不同浓度雌激素替代治疗卵巢去势大鼠骨质疏松中血管形成的作用

发布时间：2020-06-27 13:48

【摘要】：目的通过研究早期补充不同剂量雌激素对卵巢去势大鼠各项骨参数、血管参数及局部骨组织相关蛋白血管内皮生长因子(VEGF)、骨保护素(OPG)、雌激素受体beta(ERβ)和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)表达的影响,探讨绝经后骨质疏松的不同浓度雌激素替代治疗中血管形成所发挥的不同作用。方法取6周龄SD大鼠共计120只,随机分为假手术组(SHAM)、卵巢去势组(OVX)、雌激素替代治疗组(OVX+E2),其中雌激素替代治疗组再根据不同浓度分为3组:高浓度50mg/kg/次(H)、正常浓度20mg/kg/次(N)、低浓度5mg/kg/次(L),实验共分为5组,每组24只;卵巢切除后第三天随即开始隔天注射不同浓度雌激素,模型组与假手术组注射同样体积溶剂。术后6周,处死大鼠取出股骨,通过micro CT检测骨密度和骨微结构,western blot检测局部骨组织中ERβ、VEGF、Rankl和OPG蛋白表达量,通过CD31免疫荧光及硅胶灌注成像分析股骨近端的血管分布。结果(1)卵巢去势大鼠破骨细胞破骨活动活跃,雌激素替代治疗后,破骨细胞表达RANKL明显抑制。卵巢去势大鼠骨微结构较假手术组明显破坏,其破坏程度均可被不同浓度雌激素补充所改善。(2)卵巢切除大鼠股骨骨密度明显低于假手术组,不同浓度雌激素替代治疗组,但高剂量雌激素注射组骨密度低于正常剂量雌激素注射组。(3)雌激素替代治疗后局部骨组织内ERβ有所下降,VEGF上升,且与雌激素浓度相关。CD31免疫荧光及微血管硅胶灌注显示,雌激素替代治疗后局部微血管形成增加,且与雌激素浓度相关。结论卵巢去势后大鼠骨质疏松的雌激素替代治疗可能与雌激素促进局部血管形成相关,该作用可能与ERβ介导的VEGF改变相关。与此同时,雌激素促进血管生成在骨骼中并不是完全有利的作用,当雌激素过量时,血管形成增加,骨密度反而低于正常剂量雌激素组,其中的具体机制还有待进一步的研究。
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R580
【图文】：

第二章 实验材料和方法 不同浓度雌激素替代治疗卵巢去势大鼠骨质疏松中血管形成的作用成一凹陷，从肉眼观察下的脂肪凹陷处用无齿镊轻提脂肪，就可发现呈粉红色桑椹状卵巢。1.1.5 切除： 用无齿镊探入腹腔将卵巢及其周围脂肪组织连带输卵管末端提出体外，注意动作轻柔，使用血管钳在子宫末端与卵巢之间的最细处夹闭，0 号手术线结扎输卵管与卵巢动脉，切除结扎远端全部组织；松开止血钳观察是否是否仍有血液渗出，必要时再次结扎一道，将剩余还纳入腹腔，过程中注意无菌操作，分别缝合肌肉层和皮肤，酒精棉球清理手术切口。1.1.6 术后复苏：保持术后大鼠侧卧位，防止舌后坠引发窒息，同时注意保暖。

9 2，A 将大鼠仰卧位固定于操作台；B 分离皮下组织并游离腹主动脉；C 行置管；D 生理盐水灌注；E 灌注 Microfil 溶液；F 足趾变黄表示灌注成功。骨组织冰冻切片1 取材：颈椎脱臼处死大鼠后立即取出股骨组织，尽快取材，防止组织发生2 速冻：将组织块平放于特制小盒内（直径约 2cm），然后将特制小盒缓缓

【参考文献】

相关期刊论文 前3条

1 陈瑛;蔺莉;金华;;绝经早期和绝经晚期小鼠主动脉病理改变及雌激素受体表达的对比研究[J];中国全科医学;2010年30期

2 刘晓东;邓廉夫;王君;齐进;周琦;王晋申;魏立;朱雅萍;Clemens TL;;低氧诱导因子-1α在绝经后骨质疏松中调控作用的实验研究[J];中华外科杂志;2007年18期

3 孙兰,杨京,刘景生;小剂量雌激素对去卵巢骨质疏松大鼠骨小梁结构的影响[J];中国医学科学院学报;2001年03期

本文编号：2731895