腺病毒36型在诱导人脂肪源性干细胞棕色分化中的作用初探

发布时间：2020-06-03 08:06

【摘要】：目的:初步探讨腺病毒36型(adenovirus type 36,Ad36)在诱导人脂肪源性干细胞分化为棕色脂肪细胞中的作用。方法:(1)分别用鸡尾酒法和Ad36诱导hADSC分化为脂肪细胞,于诱导第2、4、6、8天油红O染色观察细胞成脂情况。(2)分别收取鸡尾酒法诱导组和Ad36诱导组第0、2、4、6、8天的细胞,RT-qPCR方法检测两组中的LncRNA ROR,棕色脂肪细胞分化标记基因Cidea、Dio2、Fgf21、Ucp1、Prdm16,线粒体呼吸链和氧化磷酸化相关酶基因Cox5b、Atp5o、Atp6、Nd2以及Leptin mRNA表达水平;Western-blotting检测两组中上述基因蛋白质表达水平。(3)siRNA敲低LncRNA ROR后,Ad36诱导hADSC分化为脂肪细胞过程中,分别收取敲低组和对照组第0、1、2、3、4天的细胞,RT-qPCR和Western-blotting方法分别检测上述基因的mRNA和蛋白质表达水平。(4)利用透射电镜的方法观察并计算在诱导分化过程中鸡尾酒法诱导组和Ad36诱导组线粒体数量的变化和差异。结果:(1)油红O染色结果显示:hADSC分化为脂肪细胞过程中,鸡尾酒诱导组的脂肪细胞中脂滴较大,而Ad36诱导组则是颗粒状较小脂滴。(2)RT-qPCR和Western-blotting结果显示,hADSC分化为脂肪细胞过程中,与鸡尾酒法诱导组相比,Ad36诱导组中LncRNA ROR、Cidea、Dio2、Fgf21、Ucp1、Prdm16、Cox5b、Atp5o、Atp6、Nd2mRNA及蛋白质表达水平较鸡尾酒法诱导组显著升高,且差异有统计学意义(P0.01或P0.05);Leptin mRNA及蛋白质表达水平较鸡尾酒法诱导组显著降低,且差异有统计学意义(P0.01)。(3)siRNA敲低LncRNA ROR后,Ad36诱导hADSC分化为脂肪细胞过程中,与对照组相比,Cidea、Dio2、Fgf21、Ucp1、Prdm16、Cox5b、Atp5o、Atp6、Nd2 mRNA及蛋白质表达水平较对照组显著降低,且差异有统计学意义(P0.01或P0.05)。(4)透射电镜观察到,在脂肪细胞分化过程中,与鸡尾酒法诱导组相比,Ad36诱导组细胞内的线粒体数量显著升高,且差异有统计学意义(P0.01或P0.05)。结论:Ad36可能通过上调LncRNA ROR加快了线粒体氧化磷酸化和能量消耗,进而促进了hADSC向棕色脂肪细胞分化。
【图文】：

鸡尾酒,细胞,比例尺,放大倍数

2336 和鸡尾酒诱导 hADSC 细胞成脂比较(油红 O 染色）(放大倍数：400×，，比例尺 Oil red O staining hADSC cells after induced by adinovirus 36 or cocktail meth(magnification: 400 x, scale: 50 microns)A、B、C、D 分别为 Ad36 诱导第 2、4、6、8 天的细胞 C and D,respectively, induce the cells of the 2nd, 4th, 6th and 8th days of Ad36 mE、F、G、H 分别为鸡尾酒法诱导第 2、4、6、8 天的细胞 G, and H, respectively, induce the cells of the 2nd, 4th, 6th and 8th days of the c

鸡尾酒,表达差异,脂肪细胞,分化标记

脂肪细胞过程中，Ad36 诱导组和鸡尾酒法胞分化标记基因、线粒体呼吸链和氧化磷酸化检测脂肪细胞过程中，Ad36 诱导组和鸡尾酒法诱测鸡尾酒法诱导 hADSC 分化过程中，LncRNA ROADSC differentiation ,Ad36 induction and cocktail merences in the levels of mRNA expression of LncRNA均数±标准差第 0 天第 2 天第 4 天第1.14±0.163.26±0.45 10.6±0.66 19.0 1.87±2.19 4.03±0.56 6.6P=0.008 P=0.006 P=
【学位授予单位】：新疆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R589.2

【参考文献】