糖尿病前期血小板miR-103b水平变化的临床意义及功能研究

发布时间：2020-07-09 08:50

【摘要】：目的:研究表明,miR-103与2型糖尿病胰岛素抵抗及糖代谢密切相关。循环SFRP4水平是独立于其它已知糖尿病风险因子的糖尿病超前诊断标志物。最近研究揭示,血小板富含miR-103b,然而其具体分子调控机理仍不清楚。本研究拟查明miR-103b对SFRP4靶向调控关系,深入调查糖尿病前期人群及糖尿病患者血小板miR-103b及其靶标SFRP4的水平变化及作用机制,探讨血小板miR-103b作为糖尿病前期潜在分子标记物的临床意义。方法:收集2014年10月~2016年6月我校附属医院就诊人群,分组为糖尿病前期人群组(pre-DM,n=48),糖尿病无并发症患者(NCDM,n=47)以及正常健康人群(n=50)的外周血样。利用MACS免疫磁珠分离纯化制备去白细胞血小板样本;qRT-PCR检测血小板miR-103b及SFRP4 mRNA水平变化;ELISA检测血小板SFRP4蛋白水平;结合生物信息学分析和荧光素酶报告基因实验研究miR-103b对SFRP4的靶向调控作用,进而体外细胞转染miR-103b模拟物(mimics)、miR-103b抑制剂(inhibitors)及相应阴性对照(NC)验证靶向调控关系;Person分析血小板miR-103b和SFRP4水平的临床相关性,并且应用受试者工作特征(ROC)曲线评估血小板miR-103b对糖尿病前期的诊断意义。结果:miR-103家族成员具有高度保守性,其中miR-103b定位于人染色体5q34。并且,miR-103b能够直接结合SFRP4 mRNA 3'-UTR区从而直接靶向负调控SFRP4表达。miR-103b在pre-DM人群血小板中表达水平显著低于Control组,并且NCDM组血小板miR-103b水平也显著低于Control组。相对的,pre-DM组和NCDM组血小板SFRP4 mRNA和蛋白水平则显著高于Control组。Person相关性分析结果发现各组中血小板SFRP4与miR-103b表达水平呈显著负相关性。ROC曲线分析结果显示,血小板miR-103b水平鉴定pre-DM人群的曲线下面积(AUC)及其95%置信区间(CI)为0.934(95%CI:0.878~0.990),临界值为1.794,灵敏度和特异度分别为90.0%和89.4%。结论:血小板miR-103b鉴别2型糖尿病前期人群(pre-DM)具有高度敏感性和特异性,临床诊断价值较高,提示血小板miR-103b是潜在的糖尿病早期临床诊断标记物。
【学位授予单位】：西南医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R587.1

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本文编号：2747234