磷酸果糖激酶1在原发性痛风性关节炎患者外周血中的表达变化及临床意义

发布时间：2020-05-20 21:50

【摘要】：目的:探讨磷酸果糖激酶1(Phosphofructokinase 1,PFK1)在原发性痛风性关节炎(gouty arthritis,GA))患者外周血中的表达变化及其临床意义。方法:(1)收集115例原发性痛风性关节炎(gouty arthritis,GA)患者,[其中急性期痛风性关节炎(acute gout,AG)患者44例、间歇期痛风性关节炎(intercritical gout,IG)患者41例、慢性期痛风性关节炎(chronic gout,CG)患者30例]和48例健康体检者(healthy control,HC)的外周血、临床资料及常规检查资料;(2)采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测4组患者外周血单个核细胞(PBMCs)中PFKM、PFKL、PFKP mRNA表达水平;(3)酶联免疫吸附实验法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)、蛋白印迹(western blot)检测4组PBMCs中PFKM、PFKL、PFKP蛋白表达水平;(4)采用SPSS 22.0统计软件分析实验数据,正态计量资料统计描述采用均数±标准差(x±s),非正态计量资料统计描述采用中位数(四分位间距)M(Q),多组间比较采用秩转换非参数检验、秩次比较采用单因素方差分析,组间差异采用秩和检验,组间两两比较采用最小显著差数法(LSD法),变量间相关分析采用Spearman相关分析,以p0.05为差异有统计学意义。结果:(1)AG组ESR显著高于IG和CG组(p0.05),且CG组ESR显著高于IG组(p0.05);AG组hsCRP、GLOB浓度均显著高于HC、IG和CG组(p0.05),且CG组GLOB浓度显著高于IG组(p0.05);AG、CG组WBC、GR均显著高于HC和IG组(p0.05);AG组EOs显著低于HC、IG组(p0.05),且CG组EOs显著低于HC组(p0.05);AG、IG、CG组MCH显著低于HC组(p0.05);AG、CG组MCHC显著低于HC和IG组(p0.05);AG、IG组AST、ALT、GGT血浆浓度均高于HC组(p0.05),且CG组GGT血浆浓度也显著高于HC组(p0.05);IG组HDL-C血浆浓度显著低于AG和HC组(p0.05);AG、IG组VLDL-C血浆浓度显著高于HC组(p0.05);AG、CG组Crea浓度显著高于HC组(p0.05),且CG组还显著高于IG组(p0.05);AG、IG、CG组UA浓度显著高于HC组(p0.05);AG组GLU浓度显著高于HC组(p0.05)。(2)GA患者PBMCs中PFKM、PFKP mRNA表达水平与健康对照未见显著性差异(P0.05)。GA患者PBMCs中PFKL基因mRNA表达水平与健康对照未见显著性差异(P0.05),将GA患者按疾病阶段进一步分组两两比较,发现AG组PFKL mRNA表达水平显著低于HC组和CG组(分别P0.05,P0.01),而AG组与IG组比较差异无统计学意义(P0.05);IG组PFKL mRNA表达水平显著低于CG组(P0.05),而IG组与HC、AG组比较差异无统计学意义(P0.05);CG组PFKL mRNA表达水平显著高于AG、IG组(均P0.05),而CG组与HC组比较差异无统计学意义(P0.05)。(3)GA患者PBMCs中PFKM蛋白表达水平显著低于健康对照(P0.05),将GA患者按疾病阶段进一步分组两两比较,AG组、IG组PFKM蛋白表达水平均显著低于HC组(P0.05),而CG组与HC组比较差异无统计学意义(P0.05)。GA患者PBMCs中PFKL、PFKP蛋白表达水平与健康对照比较差异无统计学意义(P0.05)。(4)PFKL mRNA与实验室相关指标进行Spearman相关性分析发现:AG组PFKL mRNA表达量与PLT呈负相关(r=-0.341,P=0.045);CG组中PFKL mRNA表达量与hsCRP呈正相关r=0.648,P=0.043)。结论:(1)痛风不同病变阶段的炎症反应不同,痛风患者易出现肝、肾功能损害及红细胞血红蛋白代谢、糖代谢异常,证明在痛风间歇期和慢性期降尿酸维持达标的重要性。(2)证实PFK1三种亚型的基因和蛋白在原发性痛风性关节炎患者及健康人的单个核细胞中均有表达,且未见在原发性痛风患者出现明显缺陷,这可能是与Ⅶ型糖原贮积病所致继发性痛风的重要区别。(3)在痛风病变过程中磷酸果糖激酶肌肉型、磷酸果糖激酶肝脏型的基因转录水平与蛋白表达量不一致,血小板和C反应蛋白在痛风病变过程中与磷酸果糖激酶肝脏型mRNA表达是否存在不同的调节?尚需进一步研究证实。
【图文】：

总RNA电泳图

PFKM基因引物标准曲线
【学位授予单位】：川北医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R589.7

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本文编号：2673245