡逑Ｆｉｇ．３－１－２邋Ｂｏｄｙ邋ｗｅｉｇｈｔ邋ｃｈａｎｇｅｓ邋ｏｆ邋ｃｏｎｔｒｏｌ邋ａｎｄ邋ＣＬＡ邋ｇｒｏｕｐ．逡逑３．１．３实验组小鼠肝脏指数明显高于对照组（ｐ＜０．００１），其他器官指数没苻出现显逡逑著差异（见图３－１－３）。逡逑０．１５－１逦—逡逑＾逦Ｃｏｎｔｒｏｌ邋ｇｒｏｕｐ逡逑＾逦Ｅ２３邋ＣＬＡ邋ｇｒｏｕｐ逡逑２邋ｏ．ｉｏ－逦？！■逡逑｜逡逑ｉ逦＿邋ｆｔ逡逑ＷＤ逦商：逡逑５邋０．０５－逦１邋：：：逡逑Ｉ邋？逡逑ａ逦■逦■邋■邋■■逦：：：：：：：逦■邋■■睡逦ｃｎ逦ｔ／ｌｌ逦ｉ？？？ｉ邋ｔ：＿：ｉ逡逑Ｕ．ＵＵ逦雪逦ｉ逦ｉ逦ｉ逦Ｉ逦Ｉ逡逑
【学位授予单位】：南方医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R587.1;R589.2;R575.5

【参考文献】